一、补肾生血颗粒剂对共培养的肾小管上皮细胞和肾成纤维细胞产生细胞外基质的影响（论文文献综述）
王瑞洁[1]（2021）在《活血除痹汤干预Akt-mTOR自噬通路治疗硬皮病硬化期模型小鼠的机制研究》文中研究表明目的:验证氧化应激异常、自噬异常反应在硬皮病硬化期模型小鼠皮损中存在,并观察活血除痹汤对硬皮病硬化期模型小鼠皮损氧化应激、Akt-mTOR自噬通路、促纤维化因子和胶原蛋白的调控作用,进一步探究活血除痹汤对硬皮病硬化期的治疗作用和机制。方法:（1）实验一将60只Balb/c小鼠随机分为中药高、中、低剂量组,阳性对照组,模型组,空白对照组,共6组,每组10只。空白对照组予灭菌注射用水皮下注射,其余组予400μg/ml博来霉素皮下注射,均每日1次0.lml,连续4周进行造模。其后中药高、中、低剂量组分别予浓度0.46g/ml、0.23g/ml、0.115g/ml的活血除痹汤,阳性对照组予0.013mg/ml的秋水仙碱,模型组和空白对照组予灭菌注射用水,均每日1次,每次0.2ml灌胃,连续4周。于第8周末处死小鼠采集皮肤标本,应用荧光探针法检测皮肤组织ROS含量,HE染色镜下观察皮肤厚度和病理改变,Masson染色镜下观察胶原含量,免疫组化和Western Blot法检测皮肤组织PDGF、TGF-β表达水平,免疫组化检测PDGF、TGF-β表达部位。（2）实验二在小鼠硬皮病造模及药物干预后,应用免疫组化和Western Blot法检测皮肤组织p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR、LC3-Ⅰ/Ⅱ表达水平,免疫组化检测Akt、mTOR、LC3-Ⅰ/Ⅱ表达部位。结果:（1）实验一:模型组小鼠体重较空白对照组显着下降（P<0.01）,造模区域皮肤硬化、增厚,无毛发长出;病理变化可见表皮、真皮明显增厚,可见炎性细胞浸润,毛囊等附属器结构萎缩,脂肪层厚度明显降低,胶原纤维增粗、增多,结构紊乱,染色加深。模型组皮损皮肤厚度、ROS、PDGF和TGF-β水平较空白对照组显着增高（P<0.01）,胶原表达增高（P<0.05）。药物干预后相较空白对照组:①阳性对照组和中药高剂量组体重和皮肤厚度显着下降（P<0.01）;中药中、低剂量组皮肤厚度下降（P<0.05）。②阳性对照组和中药高剂量组可显着下调胶原表达（P<0.01）,中药中、低剂量中药组可下调胶原表达（P<0.05）;③阳性对照组和中药高剂量组均可显着下调ROS水平（P<0.01）,阳性对照组效果与中药高剂量组无显着差异（P>0.05）。④阳性对照组可显着下调PDGF水平（P<0.01）,各中药组下调PDGF均有统计学差异（P<0.05）,阳性对照组与中药高、中剂量组疗效无统计学差异（P>0.05）,优于中药低剂量组（P<0.05）。⑤阳性对照组可显着下调TGF-β水平（P<0.01）,且疗效优于中药各组（P<0.05）。中药高剂量组和中药低剂量组可下调TGF-β水平（P<0.05）。相关性分析显示皮肤组织TGF-β水平与PDGF水平极强相关（r=0.964,P<0.01）,与皮肤厚度相关（r=-0.578,P<0.05）,PDGF水平与皮肤厚度强相关（r=0.616,P<0.01）;ROS含量与TGF-β强相关（r=0.691,P<0.01）,与PDGF强水平相关（r=0.684,P<0.01）,与皮肤厚度强相关（r=0.635,P<0.01）。（2）实验二:模型小鼠皮肤Akt、mTOR活化水平和LC3-Ⅰ/Ⅱ表达水平较空白对照组均显着下调（P<0.01）。药物干预后:①各用药组可显着上调p-Akt/Akt水平（P<0.01）,阳性对照组效果与中药高剂量组无显着差异（P>0.05）,阳性对照组效果显着优于中药中剂量组和中药低剂量组（P<0.05,P<0.01）,中药高剂量组效果优于中药低剂量组（P<0.05）。②各用药组可显着上调p-mTOR/mTOR水平（P<0.01）,中药高、中剂量组效果优于阳性对照组（P<0.01、P<0.05）,中药高剂量组疗效优于中药中、低剂量组（P<0.01、P<0.05）。③各用药组可显着上调LC3-Ⅰ/Ⅱ表达水平（P<0.01）,阳性对照组效果与中药高剂量组无显着差异（P>0.05）,阳性对照组效果显着优于中药中剂量组和中药低剂量组（P<0.01）,中药高剂量组效果优于中药中、低剂量组（P<0.01）,中药中剂量组疗效优于低剂量组（P<0.05）。相关性分析显示ROS浓度与Akt磷酸化水平强负相关（r=-0.610,P<0.01）,与LC3-Ⅰ/Ⅱ水平强负相关（r=-0.482,P<0.01）,与mTOR水平负相关（r=-0.508,P<0.01）;皮肤Akt磷酸化水平与TGF-β水平负相关（r=-0.562,P<0.05）,与 PDGF 水平强负相关（r=-0.689,P<0.01）;mTOR 磷酸化水平与PDGF水平负相关（r=-0.556P<0.05）,与皮肤厚度负相关（r=-0.496,P<0.05）;皮肤LC3-Ⅰ/Ⅱ水平与TGF-β水平强负相关（r=-0.734,P<0.01）,与PDGF水平极强负相关（r=-0.843,P<0.01）,与皮肤厚度负相关（r=-0.556,P<0.05）。结论:①硬皮病模型小鼠皮损外观及病理变化符合硬皮病硬化期皮肤损害表现。模型小鼠皮肤组织中ROS、PDGF、TGF-β水平均明显升高,且皮肤组织ROS含量与TGF-β、PDGF水平和皮肤厚度均有相关性,证明硬皮病皮损中存在异常氧化应激反应,且氧化应激与PDGF、TGF-β在硬皮病发病机制中存在一定的关联。②模型小鼠皮肤组织中Akt和mTOR磷酸化水平及表达均明显降低,自噬标记物LC3-Ⅰ/Ⅱ表达降低,证实硬皮病皮肤中有自噬异常降低的现象。Akt、mTOR、LC3-Ⅰ/Ⅱ活性及表达与TGF-β、PDGF、皮肤厚度存在负相关性,表明自噬可抑制纤维化进程,其机制可能与抑制促纤维化因子表达和自噬过程降解胶原有关。③相关性分析结果显示皮肤组织ROS与Akt、mTOR、LC3-Ⅰ/Ⅱ活化、表达存在负相关性,表明硬皮病中存在的氧化应激可通过调控Akt-mTOR通路活性进而抑制细胞自噬。④应用活血除痹汤和秋水仙碱治疗后,ROS受到抑制,自噬相关因子Akt、mTOR、LC3-Ⅰ/Ⅱ活性及表达增强,促纤维因子TGF-β、PDGF降低,表明二者可能通过降低组织氧化应激进而促进自噬,从而加强对胶原的降解能力,同时可下调促纤维化因子,从而减少皮肤胶原合成。⑤中药不同剂量组的调控效果随用药浓度而有变化,表明活血除痹汤可能是剂量依赖性药物,并存在一定的作用阈值,本实验中多数高剂量应用效果更佳。
袁晶[2]（2021）在《绝经后高血压患者中医证型分布特点及淫羊藿苷干预的相关机制研究》文中提出目的:1.评价补肾法联合降压药治疗女性绝经后及围绝经期高血压的有效性和安全性。2.探讨绝经后高血压患者的中医证型分布及动态血压特点。3.探讨淫羊藿苷（icariin,ICA）对雌性去势SHR循环和心肌组织肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）的调节作用及相关机制。方法:1.系统评价和Meta分析计算机检索中国知网、维普数据库、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献数据库、PubMed、Embase、The Cochrane Library 7个数据库,搜集有关补肾法联合降压药治疗绝经后及围绝经期高血压的随机对照试验。应用Rev Man 5.3和Stata 14.0软件进行Meta分析、发表偏倚检测、敏感性分析、亚组分析,采用TSA 0.9软件对降压疗效进行试验序贯分析。2.横断面研究以绝经后高血压患者作为研究对象,采用横断面研究方法分析一般资料、中医证型分布、昼夜节律分布特点;进一步将纳入患者分为绝经<10年组和绝经≥10年组,分析两组患者动态血压参数是否存在差异;分析年龄与动态血压参数的相关性;血压变异性（blood pressure variability,BPV）用标准差（standard deviation,SD）和变异系数（coefficient of variation,CV）表示,采用多元线性回归方法分析各变量与BPV的关系。3.动物实验9周龄雌性去势SHR48只,随机分为6组,模型组（SHR组）、雌二醇组（SHR+E2组）、ICA低剂量组（SHR+LI组）、ICA中剂量组（SHR+MI组）、ICA高剂量组（SHR+HI组）、ICA中剂量+雌激素受体拮抗剂ICI182780组（SHR+MI+ICI组）。9周龄雌性去势WKY8只作为正常对照组（WKY组）。SHR+E2组给予戊酸雌二醇（0.1 mg/kg/day）灌胃,ICA低、中、高剂量组分别给予ICA 10 mg/kg/day、20 mg/kg/day、40 mg/kg/day灌胃,SHR+MI+ICI组给予ICA 20 mg/kg/day灌胃,并予氟维斯群注射液52 mg/kg/month皮下注射。监测各组大鼠体重、血压及心率;对心脏、脾脏及肾脏进行称重并计算脏器系数;采用ELISA法检测各组大鼠血清AngⅡ、Ang（1-7）、E2水平;采用Western-blot法检测各组大鼠心肌组织 AGT1R、MAS1、ACE1、ACE2、GPR30、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达水平。结果:1.补肾法联合降压药治疗绝经后及围绝经期高血压的系统评价和Meta分析（1）Meta分析结果显示:最终纳入14篇文献,共1139例患者。