一、梅山猪其仔猪猝死病例（论文文献综述）
任静雷[1]（2020）在《猪回肠炎流行病学调查及防控研究进展》文中提出猪回肠炎也叫猪增生性肠炎,是由胞内劳森氏菌感染引起的以回肠、盲肠、结肠黏膜呈腺瘤样增生为主要特征的一种肠道疾病。该病容易传播,低剂量胞内劳森氏菌的感染都会影响猪的平均日增重和饲料转化率等生产指标。胞内劳森氏菌的感染率很高,会引起生长育肥猪腹泻、出血性下痢甚至猝死,严重影响生长育肥猪的生长性能,给猪场带来较大的经济损失(王怀山
肖宁[2]（2019）在《应用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备MC1R基因敲除兔的研究》文中研究指明毛色是家畜重要的质量性状之一,与MC1R基因调控黑色素的合成相关。家兔作为毛用、皮用和实验动物,其毛皮颜色与其经济价值密切相关。为此,本研究应用CRISPR/Cas9基因编辑技术,对敲除家兔MC1R基因获得新毛色家兔的可行性进行了探讨,研究主要取得如下结果:1、兔MC1R基因编码区的克隆与分析本研究对莲山黑兔、福建黄兔、新西兰大白兔、巨灰兔和巨型格仔兔的MC1R基因完整CDS区进行了PCR扩增,测序结果显示扩增片段与Gen Bank上发布的兔MC1R的CDS序列一致。随后对上述CDS序列进行了生物信息学分析:不同毛色兔MC1R基因的多重序列比对结果显示巨灰兔没有缺失突变,等位基因属于野生型E;莲山黑兔、新西兰大白兔和巨型格仔兔存在c.281＿286del缺失,等位基因属于黑色显性上位型ED;福建黄兔存在c.304＿333del缺失,等位基因属于隐性黄/红色型e。2、CRSIPR/Cas9介导的MC1R基因敲除效率检测本研究根据莲山黑兔MC1R基因CDS区的测序结果和蛋白质结构预测,在第二和第五个跨膜结构域上设计了两条sg RNA靶序列,成功构建了CRISPR/Cas9相关表达载体。随后在293T细胞中应用RGS荧光报告系统分别对两条sg RNA的靶向活性进行了初步检测,细胞流式检测结果显示两条sg RNA对的RGS质粒的靶向敲除效率分别为67.3%和76.1%。将表达两条sg RNA的质粒和Cas9质粒通过电转染的方法共转到兔胚胎成纤维细胞内,通过PCR扩增试验和测序证明两条sg RNA均可实现MC1R基因的长片段删除。在兔的受精卵中检测了同时注射两条sg RNA和注射单条sg RNA的敲除效率,PCR扩增和T7E1酶切结果表明,在受精卵中同时注射两条sg RNA的敲除效率达到85.7%,高于注射注射单条sg RNA的57.1%。上述结果证明本研究设计的两条sg RNA靶序列具有较高活性,可以通过在受精卵中共同注射两条sg RNA的策略高效地产生兔MC1R基因大片段删除。3、MC1R敲除兔的生产与新毛色形成机制的研究本研究利用验证了活性的两条sg RNA进行MC1R基因敲除兔的制备。将58枚注射了两条sg RNA和Cas9 m RNA的莲山黑兔胚胎自体移植到4只莲山黑兔母兔后,2只母兔成功怀孕并最终产下9只后代。经PCR扩增和测序验证,上述后代中2只（编号Y31和Y32）为MC1R基因敲除阳性兔,其中Y32包含4种MC1R基因编辑类型,Y31包含2种基因编辑类型和野生型等位基因e。Y31和Y32均呈现比ee野生型黄色兔更浅的黄色,但Y31的毛色略深于Y32。H&E染色和光密度值分析结果表明MC1R基因敲除兔毛囊中真黑色素含量显着低于野生型黑色兔。阳性敲除兔MC1R蛋白结构预测结果表明,MC1R基因敲除兔中的各种基因编辑类型均可造成长片段删除或移码突变引起的终止密码子提前出现,造成MC1R蛋白的截短和结构的严重破坏。脱靶试验检测结果显示16个潜在脱靶位点中均不存在脱靶效应。荧光定量PCR检测结果显示,与野生型黄色兔相比,MC1R基因敲除兔中调控真黑色素合成的TYRP1和DCT基因的表达量显着下降。上述研究结果表明,莲山黑兔受精卵中同时注射两条sg RNA和Cas9m RNA可以高效率删除MC1R基因的长片段,导致调控真黑色素合成的TYRP1和DCT基因表达降低,从而出现浅黄色的皮毛。
