一、全能干细胞的研究现状与前景(论文文献综述)
李昊昱[1](2021)在《ZYXH公司甘肃市场干细胞存储业务营销策略研究》文中进行了进一步梳理
卢琴[2](2020)在《孤雌生殖人类胚胎干细胞技术的专利适格性研究》文中研究说明传统人类胚胎干细胞(HESC)技术不可避免需要破坏人胚胎才能获取HESC。随着干细胞技术的发展,开始出现回避伦理争议的新技术。其中,孤雌生殖HESC技术通过孤雌激活人卵母细胞,无需精子参与就能形成孤雌囊胚,从中获取HESC。大多数国家认为该技术回避了传统技术破坏胚胎的伦理争议,并且具有重大的医学价值。随着科学和伦理的发展变化,2019年11月我国新修正的《专利审查指南》放宽了HESC技术的专利审查标准,但仅仅规定了“利用未经体内发育的受精14天以内的人胚胎”获取HESC的相关发明不违背社会公德,可以授予专利。却未提及孤雌生殖HESC技术在我国能否具备专利适格性的问题。因此,本文将对该新技术的专利适格性问题进行研究。首先,介绍孤雌生殖HESC技术相比其他技术的优势。分析2016年我国知识产权局判定孤雌囊胚属于人胚胎,孤雌生殖HESC技术违背社会公德,因而不具备专利适格性而引发的争议案例。指出2019年《专利审查指南》修正后依然未能解决争议问题。其次,通过分析传统HESC技术与孤雌生殖HESC技术专利适格性审查中具有代表性的司法案例,梳理新旧技术发展的脉络,考察干细胞技术发达的美、欧、中、澳等国家对新旧两类技术的专利适格性认定,同时从传统技术的专利审查中获取对新技术有益的借鉴经验。再次,从我国利益平衡、伦理道德、干细胞产业政策导向和产业发展需要等方面出发,为论证我国应当授予孤雌生殖HESC技术专利权保护的正当性和必要性提供依据。最后,得出孤雌生殖HESC技术在我国具备专利适格性的结论。我国对该新技术的专利审查经验尚不成熟。笔者结合我国的实际情况,以前文作为基础和铺垫,为我国《专利审查指南》提供相应的完善建议。
沈佩[3](2019)在《胚胎干细胞经外胚层向髁突软骨干细胞定向分化及其软骨损伤修复应用研究》文中研究指明研究背景颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)髁突“软骨退变”是众多TMJ疾病的共有病理特征,可导致软骨下骨破坏吸收,引起TMJ疼痛、张口受限等关节症状。由于软骨为无血管的组织,一旦发生损伤或破坏,其修复极为困难。通过干细胞向软骨细胞定向分化进而修复损伤的软骨细胞已成为当前研究的重点。目前常用的种子细胞主要包括以下几种:骨髓基质干细胞(bone marrow stroma stem cells,BMSCs)、胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)等。尽管BMSCs向软骨分化的技术已经较为成熟,但由于其来源于中胚层的细胞特性及有限的增殖能力和多向分化等不可控因素,限制了BMSCs在修复关节软骨尤其是TMJ关节软骨方面的应用。而ESCs向关节软骨分化虽已得到越来越多学者的认可,但这些技术绝大多数通过中胚层诱导而来,与TMJ的发育过程并不相符。其原因在于,在胚胎发育过程中,TMJ起源于神经外胚层而非中胚层。研究目的本研究拟模拟TMJ髁突软骨发育过程,诱导ESCs经神经外胚层分化成软骨干细胞,并从体内、外检测软骨干细胞的自我更新特性及分化潜能,进一步在动物层面研究诱导获得的干细胞在修复受损软骨组织中的作用。材料与方法第一部分:探索ESCs经神经外胚层分化成软骨干细胞的分化方法,观察细胞形态变化;采用PCR检测ESCs、软骨干细胞主要标志物;并检测诱导过程全能干细胞及三胚层关键标志物的表达情况,以明确细胞是否经外胚层分化而来。第二部分:分析诱导后细胞的干细胞特性,检测诱导后干细胞克隆形成能力,PCR检测不同代次诱导细胞标志物的变化情况,免疫荧光检测软骨干细胞主要标志物,流式细胞技术检测常见干细胞标志物的表达情况。对诱导细胞、患者髁突软骨及常用软骨细胞系进行深度测序并分析表达谱的差异。