补肾法联合降压药治疗绝经后及围绝经期高血压的降压疗效、更年期症状疗效优于西药组;SBP水平、DBP水平、kupperman评分、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）水平低于西药组;雌二醇（estradiol,E2）水平高于西药组。（2）不良反应发生率:补肾法联合降压药组低于西药组。（3）发表偏倚:对降压疗效绘制漏斗图并进行Egger’s法检验,提示纳入文献存在发表偏倚。（4）降压疗效的试验序贯分析:结果提示Meta分析可能过早出现阳性结果,可能存在假阳性结果。2.绝经后高血压患者中医证型分布及动态血压特点研究（1）本次研究共纳入214例患者,阴阳两虚型患者所占比例最高。（2）所有纳入患者中,非勺型昼夜节律患者所占比例最高。（3）绝经≥10 年组的 24hSBP、nSBP、收缩压极差（maximum-minimum difference between systolic blood pressure,MMD）、24hSBPSD、dSBPSD、24hSBPCV、dSBPCV、dDBPCV、nDBPCV 高于绝经<10 年组（P<0.05 或P<0.01）。（4）24hSBP、dSBP、nSBP、MMD、24hSBPSD、dSBPSD、nSBPSD、dSBPCV、dDBPCV 与年龄呈正相关（P<0.05 或P<0.01）;24hDBP、SBP-BPF、dDBP、nDBP、Hr与年龄呈负相关（P<0.05或P<0.01）。（5）24hSBPSD的相关因素有:MMD、MAP、日间血压负荷;24hDBPSD的相关因素有:24hDBP、DBP-BPF、MMD、高血压3级、BUN;24hSBPCV的相关因素有:24hSBP、24hDBP、MMD、日间血压负荷;24hDBPCV的相关因素有:MMD、MAP、SBP-BPF、DBP-BPF、BUN。3.淫羊藿苷通过调节RAS对雌性去势SHR发挥血压保护作用（1）平均动脉压（MAP）:与WKY组比较,SHR组MAP升高（P<0.05）;与SHR 组比较,SHR+E2 组、SHR+LI 组、SHR+MI 组、SHR+HI 组 MAP 降低（P<0.05）;与 SHR+MI 组比较,SHR+MI+ICI 组 MAP 升高（P<0.05）。（2）心率:与SHR组比较,SHR+LI组、SHR+MI组、SHR+HI组心率降低（P<0.05 或P<0.01）。（3）脏器系数:①心脏系数:与WKY组比较,6组SHR的心脏系数均升高（P<0.01）;与SHR+MI组比较,SHR+MI+ICI组心脏系数升高（P<0.05）。②左肾系数:与WKY组比较,SHR组左肾系数升高（P<0.01）;与SHR组比较,SHR+E2组左肾系数降低（P<0.05）。③右肾系数:与WKY组比较,SHR组右肾系数升高（P<0.01）;与SHR组比较,SHR+E2 组、SHR+LI 组、SHR+MI 组、SHR+HI 组左肾系数降低（P<0.05 或 P<0.01）。④脾脏系数:与WKY组比较,SHR组脾脏系数升高（P<0.01）;与SHR+MI组比较,SHR+MI+ICI组脾脏系数升高（P<0.05）。（4）ACE1-AngⅡ-AT1R轴:①ACE1蛋白:与WKY组比较,SHR组ACE1蛋白表达水平升高（P<0.01）;与SHR组比较,SHR+MI组、SHR+HI组ACE1蛋白表达水平降低（P<0.05）。②AngⅡ含量:与WKY组比较,SHR组AngⅡ含量升高（P<0.01）;与SHR组比较,SHR+E2组、SHR+MI 组、SHR+HI 组 AngⅡ含量降低（P<0.05 或P<0.01）。③AGT1R蛋白:与SHR组比较,SHR+MI组AGT1R蛋白表达水平升高（P<0.05）。（5）ACE2-Ang（1-7）-MasR轴:①ACE2蛋白:与WKY组比较,SHR组ACE2蛋白表达水平升高（P<0.05）。②Ang（1-7）含量:与WKY组比较,SHR组Ang（1-7）含量升高（P<0.01）;与SHR+E2组比较,SHR+LI组Ang（1-7）含量升高（P<0.01）;与SHR+MI组比较,SHR+MI+ICI 组 Ang（1-7）水平降低（P<0.01）。③MAS1蛋白:与WKY组比较,SHR组MAS1蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）。（6）E2及其受体GPR30:①E2含量:与SHR组比较,SHR+E2组、SHR+LI组、SHR+MI组、SHR+HI组的E2含量有升高趋势（P>0.05）。②GPR30蛋白:与WKY组比较,SHR组GPR30蛋白表达水平有升高趋势（P>0.05）。（7）ERK1/2 通路:①p-ERK1/2蛋白:与WKY组比较,SHR组p-ERK1/2蛋白表达水平有升高趋势（P>0.05）;与SHR组比较,SHR+HI组p-ERK1/2蛋白表达水平降低（P<0.05）。②p-ERK1/2/ERK1/2:与 WKY 组比较,SHR 组 p-ERK1/2/ERK1/2 有升高趋势（P>0.05）;与 SHR 组比较,SHR+E2 组、SHR+HI 组 p-ERK1/2/ERK1/2 有降低趋势（P>0.05）;与 SHR+MI 组比较,SHR+MI+ICI 组 p-ERK1/2/ERK1/2 升高（P<0.01）。结论:1.针对女性绝经后及围绝经期高血压患者,补肾法联合降压药能够降低患者的收缩压和舒张压水平、改善更年期症状、改善性激素水平,疗效优于西药组。2.阴阳两虚证是绝经后高血压患者最常见的中医证型,且绝经年限较长的高血压患者的BPV高于绝经年限较短者。3.ICA能够降低雌性去势SHR的血压和心率,上述作用与调节循环和心肌组织RAS 有关。ICA 可以抑制 ACE1-AngⅡ-AT1R 轴,对 ACE2-Ang（1-7）-MasR 轴具有升高的趋势,同时该作用的发挥与抑制ERK1/2通路有关。
马凯玲[3]（2021）在《固元通络法治疗慢性肾脏病肾性骨病（肾虚络瘀证）的临床研究》文中研究表明目的本次临床观察旨在明确以固元通络立法,主方六味地黄合桃红四物汤治疗慢性肾脏病肾性骨病（肾虚络瘀证）的临床疗效及安全性,对其与单纯使用西药治疗在缓解临床症状、改善实验室指标方面的优势进行科学客观评价,为该理论指导本病的治疗提供临床依据,从中药和西药联合的角度提升本病的临床疗效。方法将符合标准的病例66例患者随机平均分为治疗组和对照组各33例,入组患者均先进行常规治疗以保证均衡可比,待一般状况稳定后开始治疗,对照组予以西医常规治疗补充钙剂及骨化三醇,治疗组在此基础上联合六味地黄合桃红四物汤,治疗时间为12周,观察治疗前后中医证候积分、甲状旁腺激素、血钙、血磷、血肌酐、尿素氮及安全性指标的情况。结果1.总有效率比较:治疗组有效率90.6%,对照组有效率65.6%,经检验P<0.05,具有统计学差异。2.中医证候积分及有效率比较:治疗12周后治疗组和对照组证候积分较本组治疗前相比P<0.05,具有统计学差异,治疗组治疗12周较同一时期对照组比较P<0.05,具有统计学差异,治疗12周后治疗组中医证候有效率有效率93.8%,对照组中医证候有效率68.8%,经检验P<0.05,具有统计学差异。3.血钙、血磷、甲状旁腺激素比较:两组治疗12周血钙、血磷、甲状旁腺激素水平较本组治疗前、治疗6周比较P<0.05,具有统计学差异;治疗组治疗6周、12周较同时期对照组比较P<0.05,具有统计学差异。4.肌酐、尿素氮比较:两组患者治疗12周较治疗前比较P<0.05,具有统计学差异;治疗组治疗6周较同时期对照组相比P>0.05,无统计学差异,治疗组治疗12周较同时期对照组相比P<0.05,具有统计学差异。5.安全性分析:两组患者红细胞、白细胞、血小板、肝功未见明显异常,治疗过程安全,无不良事件。结论六味地黄合桃红四物汤能够改善CKD3-4期肾性骨病患者的临床不适症状、升高血钙、降低血磷及甲状旁腺激素,纠正钙磷代谢,疗效优于单纯使用西药治疗组,一定程度上延缓肾功能进展,治疗安全,疗效确切,固元通络法指导本病治疗切实可行,中西医结合治疗本病存在优势,可在临床辨证准确的基础上推广应用。
秦浩[4]（2021）在《基于NF-κB/HIF-1α通路探讨“黄芪-丹参”药对干预UUO肾间质纤维化模型的机制研究》文中提出目的:1.基于数据挖掘方法对王耀光教授治疗慢性肾脏病的临床资料进行回顾性研究,总结王教授治疗本病的处方用药特点、组方规律,以发展名中医的临床经验及学术思想,进一步丰富慢性肾脏病的中医治疗方法。2.观察“黄芪-丹参”药对对大鼠肾功能及病理的影响。3.观察“黄芪-丹参”药对干预单侧输尿管梗阻（Unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠模型肾间质纤维化的机制。方法:研究一:收集王耀光教授2018年1月-2019年6月治疗的符合2-4期慢性肾脏病研究标准的325例次医案资料,随后纳入中医传承辅助平台系统（V3.0）,使用统计报表系统和数据分析系统对病案的药物频次、四气五味、归经、功效信息进行统计分析,利用关联规则分析和聚类分析挖掘王教授治疗慢性肾脏病的常用药物、常用药物组合等。研究二:健康SD大鼠60只,随机将大鼠分为假手术组、实验模型组、中药低剂量组（2.7g/kg/d）、中药中剂量组（5.4g/kg/d）、中药高剂量组（10.8g/kg/d）、氯沙坦钾组（9mg/kg/d）。使用单侧输尿管梗阻技术建立肾间质纤维化模型,从术后第一天开始给药灌胃。各组大鼠于术后14天处死,收集大鼠24h尿液及血清,取梗阻侧肾脏,将部分肾脏于4%多聚甲醛及2.5%戊二醛液中固定,其余部分放入液氮保存。观察大鼠体重、肾重/体重系数;检测大鼠肾功能指标（Scr,BUN）;HE染色、Masson染色观察大鼠肾组织病理变化。