石海仁[3]（2018）在《C型产气荚膜梭菌对仔猪小肠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路关键分子的影响》文中研究表明仔猪腹泻是生猪养殖常见的肠道性疾病之一,发病时易造成仔猪免疫机能下降、生长变缓、饲料利用率降低、死亡率上升等。据统计,每年仔猪腹泻死亡占总死亡数的半数之多,造成巨大的经济损失,严重危害养猪业的健康发展。根据仔猪腹泻的病因,可分为生理性腹泻、营养性腹泻、应激性腹泻、自身性腹泻以及疾病性腹泻。疾病性腹泻包括病毒性腹泻、寄生虫性腹泻以及细菌性腹泻等。其中C型产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens type C,C.perfringens）是引发仔猪细菌性腹泻的因素之一,主要集中在7日龄以内仔猪,发病率（6080%）和死亡率（80100%）极高。虽然该疾病在分子流行性病学的调查、诊断、预防及治疗方面取得一定的进展。但有关C.perfringens引起腹泻在基因编码蛋白功能分析等分子生物学领域尚不清楚,尤其是仔猪感染C.perfringens引起的免疫调节机制以及激活信号通路的调控等方面。本试验以30头二元猪（大白猪×长白猪）为试验对象,随机选取5头作为对照组（NC）,余下25头经口服诱导建立仔猪腹泻模型,通过记录腹泻评分及精神状况等,确定腹泻得分最高的5头仔猪作为易感组（IS）,腹泻得分最低的5头仔猪作为耐受组（IR）。采用qRT-PCR,Western blot,ELISA等实验技术,研究C.perfringens在感染仔猪后与腹泻相关的肠道固有免疫反应,并评估腹泻对仔猪肠道反应的分子机制。为解决二元猪对C.perfringens抗性育种的科学问题提供参考。主要研究结果如下:1.qRT-PCR检测发现TLRs信号通路中,一些关键基因（TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κB、TRAF6、MAPK1、TBK1、TNF-α、IFN-γ、TL-6、IL-8）,IS组和IR组mRNA的表达量均上调。其中与NC组和IR组相比,IS组TBK1基因mRNA的表达量极显着上调（P<0.01）。2.Western blot检测TLR4、HMGB1、NF-κB蛋白含量变化,结果显示:在空肠和回肠组织中,TLR4、HMGB1、NF-κB蛋白含量IS组均高于NC组和IS组,且IS和IR组中TLR4含量最高,NF-κB含量次之,HMGB1含量相对最低。蛋白相对表达量检测结果显示,TLR4相对表达量最高,NF-κB表达量次之,HMGB1相对表达量最低。3.ELISA检测空肠和回肠组织中白介素（IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12）和干扰素（IFN-γ）含量,结果显示:空肠和回肠组织中细胞因子含量均升高,除了IS和IR组中IL-10含量相对于NC组差异不显着,其余各组间有显着差异。测定感染不同时间段血液中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量,发现其含量随时间发生变化。结论:C.perfringens诱导的仔猪腹泻模型,能够激活小肠TLRs信号通路,提高TLRs信号通路中相关基因mRNA的表达,进而调节下游炎性因子的释放,从而支持肠道黏膜免疫。本试验研究发现,与空肠组织相比,回肠组织中相关基因的表达量更高、细胞因子含量更高,表明C.perfringens感染的主要靶器官是回肠段。
张真[4]（2013）在《太湖猪实验动物化研究及其在除颤电极评价方面的应用》文中研究指明猪因与人类在解剖学、生理结构上的相似性，成为人类疾病模型的极好材料，在医学研究中的应用日益增多。本研究拟通过对本地优良品种—太湖猪进行选育，通过对遗传、生理学的分析建立实验太湖猪品系，并建立室颤模型，进行除颤电极的评价与研究。通过对构建的封闭群太湖猪与二元杂交的太湖猪的遗传背景进行微卫星分子标记分析，筛选出14对引物对原种太湖猪和二元杂交猪进行微卫星位点扩增，太湖猪等位基因数范围是1-5，二元杂交猪等位基因数则为2-5；有效等位基因数变化范围分别为1.00003.9320和1.12454.4806，平均有效等位基因数分别为2.2805和2.1936；观测杂合度的平均值分别为0.6176和0.5540；Shannon多样性指数0.8217和0.8750；期望杂合度分别为0.4847和0.4927。