研究三:取研究二中的六组大鼠肾脏标本,Western Blot检测肾组织上皮-间充质转分化指标（α-SMA、E-cad）,炎症指标（P65、p-P65）,缺氧诱导因子HIF-1α,细胞外基质（ColⅠ、FN）的蛋白表达情况;Real-time PCR检测大鼠肾组织（ColⅢ、P65、HIF-1α）的mRNA表达情况。结果:1.数据挖掘结果根据临床收集的325例处方数据分析结果可知,王耀光教授治疗慢性肾脏病常用药物功效以清热活血补益类为主;药物频次前十位分别是丹参、黄芪、泽兰、土茯苓、白术、牡蛎、槐花、枳壳、地肤子、白扁豆;药物以寒、温性为主;五味以甘苦辛为主;归经主要以肝脾经为主;在关联规则组方规律中,出现了10个药物组合,频次前三位主要是“丹参-黄芪”、“丹参-泽兰”、“丹参-茯苓”;根据最高频次组合“黄芪-丹参”所用药量分析可知,黄芪常用量为30g,丹参常用量为10g;在聚类分析组方规律中,得到4组新处方。2.大鼠一般情况大鼠在饲养及实验过程中生存状况良好,随着时间推移,各组大鼠体重出现增长,但各手术组与假手术组相比,体重均明显下降,经过药物治疗后,中药中剂量组和阳性药氯沙坦组体重显着增加（P<0.01）;14天大鼠在术后均出现了患侧肾重/体重系数的异常增加,模型组与假手术组相比明显增高。经过药物治疗后发现中药中剂量组、中药高剂量组、阳性药氯沙坦钾组的肾重/体重系数下降最显着（P<0.001）。3.大鼠肾功能及病理改变模型组与假手术组相比,血清肌酐明显增高（P<0.001）;使用药物治疗后,除中药低剂量组外,另外三个药物治疗组与模型组相比显着下降（P<0.001）;14天大鼠模型组与假手术组相比出现了血清尿素氮增高（P<0.01）,中药中、高浓度剂量和氯沙坦钾三个治疗组的尿素氮下降明显（P<0.01）。HE染色显示假手术组肾组织中肾小球肾小管等结构清晰,模型组出现肾小球数量减少、结构变形,球囊腔各处宽窄不一,肾小管的改变是管腔明显扩张、出现空泡变性,小管细胞水肿,间质内充斥大量炎症细胞,并且伴有纤维化改变;中药各剂量组和氯沙坦钾组与模型组相比,肾小球、肾小管、间质部分的病理情况都有所改善。Masson染色显示:模型组的胶原容积与假手术组相比明显升高（P<0.001）,14天大鼠各个药物治疗组与模型组相比明显减少（P<0.001）。4.“黄芪-丹参”调节NF-κB/HIF-1a信号通路及EMTWB结果表明,模型组大鼠的FN、ColⅠ蛋白水平表达明显升高（P<0.001）;对于FN蛋白,中药中剂量组、高剂量组与模型组比较表达明显降低（P<0.001）,阳性药组显着下降（P<0.01）;对于ColⅠ蛋白,三个不同中药剂量组和氯沙坦钾组与模型组相比表达显着降低（P<0.001）。与假手术组相比,模型组α-SMA蛋白明显升高（P<0.001）、E-cad蛋白表达明显减少（P<0.001）;与模型组相比,各药物治疗组α-SMA蛋白表达水平显着降低（P<0.01）,其中黄芪丹参中剂量干预效果最明显（P<0.001）;中药中剂量和氯沙坦钾治疗组E-cad蛋白表达显着升高（P<0.001）。与假手术组相比,模型组的P65蛋白、p-P65蛋白和HIF-1α蛋白均明显升高（P<0.01）;与模型组相比,中药中剂量组、高剂量组、氯沙坦钾组P65蛋白显着降低（P<0.01）;各药物治疗组p-P65蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;各药物治疗组的HIF-1α蛋白下降明显（P<0.001）。PCR结果显示模型组肾组织的ColⅢ、P65、HIF-1αmRNA水平明显升高（P<0.05）;各治疗组ColⅢmRNA表达均有所下降（P<0.05）;对于P65 mRNA表达改善情况来看,中药高剂量组和氯沙坦组减少最为明显（P<0.001）;在抑制HIF-1αmRNA表达方面各治疗组均有较好治疗效果（P<0.001）,其中中药中剂量组抑制效果最明显。结论:1.结合数据挖掘中药物频次、聚类分析、关联规则等分析结果可知,王耀光教授治疗慢性肾脏病常用药物功效为活血化瘀类、补虚类、清热类为主,多以补气活血治法作为慢性肾脏病的基本治法;“黄芪-丹参”、“丹参-泽兰”、“丹参-土茯苓”、“黄芪-泽兰”等药物组合是王教授的常用药对。2.“黄芪-丹参”药对可以改善UUO大鼠的一般情况,降低血清肌酐、尿素氮的水平,对大鼠的肾功能具有保护作用。3.“黄芪-丹参”药对可以通过调控NF-κB/HIF1α信号通路,降低P65、p-P65、HIF-1α的表达,抑制肾小管上皮细胞向间充质转分化、减少细胞外基质及胶原纤维的沉淀,从而延缓肾间质纤维化的进程。
张亮[5]（2021）在《基于中医象思维探讨肾衰饮干预慢性肾功能衰竭大鼠的机制研究》文中研究指明目的:基于中医象思维研究肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路、Fas/Fas L介导的凋亡途径、PI3K/Akt信号通路的影响,探讨该方防治慢性肾功能衰竭的作用机制。材料与方法:选取6周龄SPF级健康雄性SD大鼠84只,随机抽取12只大鼠为正常组,其余72只为造模组。造模组大鼠应用腺嘌呤（200mg/（kg·d））灌胃3周建立慢性肾功能衰竭大鼠模型,将造模成功大鼠再随机分为模型组、肾衰饮组、尿毒清组、P13K抑制剂组（LY组）及肾衰饮+LY组。正常组和模型组予0.9%Nacl溶液8ml/（kg·d）灌胃。肾衰饮组给予中药复方汤剂肾衰饮煎剂按生药量33.3g/（kg·d）灌胃。尿毒清组给予尿毒清颗粒以2.25g/（kg·d）浓度灌胃。LY组给予腹腔注射P13K抑制剂（LY294002）稀释液50mg/kg,周一次。肾衰饮+LY组在给予肾衰饮煎剂按生药量33.3g/（kg·d）灌胃基础上腹腔注射LY294002稀释液50mg/kg,周一次。以上各组大鼠均连续用药4周。各组分别留取大鼠血清及肾组织,检测各项指标。实验一:观察大鼠一般状态,肉眼观察肾脏外观形态,光镜下观察大鼠肾组织病理改变及TUNEL染色法检测凋亡细胞情况。全自动生化分析仪检验大鼠血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平。实验二:免疫印迹法（Western Blot法）和免疫组织化学法检测大鼠肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达情况。实验三:Western Blot法检测肾脏组织Fas、Fas L、Caspase8、Caspase3蛋白表达情况。实验四:Western Blot法检测肾脏组织Akt、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达情况。结果:1肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏形态学及肾功能的影响1.1肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠一般状态的影响正常组:精神状态良好,毛色光泽,较少有脱毛现象,活动正常,反应灵活,每日进食量及饮水量均正常,垫料气味较淡,大鼠便质如常排便未见异常。模型组:体重明显下降,精神状态萎靡,毛色干枯晦暗,并出现脱毛现象,反应迟钝,活动减少,进食量减少,饮水量增加,垫料气味臭秽,稀便。尿毒清组:体重不同程度下降,精神状态萎靡,毛色干枯、脱落,精神中度萎靡,反应略有迟钝,活动减少,进食量减少,饮水量增多,垫料气味臭秽,稀便。肾衰饮组:体重不同程度下降,精神轻度萎靡,毛色干枯脱毛现象较轻,反应尚可,活动度尚可,进食量尚可,饮水量略增加,垫料气味臭秽,可见便质如常排便未见异常。1.2肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏形态学的影响1.2.1肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织外观形态的影响与正常组比较,其余各组大鼠肾脏体积均不同程度的增大,其中模型组改变最为明显,尿毒清组其次,最后为肾衰饮组。与正常组比较,模型组大鼠肾脏组织表面均呈弥漫性细颗粒状改变,凹凸不平,被膜粘连,不易剥离,且外观颜色均明显发白,肉眼观察外观颜色发白程度:模型组>尿毒清组>肾衰饮组>正常组。沿肾门纵行剖开,除空白组外各组肾组织切面处均可见肾皮质不同程度变薄,且皮髓质界限欠清晰,其中模型组最明显,其他各组肉眼观察无明显区别。1.2.2肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠体质量及肾指数的影响各组大鼠实验前及造模第1周体质量比较无明显差异;与正常组比较,第2周、第3周造模组大鼠体质量明显降低（P<0.05）;治疗期间:第1周:与正常组比较,模型组、尿毒清组和肾衰饮组大鼠体质量明显降低（P<0.01）;第2周和第3周:与正常组比较,模型组与尿毒清组大鼠体质量明显降低（P<0.05）,肾衰饮组无明显差异;与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组大鼠体质量无明显差异;第4周:与正常组比较,模型组、尿毒清组和肾衰饮组大鼠体质量明显降低（P<0.01）,肾指数明显升高（P<0.01）,与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组大鼠体质量明显升高（P<0.05）,肾指数降低（尿毒清组P<0.01,肾衰饮组P<0.05）,尿毒清组与肾衰饮组大鼠体质量、肾指数比较无明显差异。