太湖猪具有较高的观测杂合度和有效等位基因数，推测太湖猪的隐性等位基因在杂交过程中丢失，而二元杂交猪遗传变异程度高。太湖猪多态信息含量变化范围为单态0.7047；二元杂交群的变化范围为0.05540.7403。太湖猪的平均多态信息含量值为0.4362，而二元杂交猪的则为0.4415。二元杂交群体多态信息含量稍高于太湖猪群体，二者均属于中度多态性。太湖猪具有丰富的的遗传多样性，遗传系统较稳定，不易受外界影响，符合封闭群动物遗传特性。对2月、4月和6月不同月龄的太湖猪进行血液常规生理指标的测定，2月龄相对于其他月龄，血小板分布宽度和中性粒细胞率两个指标有显着差异，提示猪血小板水平偏低，将对凝血功能有些影响，提示在早期饲养过程中增加蛋白质含量较高的饲料的比例；白血球计数、红血球计数等指标有一定程度的偏低，推测主要原因是地理位置和环境气候的差异导致，但均在正常范围内；并对同月龄的雌雄个体的指标进行比较分析，不同性别太湖猪血液生理值未见显着差异。通过心导管对三组不同体重的实验太湖猪进行诱导，建立太湖猪室颤模型，以P-500系列电极片作为对照，并使用不同规格的电极片分别进行体外除颤与复苏，统计除颤成功率，进行多普勒超声检查评价除颤前后各组动物的心脏功能，实验结束后做大体解剖并作病理分析。实验组和对照组的除颤成功率没有显着差异，三组动物除颤前后左室射血分数（EF）、左室舒缩面积变化率（FAC）、左心室收缩末期后壁厚度（LVPWS）差异不显着（P＞0.05），病理学检查均未见明显异常。太湖猪可以有效的评价电极的功能和副作用，个体间的反应也具有一定差异，符合封闭群动物的特征，实验太湖猪可以作为心血管研究中重要的模型动物。
刘以洪[5]（2000）在《梅山猪其仔猪猝死病例》文中进行了进一步梳理
二、梅山猪其仔猪猝死病例（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、梅山猪其仔猪猝死病例（论文提纲范文）
（1）猪回肠炎流行病学调查及防控研究进展（论文提纲范文）
| 1 病原学 |
| 2 流行病学 |
| 3 致病机理 |
| 4 临床症状 |
| 5 诊断 |
| 6 流行情况 |
| 7 防控 |
| 8 未来展望 |
（2）应用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备MC1R基因敲除兔的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 第一章 哺乳动物毛色形成机制 |
| 1.1 黑色素形成过程 |
| 1.2 影响黑色素生成的分子途径 |
| 1.3 毛干中的黑色素生成 |
| 1.4 角质形成细胞与黑色素的转运 |
| 1.5 黑色素生成中的分子调控 |
| 1.5.1 α-MSH的调控 |
| 1.5.2 MITF的调控 |
| 1.5.3 Wnt信号通路的调控 |
| 1.5.4 PKC家族的调控 |
| 1.5.5 EDN信号通路的调控 |
| 1.5.6 SOX家族的调控 |
| 1.5.7 PAX3的调控 |
| 1.6 黑色素调控基因的变异与动物毛色决定 |
| 1.6.1 MC1R和 ASIP基因 |
| 1.6.2 KIT基因 |
| 1.6.3 TYRP1基因 |
| 1.6.4 MITF基因 |
| 1.6.5 EDNRB基因 |
| 1.7 小结与展望 |
| 第二章 MC1R基因的研究进展 |
| 2.1 MC1R的结构 |
| 2.2 MC1R活性调节 |
| 2.3 MC1R下游信号通路与第二信使CAMP |
| 2.3.1 MC1R与色素沉积 |
| 2.3.2 MC1R的紫外线保护作用 |
| 2.4 MC1R的激素信号调节 |
| 2.5 MC1R基因的多态性与动物毛色形成 |
| 2.5.1 牛 |
| 2.5.2 猪 |
| 2.5.3 犬科动物 |
| 2.5.4 马 |
| 2.5.5 羊 |
| 2.5.6 兔 |
| 2.6 小结与展望 |
| 第三章 CRISPR基因编辑系统的研究进展 |
| 3.1 基因编辑系统的发展历程 |
| 3.1.1 第一代基因编辑系统:ZFN |
| 3.1.2 第二代基因编辑系统:TALEN |
| 3.1.3 第三代基因编辑系统:CRISPR |