1.2.3肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏病理学的影响苏木精-伊红（HE）染色结果:正常组可见肾小球、肾小管、系膜结构正常,间质未见增宽,无炎性细胞浸润。模型组可见肾小球囊腔变大,部分肾小管萎缩,小管的管壁薄厚不匀,肾小管上皮细胞弥漫空泡变性,成纤维细胞增多,系膜细胞增生明显,肾小球周围可见大量炎性细胞浸润。尿毒清组可见肾小管上皮细胞空泡变性减轻,系膜细胞轻度增生,部分区域伴有炎性细胞浸润。肾衰饮组可见成纤维细胞减少,系膜细胞轻度增生,部分区域伴有炎性细胞浸润。肾衰饮组在肾小管上皮细胞空泡变性及系膜细胞增生程度均低于尿毒清组。1.3肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠血清Scr、BUN水平的影响与正常组比较,模型组血清Scr、BUN水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组血清Scr、BUN水平均明显降低（P<0.01）,尿毒清组和肾衰饮组比较无统计学差异。2肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏细胞凋亡情况的影响TUNEL染色后显微镜下观察:正常组大鼠肾脏组织中细胞正常,未见阳性细胞;模型组大鼠肾脏细胞凋亡数量明显增多,且主要分布在髓质区;尿毒清组和肾衰饮组大鼠肾脏细胞凋亡指数较模型组降低（P<0.01）;尿毒清组和肾衰饮组相比差异无统计学意义。3肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平的影响ELISA法检测大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平明显升高（P<0.01）;与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平均明显降低（P<0.01）;与尿毒清组比较,肾衰饮组大鼠血清IL-6、TNF-α表达水平降低（P<0.05）。4肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平的影响Western blot法检测肾脏组织内TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平:与正常组相比,模型组大鼠肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）;与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组大鼠肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）,尿毒清组和肾衰饮组比较无统计学差异。免疫组织化学法检测各组大鼠肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达情况:光镜下观察,正常组肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达为阴性,模型组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白呈强阳性表达,尿毒清颗粒和肾衰饮干预后均能不同程度的减少TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达（P<0.01）,且两组之间无明显差异。5肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织Fas、Fas L、Caspase8、Caspase3蛋白表达的影响Western blot法检测肾脏组织Fas、Fas L、Caspase8、Caspase3蛋白表达:与正常组比较,模型组大鼠肾脏组织Fas、Fas L、Caspase8、Caspase3蛋白表达水平显着增高（P<0.01）;与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组大鼠肾脏组织Fas、Fas L、Caspase8、Caspase3蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）;尿毒清组和肾衰饮组相比差异均无显着性意义。6肾衰饮对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响各组大鼠肾脏组织Akt蛋白表达无明显差异。与正常组比较,模型组大鼠肾脏组织p-Akt蛋白表达水平降低（P<0.01）,p-Akt/Akt比值降低（P<0.01）;与模型组比较,P13K抑制剂组（LY组）大鼠肾脏组织p-Akt蛋白表达水平显着降低（P<0.01）,p-Akt/Akt比值显着降低（P<0.01）;与LY组比较,肾衰饮+LY组大鼠肾脏组织p-Akt蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,p-Akt/Akt比值显着升高（P<0.01）。结论:1基于中医象思维,根据肾藏象的病理之象,提出脾肾虚损是慢性肾功能衰竭发生和发展的病理基础,是产生毒邪的根源;毒邪（湿毒、痰毒、瘀毒）是加重病情进展恶化及迁延不愈的重要外因,证属本虚标实。2拟“抗毒、解毒、排毒”三法于一方,肾衰饮健脾益肾扶正以抗毒;祛湿涤痰化瘀以解毒;通腑泄浊以排毒,攻补兼施。3根据以上病因病机、治则治法,实验研究表明:（1）肾衰饮能够明显改善腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭模型大鼠的一般状态及肾功能,减轻肾脏组织病理损伤,抑制肾脏炎症反应和细胞凋亡,进一步抑制肾脏纤维化,达到治疗慢性肾功能衰竭的目的;（2）肾衰饮能够降低腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭模型大鼠肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达,从而抑制炎症反应,减轻肾脏炎性损伤;（3）肾衰饮能够降低腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭模型大鼠Fas、Fas L、Caspase8、Caspase3蛋白表达水平,对肾脏细胞凋亡起到抑制作用;（4）肾衰饮可能通过激活PI3K/Akt信号通路,进一步抑制其下游的效应靶点Fas L来抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾脏细胞凋亡。
刘琳娜[6]（2021）在《灸药结合调节糖尿病肾病大鼠FN/TGF-β1蛋白表达的机制研究》文中研究指明目的:本实验采用高脂高糖饲料喂养结合注射链脲佐菌素（STZ）的方法,建立2型糖尿病肾损害（diabetic nephropathy,DN）的动物模型,应用灸药结合,即中药贴敷神阙穴配合内服组方（金匮肾气丸合五子衍宗丸加减）,对DN模型大鼠进行干预性治疗,并以单一内服中药组方（金匮肾气丸合五子衍宗丸加减）及单一外敷神阙穴为对照,旨在通过检测模型大鼠血糖、肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血脂以及用蛋白质免疫印迹（Western Blot,WB）法检测肾组织中转化生长因子（TGF-β1）及纤维连接蛋白（FN）的含量,探讨灸药结合对DN大鼠肾损害的治疗作用及其可能机制,为临床中医药治疗DN提供证据支持。材料与方法:健康SPF级雄性大鼠50只,体重在250g±20g,适应性喂养1周。随机分为空白对照组10只,常规饲料喂养,造模组40只,高脂高糖饲料喂养。均在适宜室温下饲养28天。造模组中大鼠体重不达340±10g者剔除。造模前禁食12h后对造模组大鼠腹腔以50mg/kg剂量的STZ进行注射,72h后测空腹血糖≥16.7mmol/L即为造模成功,列入观察,其中血糖不达标者补注STZ一次。空白对照组注入同剂量的无菌枸橼酸缓冲液,继续普通饲料喂养,造模组继续给予高脂高糖饲料,自由进食水喂养。从空白对照组和造模组中各随机抽取8只,进行眶静脉取血;定量检测Scr、BUN,（P<0.05）有统计学意义,说明大鼠出现了肾损害。造模期间因体重或血糖太低或不耐受死亡共剔除12只。造模组大鼠用SPSS22.0随机法分为四组,即模型对照组、内治组、外治组、灸药结合组,各7只。内治组按照4ml/kg/d灌胃金匮肾气丸和五子衍宗丸合方加减组方治疗;外治组选用附子、肉桂等药物研磨黄酒调匀贴敷神阙穴同时灌注同等体积的生理盐水,1次/d;灸药结合组是两种治疗方法相配合;空白对照组和模型对照组每天同一时间灌胃相同剂量的生理盐水。各组7d一疗程,共治疗2个疗程。治疗结束后,测量大鼠血糖、血脂、Scr、BUN的含量;用Western Blot法检测肾组织中转换因子β1及FN蛋白的表达。结果:1.对大鼠一般症状的影响:造模组大鼠少神乏力、活动迟缓、毛色不光泽、饮食量及饮水量逐渐增加。给药治疗后,以上症状明显改善,但相比较而言,灸药结合组大鼠精神状态、毛色及身体灵活度等状态优于内治组及外治组。2.对大鼠FBG的影响:治疗后,各治疗组的血糖值与模型对照组血糖值相比呈下降趋势（P<0.05）并高于空白对照组血糖值;内治组和外治组无显着性差异（P>0.05）,但灸药结合组的血糖值明显优于内治组和外治组（P<0.01）。3.