| 3.2 CRISPR基因编辑系统在生命科学基础研究中的应用 |
| 3.2.1 基因敲除 |
| 3.2.2 基因敲入 |
| 3.2.3 单碱基基因编辑 |
| 3.2.4 染色体缺失、重排和核型工程 |
| 3.2.5 基因驱动 |
| 3.2.6 抑制靶基因表达 |
| 3.2.7 激活靶基因表达 |
| 3.2.8 染色质结构成像、RNA转录和蛋白质定位跟踪 |
| 3.2.9 RNA的基因编辑 |
| 3.2.10 质粒的克隆和诱变 |
| 3.3 CRISPR基因编辑系统在畜牧业中的应用 |
| 3.3.1 提高家畜经济性状 |
| 3.3.2 提高家畜繁殖力和抗病性 |
| 3.3.3 提高畜产品质量 |
| 3.3.4 提高动物福利 |
| 3.4 CRISPR/CAS9 基因编辑系统在家兔中的应用 |
| 3.5 本研究的目的与意义 |
| 第二部分 试验研究 |
| 第四章 兔MC1R基因编码区的克隆与分析 |
| 前言 |
| 4.1 试验材料及仪器设备 |
| 4.1.1 组织材料、菌株和载体 |
| 4.1.2 试验试剂 |
| 4.1.3 仪器设备 |
| 4.1.4 主要培养基和溶液的配制 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 基因组DNA的提取 |
| 4.2.2 引物的设计与合成 |
| 4.2.3 目的基因编码序列的扩增 |
| 4.2.4 目的产物的回收与纯化 |
| 4.2.5 目的片段的连接与转化 |
| 4.2.6 质粒的提取 |
| 4.2.7 双酶切鉴定阳性重组质粒 |
| 4.2.8 数据统计与分析 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 不同毛色兔MC1R基因CDS区 PCR扩增结果 |
| 4.3.2 不同毛色兔MC1R基因编码区序列测定结果 |
| 4.3.3 兔MC1R基因的生物信息学分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 第五章 CRSIPR/CAS9 介导的MC1R基因敲除效率检测 |
| 前言 |
| 5.1 试验材料及仪器设备 |
| 5.1.1 试验材料、菌株和载体 |
| 5.1.2 试验试剂 |
| 5.1.3 仪器设备 |
| 5.1.4 主要培养基和溶液的配制 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 MC1R基因靶序列的设计与合成 |
| 5.2.2 CRISPR/Cas9 系统相关载体的构建 |
| 5.2.3 质粒的转化及鉴定 |
| 5.2.4 去内毒提取质粒 |
| 5.2.5 细胞的复苏与培养 |
| 5.2.6 Cas9 载体、sg RNA载体和RGS报告载体共转293T细胞 |
| 5.2.7 Cas9 载体和sg RNA载体共转兔胎儿成纤维(RFF)细胞 |
| 5.2.8 细胞基因组的提取 |
| 5.2.9 体外转录模板的制备 |
| 5.2.10 sgRNA的体外转录 |
| 5.2.11 Cas9 m RNA的体外转录 |
| 5.2.12 母兔的超排处理与胚胎收集 |
| 5.2.13 受精卵的胞质注射 |
| 5.2.14 PCR扩增单个胚胎目的序列检测突变效率 |
| 5.2.15 T7E1酶切检测突变效率 |
| 5.2.16 数据统计分析 |
| 5.3 试验结果 |
| 5.3.1 兔MC1R基因sg RNA的设计及CRISPR/Cas9 相关表达载体的构建 |
| 5.3.2 CRISPR/Cas9 系统在293T细胞上的活性验证 |
| 5.3.3 CRISPR/Cas9 系统在兔胎儿成纤维细胞上的活性验证 |
| 5.3.4 CRISPR/Cas9 系统在兔胚胎水平敲除效率的验证 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 结论 |
| 第六章 MC1R敲除兔的生产与新毛色形成机制的初探 |
| 前言 |
| 6.1 试验材料及仪器设备 |
| 6.1.1 组织材料、菌株和载体 |
| 6.1.2 试验试剂 |
| 6.1.3 仪器设备 |
| 6.1.4 主要溶液的配制 |
| 6.2 试验方法 |
| 6.2.1 体外转录制备Cas9 m RNA及 sg RNA |
| 6.2.2 母兔的超排处理与胚胎收集 |
| 6.2.3 受精卵的胞质注射 |
| 6.2.4 胚胎移植与妊娠 |
| 6.2.5 F0代仔兔基因型的检测 |
| 6.2.6 阳性敲除兔MC1R蛋白结构预测 |
| 6.2.7 阳性兔的脱靶检测 |
| 6.2.8 PCR产物的纯化 |
| 6.2.9 皮肤组织石蜡切片制作及H&E染色观察 |
| 6.2.10 皮肤组织RNA的提取 |
| 6.2.11 RNA反转录合成c DNA |
| 6.2.12 实时荧光定量PCR检测相关基因表达量 |
| 6.2.13 数据统计 |
| 6.3 试验结果 |
| 6.3.1 CRISPR/Cas9 介导的MC1R基因敲除兔的生产 |
| 6.3.2 MC1R敲除兔的基因型及表型鉴定 |
| 6.3.3 阳性敲除兔MC1R蛋白结构预测 |
| 6.3.4 脱靶效应检测 |
| 6.3.5 MC1R敲除兔新毛色形成机制的初探 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 结论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
（3）C型产气荚膜梭菌对仔猪小肠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路关键分子的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 英文缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 仔猪腹泻的危害 |
| 1.1 仔猪腹泻的主要原因 |
| 1.1.1 生理性因素 |
| 1.1.2 营养性腹泻 |
| 1.1.3 饲养管理和环境应激导致腹泻 |
| 1.1.4 疾病引起的腹泻 |
| 1.1.4.1 病毒性腹泻 |
| 1.1.4.2 寄生虫性腹泻 |
| 1.1.4.3 细菌性腹泻 |
| 1.2 产气荚膜梭菌 |
| 1.2.1 产气荚膜梭菌类型 |
| 1.2.2 C型产气荚膜梭菌的致病机制 |
| 1.2.3 产气荚膜梭菌疫苗的研究进展 |
| 2 Toll样受体的研究进展 |
| 2.1 Toll样受体的发现 |
| 2.2 先天性免疫及特点 |
| 2.3 TLRs与天然免疫和获得性免疫的关系 |
| 2.4 TLR4分布、结构及功能 |
| 2.5 TLR4与肠道相关性疾病 |
| 2.6 MyD88依赖性和非依赖性途径 |
| 2.7 NF-κB在免疫应答和炎症反应中的作用 |
| 2.8 TLRs信号通路下游炎性因子与肠道性疾病的机制 |
| 3 研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 1 试验仔猪 |
| 2 试剂与仪器 |
| 2.1 主要试剂 |
| 2.2 主要仪器 |
| 3 攻毒试验 |
| 3.1 C型产气荚膜梭菌的培养 |
| 3.2 攻毒 |
| 4 总RNA的提取 |
| 4.1 超微量分光光度计检测mRNA的浓度和纯度 |
| 4.2 反转录 |
| 4.3 引物的设计与合成 |
| 4.4 目的基因普通PCR筛选扩增条件 |
| 4.5 切胶回收 |
| 4.6 连接反应 |
| 4.7 菌体质粒重组及PCR鉴定 |
| 4.8 测序 |
| 4.9 qRT-PCR条件 |
| 5 数据的处理 |
| 6 Western blot检测HMGB1蛋白在空肠和回肠中的表达 |
| 6.1 肠组织总蛋白的提取 |
| 6.2 标准曲线的绘制 |
| 6.3 Western blot免疫印迹 |
| 7 ELISA试验 |
| 7.1 组织匀浆的制备 |
| 7.2 ELISA检测细胞因子含量 |
| 7.3 标准曲线的绘制 |
| 8 数据统计处理 |
| 第三章 结果与分析 |
| 1 荧光定量PCR |
| 1.1 总RNA的提取结果 |
| 1.2 扩增条件的优化 |
| 1.3 目的片段的确定 |
| 1.4 qRT-PCR溶解曲线 |
| 1.5 qRT-PCR扩增曲线 |