对大鼠血脂的影响:与空白对照组相比,模型对照组TC、TG、LDL-C明显升高（P<0.05）;与模型对照组相比,各治疗组TC、TG、LDL-C含量下降,尤其以灸药结合组差异性更大（P<0.01）;其余四组与空白对照组相比,HDL-C含量明显降低（P<0.05）。4.对大鼠Scr、BUN的影响:模型对照组与空白对照组相比Scr、BUN明显升高（P<0.05）;治疗给药组无论Scr、BUN均较模型对照组低,且差异化有统计学意义,尤其以灸药结合组更明显（P<0.01）;内治组和外治组无显着性差异（P>0.05）。5.Western-Blot法检测肾组织中的TGF-β1及FN:与空白对照组相比,模型对照组的TGF-β1、FN的蛋白表达水平升高,灰度值有统计学意义（P<0.01）;与模型对照组相比,内治组、外治组、内外结合组的TGF-β1及FN蛋白表达含量均显着降低（P<0.01）,具有统计学差异;内治组和外治组的TGF-β1及FN蛋白表达无统计学意义（P>0.05）,与其他治疗组相比的灸药结合组的TGF-β1及FN蛋白表达差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1灸药结合的干预治疗可以改变DN大鼠的一般状态,改善糖尿病肾病早期肾损害的部分病理症状。2灸药结合可以降低血糖、血脂、Scr、BUN的含量,调节糖脂代谢紊乱,能够祛痰活血,化瘀通络。3灸药结合可以下调TGF-β1及FN的蛋白表达,抑制肾小球及肾脏纤维化病变进程,降低肾小球高滤过率,改善肾功能,有效减缓DN的发展。
潘雅婧[7]（2020）在《肾康注射液调节UUO小鼠肾纤维化及HUVEC血管生成的机制研究》文中研究指明目的:以VEGF为切入点,在动物和细胞实验探讨肾康注射液对UUO小鼠肾纤维化和HUVEC血管生成的调控作用及作用机制。方法:1.动物实验:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组（sham）、单侧输尿管梗阻组（UUO）、氯沙坦钾组（ARB）及高、中、低剂量肾康组（SKI-H、SKI-M、SKI-L）。除sham组外的各组行UUO手术;次日ARB组予氯沙坦钾（13 mg/kg·d）灌胃;SK]-H、SKI-M、SKI-L 组分别予 7.8 g/kg·d、3.9 g/kg·d、1.95 g/kg·d SKI 尾静脉注射。观察小鼠一般状态、记录体重变化。给药14天后检测血Scr、BUN、CysC水平;micro-CT检测肾脏血管分布;HE染色观察肾组织形态改变;天狼星红染色观察胶原沉积;IHC染色观察VEGF、VEGFR-2表达。2.细胞实验:将HUVEC分为空白组（CON）、SKI高剂量组（SKI-11）、SKI-低剂量组（SKI-L）、VE GF 沉默组（Si）、VEGF 沉默-SKI 高剂量组（Si-SKI-H）、VEGF 沉默-SKI 低剂量组（Si-SKI-L）。SKI-H、SKI-L 组分别予 8 mg/ml、2 mg/ml SKI干预 24 h;Si组通过RNAi转染沉默VEGF基因;Si-SKI-H、Si-SKI-L组在转染同时分别予8 mg/ml、2 mg/ml SKI干预24 h。观察血管生成情况,计算血管生成参数;real-time PCR和western blot法分别检测VEGF通路重要靶点基因和蛋白表达。结果:1.动物实验:给药14天后UUO组体重较sham组减轻（P<0.01）;ARB、SKI-H、SKI-M组体重较UUO组增高（P<0.05）。UUO组Scr、BUN、CysC水平较sham组升高（P<0.05,P<0.01）;ARB、SKI-H 组 Scr、BUN、CysC 水平较 UUO 组降低（P<0.05,P<0.01）。肉眼观察sham组双肾无明显异常改变;UUO组患侧肾脏表面粗糙、膨大、积水,肾盂肾盏扩张,实质变薄;SKI组患肾结构破坏较UUO组减轻。micro-CT见sham组肾血管密集,走向清晰;UUO组患肾血管疏松,分支减少、曲度下降;SKI组患肾血管损伤较UUO组减轻。HE染色见sham组肾脏结构完整,无明显病理损害;UUO组肾小管扩张,上皮细胞肿胀坏死,间质增宽伴炎性浸润;SKI组肾脏损伤较UUO组减轻。天狼星红染色（光镜）见sham组肾脏几乎无红染胶原;UUO组肾间质大量红色胶原聚集;SKI组红染程度较UUO组减轻。偏振光镜荧光信号变化与普通光镜所见大体一致。IHC示UUO组患肾VEGF、VEGFR-2表达较sham组降低（P<0.01）;SKI 组 VEGF、VEGFR-2 表达较 UUO 组降低（P<0.01）。剂量方面,SKI 减轻肾脏纤维化损伤和促进血管生成,以中、高剂量效果更优。2.细胞实验:沉默VEGF 24 h后Si组VEGF基因表达较CON组显着降低（P<0.01）,阴性对照组与CON组VEGF无显着差异（P>0.05）,验证转染稳定可行。血管生成方面,SKI组血管连接较CON组增多、血管网密度增大,血管生成参数提高,SKI促进HUVEC血管生成（P<0.01,P<0.05）。基因表达方面,与CON组相比,SKI-H 组 VEGF、VEGFR-2、eNOS 水平升高（P<0.05,P<0.01）;与 Si 组相比,Si-SKI-H 和 Si-SKI-L 组 VEGF、eNOS 水平升高（P<0.05,P<O.01）,SKI 上调 VEGF 通路靶点基因,且该效应在VEGF沉默时更突出。蛋白表达方面,在正常培养及VEGF沉默状态,SKI 均提高 VEGFR-2、p-VEGFR-2、eNOS、p-eNOS 表达水平（P<0.05,P<0.01）。结论:1.肾康注射液可改善UUO小鼠肾功能,缓解肾纤维化病理改变,减轻纤维化损伤;可缓解肾脏微血管网损伤,上调VEGF、VEGFR-2表达,促进患侧肾脏血管生成。2.肾康注射液可促进HUVEC血管生成;可上调HUVEC的VEGF、VEGFR-2基因表达;可提高VEGFR-2、eNOS总蛋白水平及磷酸化蛋白水平。3.肾康注射液可能通过调节VEGF/VEGFR-2及下游eNOS来改善肾纤维化损伤和促进血管生成。
姚涛[8]（2020）在《基于“心肾相关”理论探讨高血压心衰肾纤维化机制及以方测证干预研究》文中研究表明目的:1.基于“心肾相关”理论研究高血压心衰导致肾纤维化的病理机制,并运用以方测证方法明确高血压心衰肾纤维化模型大鼠的证候本质。2.明确参麦注射液和参附注射液调控TGF-β/Smad信号转导通路干预高血压心衰肾纤维化的作用机制与关键靶点。方法:1.成模前实验动物分为三组,即空白对照组（Dahl/SS盐敏感性大鼠6只）,模型组（Dahl/SS盐敏感性大鼠44只）,盐敏感对照组（SS-13BN盐耐受性大鼠10只）。低盐饮食给予空白对照组,高盐饮食给予模型组和盐敏感对照组,喂养20周后验证盐敏感高血压心衰肾纤维化大鼠模型成功。成模后的40只Dahl/SS大鼠随机分为模型组、参麦注射液组、参附注射液组、吡非尼酮抑制剂组,每组各10只,采用腹腔注射与灌胃相结合的方式给药15天后进行指标检测[1],超声心电图检测各组大鼠心功能指标（EF、FS值）,ELISA法检测大鼠血清指标（NT-pro BNP、TGF-β、Cystatin C、NGAL）,收集各组大鼠尿液检测24h尿蛋白定量和肾功能（Scr、BUN、UA）,HE染色和Masson染色方法观察大鼠肾脏组织病理形态以及纤维化状态改变,免疫荧光染色法检测大鼠肾脏组织中TGF-β1、Col I含量变化,Western Blot法检测大鼠肾脏组织中纤维化蛋白TGF-β1表达量、Smad2、Smad3磷酸化程度,RT-q PCR法检测大鼠肾脏组织中Smad2、Smad3、TGF-β、Col I m RNA相对表达量。2.30只Dahl/SS盐敏感性大鼠随机分成空白对照组、参麦注射液组、参附注射液组,每组各10只,采用腹腔注射方式给予每只大鼠药物6.0m L/kg,每日1次,连续给药7天后腹主动脉取血制备含药血清。不同浓度的含药血清（空白血清、参麦血清、参附血清）、TGF-β1、吡非尼酮分别作用于大鼠肾小管上皮细胞,作用时间为别24h、48h、72h。然后采用CCK-8法确定最佳给药浓度（量效）和最佳干预时间（时效）[1]。设置空白对照组、TGF-β1组、参麦血清+TGF-β1组、参附血清+TGF-β1组、空白血清+TGF-β1组、吡非尼酮+TGF-β1组,CCK-8法检测各组药物作用于肾小管上皮细胞48h的增值抑制率,Western Blot法检测细胞Smad2、Smad3磷酸化程度,RT-q PCR法检测细胞Smad2、Smad3的m RNA相对表达量[1]。结果:1.造模结束后,与对照组（空白对照、盐敏感对照）大鼠比较,一般情况方面:模型组大鼠整体状态出现（饮食状况、精神状态、行为体征）异常,腹部肿胀膨大,血压明显升高,收缩压高可达200mm Hg以上;心功能方面:模型组大鼠心功能参数（EF、FS）水平明显降低,血清NT-pro BNP水平明显升高;肾功能方面:模型组大鼠尿蛋白排出量增加,肾功能指标（Scr、BUN、UA）水平升高,并且肾组织出现不同程度的肾小管萎缩、间质纤维化、炎症细胞浸润等病理改变,以上结果表明高血压心衰肾纤维化大鼠模型制备成功。2.给药后,与参附组比较,模型组大鼠尿蛋白增加,肾功能指标Scr、BUN与UA水平升高,大鼠肾脏组织中TGF-β和Col I含量升高、Smad2和Smad3蛋白磷酸化程度加重,提示模型大鼠存在肾小管上皮细胞-间充质转分化（EMT）过程。与模型组比较,参麦组模型大鼠尿蛋白排出量减少,肾功能Scr、BUN与UA水平下降,肾小管萎缩、间质纤维化以及炎症细胞浸润等病理改变减轻;Smad2和Smad3蛋白磷酸化程度减轻,TGF-β1含量、胶原容积分数以及Col I平均荧光强度均有降低,肾纤维化程度减轻,提示参麦注射液能够抑制肾纤维化的发展进程,其作用机制可能与调控EMT过程有关。3.TGF-β1、参麦血清、参附血清、空白血清对大鼠肾小管上皮细胞均有不同程度的增殖作用,吡非尼酮对大鼠肾小管上皮细胞具有明显的抑制作用,但剂量依赖性不明显,最终确定10%含药血清、10μg/L TGF-β1、1g/L吡非尼酮为最佳给药浓度（量效）,48h为最佳干预时间（时效）;各药物与TGF-β1联合孵育细胞后,参附联合组和空白联合组细胞增殖明显,参麦联合组和吡非尼酮联合组细胞生长抑制明显,并且参麦联合组细胞抑制率明显高于其他组别。4.各组含药血清、吡非尼酮分别与TGF-β1联合作用于大鼠肾小管上皮细胞后,与其他各组比较,参麦联合组细胞Smad2、Smad3的蛋白磷酸化程度和m RNA相对表达量均明显降低,提示参麦注射液抑制肾纤维化的作用机制可能与阻止肾组织中TGF-β1/Smad信号转导通路活化有关。结论:1.本研究证实了心肾双向交互损害是高血压心衰肾纤维化发生发展的主要原因,模型大鼠肾组织TGF-β/Smad信号转导通路活化,并参与肾小管上皮-间质细胞转分化过程是高血压心衰肾纤维化的重要病理机制。2.参麦注射液能够调控TGF-β/Smad信号转导通路而抑制肾纤维化状态,其用机制可能与阻止TGF-β1/Smad信号转导通路活化以及肾小管上皮-间质细胞转分化过程有关。3.本研究从“以方测证”角度,以参麦注射液为主,参附注射液参照对比,证实了高血压心衰肾纤维化大鼠的证候本质为心肾气阴两虚证。
仲维娜[9]（2012）在《虫草益肾颗粒剂延缓5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的实验研究》文中认为目的：观察虫草益肾颗粒剂对肾间质纤维化（RIF）大鼠模型肾间质纤维化相关因子表达影响,探讨其抗肾间质纤维化的机理。方法：将180只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型对照组、福辛普利组、虫草益肾组,除假手术组外均行5/6肾切除手术制作RIF动物模型。给药方案：造模后,各组开始灌胃给药,直至12周结束。假手术组、模型对照组给予等量的蒸馏水灌胃,虫草益肾组给予虫草益肾颗粒剂水煎剂灌胃,福辛普利组给予福辛普利氯化钠溶液灌胃,每日1次。分别于造模后0、4、8、12周观察大鼠24小时尿蛋白定量,血尿素氮（BUN）、血清肌酐（Scr）、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）的变化,每组大鼠同一时间采样点处死10只大鼠,观察肾脏组织形态学改变及转化生长因子β1（TGF-β1）、血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形态蛋白-7（BMP-7）的表达。结果：（1）虫草益肾颗粒剂可以降低RIF大鼠血清BUN、Scr和Ang Ⅱ的含量,减轻蛋白尿,与假手术组比较有显着性差异（P<0.01,P<0.05）；（2）经虫草益肾颗粒剂和福辛普利治疗后,肾小管间质炎症细胞的浸润、肾小管萎缩和间质纤维化等病理改变程度减轻,且虫草益肾组优于福辛普利组。（3）虫草益肾颗粒剂可抑制肾脏组织TGF-β1、PDGF-BB的表达,与对假手术组比较有显着性差异（P<0.01）,且优于福辛普利组（P<0.01,P<0.05）；（4）虫草益肾颗粒剂可上调肾组织HGF、BMP-7的表达,与假手术组比较有显着性差异（P<0.01）,且优于福辛普利组（P<0.01,P<0.05）。结论：1.虫草益肾颗粒剂能改善RIF大鼠生存状态,延缓病情进展；2.虫草益肾颗粒剂可以通过降低RIF大鼠血清BUN、Scr及Ang Ⅱ的含量,减轻蛋白尿,从而减轻RIF；3.虫草益肾颗粒剂可减轻5/6肾切除大鼠的肾间质纤维化的程度。4.虫草益肾颗粒剂可能是通过抑制肾脏组织TGF-β1、PDGF-BB蛋白的表达,及上调BMP-7、HGF蛋白的表达来延缓大鼠肾间质纤维化的进展。
周珂[10]（2011）在《超微黑地黄汤治疗CKD3期患者临床观察及对UUO大鼠肾组织细胞凋亡的影响》文中提出目的：观察超微黑地黄汤：①对慢性肾脏病（CKD）3期患者的临床疗效；②对单侧输尿管结扎大鼠行为、体态、体重及其肾脏组织病理的影响；③对单侧输尿管结扎大鼠肾组织细胞凋亡的影响；④对单侧输尿管结扎大鼠FN、ColⅣ、TGF-β1的调节作用。方法：临床研究—随机将60例CKD3期患者分为超微组和尿毒清组,比较两组患者治疗前后血红蛋白、血肌酐、尿素氮、24小时尿蛋白定量的变化。动物实验—将40只单侧输尿管结扎（UU0）SD大鼠按照完全随机的方法分为空白组、假手术组、模型组、超微组和尿毒清组,干预14天后,观察下列指标：①单侧输尿管结扎大鼠行为、体态、体重及其肾脏组织病理学；②采用免疫组织化学方法检测各组大鼠肾组织Bcl-2、Bax,并与细胞凋亡原位检测（TUNEL法）进行对比；③各组大鼠血肌酐、尿素氮、24小时尿蛋白定量；④采用酶联免疫吸附法（ELISA）及其免疫组织化学方法检测各组大鼠血清FN、ColⅣ、TGF-β1的浓度值。结果：超微组和尿毒清组总有效率相近（P>0.05）。对血肌酐、尿素氮和24小时尿蛋白定量均有改善作用（P<0.05）,但对血红蛋白无明显改善作用（P>0.05）,而两组血肌酐的改善无统计学差异（P>0.05）,尿素氮的改善尿毒清组优于超微组（P<0.05）,而24小时尿蛋白定量的改善情况是超微组优于尿毒清组（P<0.05）。干预后模型组行为、体态及体重的改变均明显异于其他组大鼠,而病理改变最严重。超微组大鼠肾功能和尿蛋白定量均明显优于模型组（P<0.05）,与尿毒清具有相近疗效（P>0.05）；超微组和尿毒清组大鼠血清中所含的FN、ColⅣ浓度相近（P>0.05）,而低于模型组大鼠（P<0.05）；超微组和尿毒清组大鼠Bcl-2均高于模型组（P<0.05）,而Bax、TGFβ1均低于模型组（P<0.05）。TUNEL法检测的细胞凋亡显示超微组与尿毒清组的细胞凋亡数少于模型组（P<0.05）。结论：本研究结果证明：①超微黑地黄汤治疗脾肾气虚型CKD3期患者,安全有效,且疗效与尿毒清相似；②超微黑地黄汤对UUO大鼠的行为、体态、体重及肾脏组织病理有明确改善作用；③超微黑地黄汤有降低UUO大鼠24小时尿蛋白定量,改善肾功能的作用；④超微黑地黄汤的临床疗效与其能够减少肾组织中肾小管上皮细胞的凋亡,抑制FN、ColIV、TGF-β1的表达有关。
二、补肾生血颗粒剂对共培养的肾小管上皮细胞和肾成纤维细胞产生细胞外基质的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、补肾生血颗粒剂对共培养的肾小管上皮细胞和肾成纤维细胞产生细胞外基质的影响（论文提纲范文）
（1）活血除痹汤干预Akt-mTOR自噬通路治疗硬皮病硬化期模型小鼠的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 硬皮病发病机制与现代医学治疗研究进展 |
| 1 硬皮病发病机制的现代研究进展 |
| 2 硬皮病的现代医学治疗进展 |
| 3 小结 |
| 综述二 中医对硬皮病的认识及治疗研究进展 |
| 1 病名归属认识进展 |
| 2 病因病机认识进展 |
| 3 中医内治法研究进展 |
| 4 中医外治法研究进展 |
| 5 小结 |
| 综述三 中医药通过干预细胞自噬治疗纤维化疾病的研究进展 |
| 1 细胞自噬及相关通路 |
| 2 中医药干预自噬治疗肝纤维化 |
| 3 中医药干预自噬治疗肺纤维化 |
| 4 中医药干预自噬治疗心肌纤维化 |
| 5 中医药干预自噬治疗肾纤维化 |
| 6 中医药干预自噬治疗其他纤维化疾病 |
| 7 小结 |
| 前言 |
| 第一章 导师治验 |
| 1 病因病机 |
| 2 三期论治 |
| 3 治疗特点 |
| 4 验案举例 |
| 5 小结 |
| 第二章 实验研究 |
| 实验一 活血除痹汤对硬皮病硬化期Balb/c模型小鼠皮损ROS、PDGF、TGF-β水平的影响研究 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结与讨论 |
| 实验二 活血除痹汤对硬皮病硬化期Balb/c模型小鼠皮损Akt-mTOR自噬通路的影响研究 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 小结与讨论 |
| 结语 |
| 1 结论 |
| 2 创新点 |
| 3 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（2）绝经后高血压患者中医证型分布特点及淫羊藿苷干预的相关机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 肾素-血管紧张素系统与绝经后高血压研究进展 |
| 1 绝经后高血压概述 |
| 2 肾素-血管紧张素系统概述 |
| 3 雌激素通过调节肾素-血管紧张素系统治疗绝经后高血压 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 补肾法治疗绝经后高血压的研究进展 |
| 1 中医对绝经后高血压的认识 |
| 2 补肾法治疗绝经后高血压的理论依据 |
| 3 补肾法治疗绝经后高血压的研究进展 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 补肾法联合降压药治疗绝经后及围绝经期高血压的系统评价和Meta分析 |