| 2 目的基因mRNA的表达量 |
| 2.1 TLR2、TLR4和TLR9在空肠和回肠组织中的表达 |
| 2.2 MyD88和NF-κB在空肠和回肠组织中的表达 |
| 2.3 TLRs信号通路相关基因在空肠和回肠组织中的表达 |
| 2.4 TLRs信号通路中的细胞因子在空肠和回肠中的表达 |
| 3 空肠和回肠组织中TLR4/HMGB1/NF-κB蛋白的表达 |
| 4 ELISA的检测结果 |
| 4.1 空肠和回肠组织中细胞因子含量 |
| 4.2 ELISA检测血清中免疫球蛋白含量的结果 |
| 第四章 讨论 |
| 1 感染C.perfringens能够激活TLRs信号通路 |
| 2 感染C.perfringens能够促使TLR4与其配体HMGB1的结合 |
| 3 感染C.perfringens能够激活TLRs下游炎症因子 |
| 4 感染C.perfringens影响血清中免疫球蛋白含量的变化 |
| 小结 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 导师简介 |
（4）太湖猪实验动物化研究及其在除颤电极评价方面的应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 文献综述 |
| 前言 |
| 1、遗传标记种类及其应用 |
| 1.1 生理指标 |
| 1.2 生化标记 |
| 1.3 分子生物学检测方法 |
| 2、微卫星标记特点及其应用 |
| 2.1 微卫星标记的特点 |
| 2.2 微卫星标记的的应用 |
| 第二部分 太湖猪实验动物化研究及其在除颤电极评价方面的应用 |
| 引言 |
| 第一章 太湖猪遗传背景分析 |
| 1、动物 |
| 2、仪器与试剂 |
| 3、实验主要试剂及溶液配制 |
| 3.1 PCR 扩增试剂 |
| 3.2 琼脂糖电泳检测试剂 |
| 3.3 银染溶液 |
| 4、实验方法 |
| 4.1 基因组 DNA 提取 |
| 4.2 微卫星位点的 PCR 扩增 |
| 4.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| 4.4 银染显色 |
| 5、数据处理 |
| 6、结果与分析 |
| 6.1 位点选取 |
| 6.2 琼脂糖凝胶电泳结果 |
| 6.3 聚丙烯酰胺变性凝胶电泳结果 |
| 6.4 数据分析结果 |
| 7、讨论 |
| 第二章 封闭群实验太湖猪生理特性研究 |
| 1、实验方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 血样采集 |
| 1.3 血液指标测定 |
| 1.4 统计分析 |
| 2、结果与分析 |
| 2.1 不同月龄之间样本比较 |
| 2.2 同月龄不同性别之间指标比较 |
| 3、讨论 |
| 第三章 实验太湖猪心室颤动模型的建立及其在除颤电极评价中的应用 |
| 1、实验动物 |
| 2、仪器与试剂 |
| 3、实验方法 |
| 3.1 实验前饲养管理 |
| 3.2 实验过程 |
| 3.3 多普勒超声心功能检测（心脏功能评价） |
| 3.4 除颤副作用（病理学检查） |
| 4、统计学处理 |
| 5、结果分析 |
| 5.1 除颤成功率 |
| 5.2 超声心功能评价 |
| 5.3 病理学检查（巨检） |
| 6、讨论 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
四、梅山猪其仔猪猝死病例（论文参考文献）
- [1]猪回肠炎流行病学调查及防控研究进展[J]. 任静雷. 猪业科学, 2020(08)
- [2]应用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备MC1R基因敲除兔的研究[D]. 肖宁. 广西大学, 2019(02)
- [3]C型产气荚膜梭菌对仔猪小肠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路关键分子的影响[D]. 石海仁. 甘肃农业大学, 2018(11)
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