| 1 研究目的 |
| 2 资料与方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 文献检索结果 |
| 3.2 纳入文献的一般特征 |
| 3.3 纳入文献的用药规律统计 |
| 3.4 纳入文献的质量评价 |
| 3.5 Meta分析结果 |
| 3.6 不良反应分析 |
| 3.7 发表偏倚检测 |
| 3.8 敏感性分析 |
| 3.9 亚组分析 |
| 3.10 试验序贯分析 |
| 4 讨论 |
| 5 研究结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 绝经后高血压患者中医证型分布及动态血压特点研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究内容和研究方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 基线资料 |
| 3.2 高血压分级分布 |
| 3.3 中医证型分布 |
| 3.4 昼夜节律类型分布 |
| 3.5 不同绝经年限动态血压参数比较 |
| 3.6 年龄与动态血压参数的相关性 |
| 3.7 血压变异性相关因素的多元线性回归 |
| 4 讨论 |
| 5 研究结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 淫羊藿苷通过调节RAS对雌性去势SHR发挥血压保护作用 |
| 1 研究目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 统计学方法 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 一般情况 |
| 5.2 淫羊藿苷对大鼠体重的影响 |
| 5.3 淫羊藿苷对大鼠血压的影响 |
| 5.4 淫羊藿苷对大鼠心率的影响 |
| 5.5 淫羊藿苷对大鼠脏器系数的影响 |
| 5.6 淫羊藿苷对大鼠ACE1-AngⅡ-AT1R轴的影响 |
| 5.7 淫羊藿苷对大鼠ACE2-Ang(1-7) -MasR轴的影响 |
| 5.8 淫羊藿苷对大鼠E_2含量及GPR30蛋白表达的影响 |
| 5.9 淫羊藿苷对大鼠心肌组织ERK1/2通路的影响 |
| 6 讨论 |
| 6.1 淫羊藿苷对SHR大鼠血压的影响 |
| 6.2 SHR和WKY大鼠循环和心肌组织RAS组分存在差异 |
| 6.3 淫羊藿苷对SHR大鼠循环和心肌组织RAS组分的影响 |
| 6.4 淫羊藿苷对SHR大鼠E_2及其受体GPR30的影响 |
| 6.5 淫羊藿苷对SHR大鼠心肌组织ERK1/2通路的影响 |
| 7 研究结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）固元通络法治疗慢性肾脏病肾性骨病（肾虚络瘀证）的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1.临床资料 |
| 2.研究方法 |
| 3.研究结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.不足和展望 |
| 参考文献 |
| 附录 综述 慢性肾脏病肾性骨病中西医结合诊疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 中医证候分级量化表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）基于NF-κB/HIF-1α通路探讨“黄芪-丹参”药对干预UUO肾间质纤维化模型的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 研究一基于中医传承辅助平台探讨王耀光教授治疗慢性肾脏病的用药规律分析 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 小结 |
| 研究二“黄芪-丹参”对UUO实验大鼠肾脏的病理影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 研究三:“黄芪-丹参”通过NF-κB/HIF-α信号通路对UUO大鼠肾纤维化的干预机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 肾间质纤维化的相关机制以及中西医结合治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）基于中医象思维探讨肾衰饮干预慢性肾功能衰竭大鼠的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 观察肾衰饮对CRF大鼠抗炎、抗凋亡的作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探讨肾衰饮对CRF大鼠抗炎机制的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 肾衰饮对CRF大鼠肾脏细胞凋亡的调控机制 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文四 探讨肾衰饮调控CRF大鼠PI3K/Akt通路的作用机制 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 从炎症及细胞凋亡角度探讨CRF的发病机制及中药防治CRF的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（6）灸药结合调节糖尿病肾病大鼠FN/TGF-β1蛋白表达的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一 FN与肾间质纤维化的关系 |
| 参考文献 |
| 综述二 糖尿病“起源”——消渴的认识与发展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）肾康注射液调节UUO小鼠肾纤维化及HUVEC血管生成的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 中医药防治慢性肾脏病肾纤维化研究进展 |
| 1. 病名 |
| 2. 病因病机 |
| 3. 临床治疗 |
| 4. 实验研究 |
| 参考文献 |
| 综述二 肾康注射液治疗肾脏疾病研究概述 |
| 1. 药物基本情况 |
| 2. 临床疗效研究 |
| 3. 基础药理机制研究 |
| 4.发展前景 |
| 参考文献 |
| 综述三 血管生成在肾纤维化发生发展中作用的研究进展 |
| 1. 血管生成发生发展 |
| 2. 肾纤维化发生发展 |
| 3. 血管生成障碍与肾纤维化密切相关 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 肾康注射液对UUO小鼠肾纤维化和血管生成的影响 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 肾康注射液对HUVEC血管生成和VEGF/VEGFR-2/eNOS的影响 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 在学期间主要成果 |
（8）基于“心肾相关”理论探讨高血压心衰肾纤维化机制及以方测证干预研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 “心肾相关”理论研究 |
| 1 心力衰竭的中医研究 |
| 1.1 病名研究 |
| 1.2 病因病机研究 |
| 1.3 证型研究 |
| 2 肾纤维化的中医研究 |
| 2.1 病因认识 |
| 2.2 病位概括 |
| 2.3 病机特点 |
| 3 “心肾不交”理论研究 |
| 3.1 理论内涵 |
| 3.2 病理概念 |
| 3.3 病位概括 |
| 3.4 证治概括 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 基于TGF-β/Smad信号通路高血压心衰肾纤维化病理机制及参麦注射液干预研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 试剂与耗材 |
| 1.4 仪器 |
| 1.5 各种实验试剂的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 高血压心衰肾纤维化大鼠模型的制备与验证 |
| 2.2 实验分组及给药方法 |
| 2.3 大鼠血清TGF-β1、Cystatin C、NGAL及肾功能指标的检测方法 |
| 2.4 大鼠肾脏组织染色方法 |
| 2.5 大鼠肾脏Ⅰ型胶原纤维(ColI)免疫荧光检测方法 |
| 2.6 大鼠肾脏组织TGF-β/Smad信号通路相关纤维化蛋白检测方法 |
| 2.7 大鼠肾脏组织TGF-β/Smad信号通路相关纤维化因子m RNA相对表达量检测方法 |
| 2.8 统计方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 模型的制备与验证 |
| 3.2 大鼠一般情况 |
| 3.3 大鼠给药后血清TGF-β1、Cystatin C与 NGAL比较 |
| 3.4 大鼠给药后24小时尿蛋白定量比较 |
| 3.5 大鼠给药后肾功能生化指标的比较 |
| 3.6 大鼠给药后肾脏组织病理学形态比较 |
| 3.7 大鼠胶原容积分数比较 |
| 3.8 大鼠给药后肾脏组织TGF-β1、I型胶原纤维免疫荧光检测 |
| 3.9 大鼠肾脏组织TGF-β/Smad信号通路相关纤维化蛋白检测 |
| 3.10 大鼠肾脏组织TGF-β/Smad信号通路相关纤维化因子m RNA检测 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分 含药血清对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞体外生长的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 试剂与耗材 |
| 1.4 仪器 |
| 1.5 各种实验试剂的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组与给药 |
| 2.2 各组大鼠含药血清的制备 |
| 2.3 细胞的消化、计数与传代培养 |
| 2.4 细胞的冻存 |
| 2.5 CCK-8检测方法 |
| 2.6 参麦血清、参附血清、空白血清对大鼠肾小管上皮细胞的作用 |
| 2.7 TGF-β1和吡非尼酮对大鼠肾小管上皮细胞的作用 |
| 2.8 参麦血清、参附血清、空白血清联合TGF-β1、吡非尼酮对大鼠肾小管上皮细胞的作用 |
| 2.9 细胞生长抑制率的计算 |
| 2.10 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 参麦血清、参附血清、空白血清对大鼠肾小管上皮细胞的作用 |
| 3.2 TGF-β1和吡非尼酮对大鼠肾小管上皮细胞的作用 |
| 3.3 参麦血清、参附血清、空白血清联合TGF-β1、吡非尼酮对大鼠肾小管上皮细胞的作用 |
| 4 结论 |
| 第四部分 含药血清对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞相关纤维化因子表达的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 试剂与耗材 |
| 1.3 仪器 |
| 1.4 各种实验试剂的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 各组大鼠含药血清的制备 |
| 2.2 不同含药血清对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞相关纤维化蛋白表达的影响 |
| 2.3 不同含药血清对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞相关纤维化因子mRNA表达的影响 |
| 2.4 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 不同血清对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞相关纤维化蛋白表达的影响 |
| 3.2 不同血清对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞相关纤维化因子mRNA表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 博士研究生攻读学位期间科研情况 |
| 1.公开发表论文 |
| 2.主持及参与课题 |
| 综述 高血压心衰肾脏纤维化机制中西医研究进展 |
| 参考文献 |
（9）虫草益肾颗粒剂延缓5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 一、现代医学对肾间质纤维化的研究的概况与进展 |
| 1 肾间质纤维化的概念 |
| 2 流行病学研究 |
| 3 肾间质纤维化发生的病因病机 |
| 4 肾纤维化的防治 |
| 二、祖国医学对肾间质纤维化研究进展 |
| 1 肾间质纤维化的中医病名溯源 |
| 2 肾间质纤维化的中医病因病机探析 |
| 3 肾间质纤维化的中医治疗探析 |
| 实验研究 |
| 实验一：虫草益肾颗粒剂对5/6肾切除肾间质纤维化大鼠 #43肾功能及肾组织形态的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 主要实验试剂及配制方法 |
| 1.4 实验主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验性RIF大鼠模型的制备 |
| 2.2 给药方法 |
| 2.3 实验取材 |
| 2.4 指标的观察检测 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 大鼠残余肾脏的肉眼观察 |
| 3.3 各组大鼠体重变化情况 |
| 3.4 24h尿蛋白定量变化情况 |
| 3.5 肾功(BUN、Scr)的变化情况 |
| 3.6 血清AngⅡ含量变化情况 |
| 实验二：虫草益肾颗粒剂对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化肾组织 #51TGF-β 1、PDGF-BB、BMP-7、HGF的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 主要实验试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 标本的处理 |
| 2.2 光镜检查 |
| 2.3 肾组织中TGF-β 1、PDGF-BB、BMP-7、HGF表达检测 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 光镜观察结果 |
| 3.2 肾组织TGF-β 1、PDGF-BB、BMP-7、HGF免疫组化测定 |
| 讨论 |
| 1 慢性肾衰竭模型的探讨与建立思路 |
| 1.1 常用动物实验模型 |
| 1.2 动物模型的选择的理由 |
| 2 对照药物选择的理由 |
| 3 导师治疗慢性肾衰竭思想探讨 |
| 4 虫草益肾颗粒剂的组方分析 |
| 5 虫草益肾颗粒剂延缓肾间质纤维化的作用机理探讨 |
| 5.1 改善大鼠生存状态 |
| 5.2 降低蛋白尿 |
| 5.3 保护肾功能、清除体内毒素 |
| 5.4 减轻肾间质病理形态学变化 |
| 5.5 减少血清AngⅡ的含量 |
| 5.6 延缓间质纤维化进程 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 个人简历 |
| 攻读硕士期间已发表或将发表的论文 |
（10）超微黑地黄汤治疗CKD3期患者临床观察及对UUO大鼠肾组织细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 临床研究 |
| 1 临床资料 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 第二部分 超微黑地黄汤对UUO大鼠行为性状及肾组织形态学的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 第三部分 超微黑地黄汤对UUO大鼠肾组织细胞凋亡的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 第四部分 超微黑地黄汤对UUO大鼠FN、ColⅣ、TGF-β_1的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 鸣谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 参考文献 |
四、补肾生血颗粒剂对共培养的肾小管上皮细胞和肾成纤维细胞产生细胞外基质的影响（论文参考文献）
- [1]活血除痹汤干预Akt-mTOR自噬通路治疗硬皮病硬化期模型小鼠的机制研究[D]. 王瑞洁. 北京中医药大学, 2021
- [2]绝经后高血压患者中医证型分布特点及淫羊藿苷干预的相关机制研究[D]. 袁晶. 北京中医药大学, 2021
- [3]固元通络法治疗慢性肾脏病肾性骨病（肾虚络瘀证）的临床研究[D]. 马凯玲. 山西中医药大学, 2021(09)
- [4]基于NF-κB/HIF-1α通路探讨“黄芪-丹参”药对干预UUO肾间质纤维化模型的机制研究[D]. 秦浩. 天津中医药大学, 2021(01)
- [5]基于中医象思维探讨肾衰饮干预慢性肾功能衰竭大鼠的机制研究[D]. 张亮. 辽宁中医药大学, 2021
- [6]灸药结合调节糖尿病肾病大鼠FN/TGF-β1蛋白表达的机制研究[D]. 刘琳娜. 辽宁中医药大学, 2021
- [7]肾康注射液调节UUO小鼠肾纤维化及HUVEC血管生成的机制研究[D]. 潘雅婧. 北京中医药大学, 2020(04)
- [8]基于“心肾相关”理论探讨高血压心衰肾纤维化机制及以方测证干预研究[D]. 姚涛. 湖南中医药大学, 2020(02)
- [9]虫草益肾颗粒剂延缓5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的实验研究[D]. 仲维娜. 黑龙江中医药大学, 2012(01)
- [10]超微黑地黄汤治疗CKD3期患者临床观察及对UUO大鼠肾组织细胞凋亡的影响[D]. 周珂. 湖南中医药大学, 2011(10)