第三部分:对获得的软骨干细胞进行体外成骨、成软骨和成脂定向诱导分化;通过不同自发分化条件观察软骨干细胞成软骨分化效果;通过体内实验将软骨干细胞移植到免疫缺陷鼠皮下,以进一步明确软骨干细胞的特点及分化能力。第四部分:建立大鼠膝关节软骨损伤模型,将软骨干细胞移植到缺损关节处,通过HE染色、免疫荧光染色和软骨特异性染色等实验评价软骨干细胞修复软骨损伤的作用。结果第一部分:本部分研究发现,细胞形态从诱导前集落样生长的胚胎干细胞转变成诱导后间皮样单层生长的细胞。PCR结果显示多能干细胞标志物OCT4、SOX2和NANOG在诱导过程中逐渐减弱至消失。PCR及测序结果分析显示,诱导得到的细胞主要表达外胚层标志物(NESTIN、ALCAM、ANPEP),而中胚层和内胚层标志物几乎无表达。此外,软骨/骨相关标志物RUNX2、AGG、OCN和SOX9在诱导后的细胞内表达显着升高。第二部分:免疫荧光染色可见,诱导后的细胞干细胞相关标志物NESTIN和CD29呈阳性,软骨细胞相关标志物SOX9、RUNX2、SOX5和TWIST1免疫荧光染色呈阳性。流式细胞技术结果显示,诱导后的细胞不表达CD146,CD24,CD45,CD34和CD90,而CD29、CD73,CD71,CD105和CD44在大部分细胞中均有表达。克隆形成实验发现,诱导后的单细胞呈克隆样生长,且表达SOX9、Col1a1、SOX5、OCN、RUNX2和Col2a1,在不同代次诱导细胞间,上述RNA的表达量均未出现明显改变。免疫荧光共染显示,大部分诱导细胞增殖细胞核抗原(Ki67)和RUNX2呈现双阳性。转录组主成份分析表明,与常用软骨细胞系SW1353相比,诱导中期细胞和P9代次干细胞同人髁突软骨更接近。第三部分:HE染色显示,诱导获得的干细胞成软骨定向分化后,细胞呈嗜碱性染色,并可见软骨陷窝;免疫组织化学染色可见,AGG、RUNX2和Col2a呈阳性。成骨定向诱导分化后,茜素红染色显示大片成簇的强阳性;成脂分化后,胞浆中大量脂滴聚集。与人牙髓干细胞定向诱导分化结果类似。诱导得到的干细胞贴壁培养、置于胶原包被的凝胶海绵支架材料上培养和悬浮培养后,均可见细胞呈均匀的嗜碱性染色。同时甲苯安蓝、阿利新兰、番红O、COLⅡ、COLⅠ及COLⅩ也呈阳性表达。体内分化结果显示,移植后4周、8周、10周均可以看到实验组支架材料中有散在的集落样生长的嗜碱性软骨样结构。番红O染色可见,实验组凝胶海绵内可见集落样生长的软骨样结构呈鲜红阳性染色。凝胶海绵内的软骨结构AGG、ColⅡ和Lubricin呈强阳性,而OCN呈弱阳性。第四部分:在植入后8周,获取大鼠膝关节组织,行HE染色后可见,对照侧缺损部位未见明显的骨、软骨结构,只有大量炎症细胞浸润,而实验侧缺损处见类似于TMJ髁突软骨组织样结构,番红O染色呈橘色,且Col1a和Col2a呈双阳性。形成的软骨组织GFP免疫荧光染色呈阳性,说明植入的软骨干细胞实现了向软骨定向分化,修复并整合到损伤的软骨中。结论本研究证实,从ESCs经外胚层途径诱导分化得到一种具有自我更新能力的软骨干细胞,该干细胞有别于以往常见的中胚层干细胞,且具有成软骨、成骨和成脂分化潜能,并可自发成软骨分化,修复受损关节软骨。其意义在于:理论层面,本研究首次发现可通过定向诱导的方法将ESCs经外胚层分化为更接近髁突软骨的细胞;基础层面,为髁突软骨的基础研究提供了一种更合适的和更有前景的工具细胞;临床层面,本研究对诱导分化过程的探索有助于将来通过IPS技术实现髁突软骨的原位修复。
张雪劼[4](2019)在《青光眼治疗现状及干细胞在治疗中的研究进展》文中进行了进一步梳理青光眼是严重威胁人类视觉健康的疾病。目前已经清楚的认识到,青光眼是一种神经变性性疾病。因此,目前青光眼的治疗大致包括降低眼压和保护视神经两个方面。但现有的神经保护治疗手段不能从根本上逆转视神经损害。近年来干细胞治疗在器官组织损伤的治疗中发挥了重要作用,同样可用于青光眼中视神经损伤的治疗。据此,主要讨论青光眼的特征、治疗现状、干细胞的分类、特征及其在青光眼治疗中的应用现状和前景。
陈尔曼[5](2019)在《SIRT7调控骨髓间充质干细胞成骨分化和血管生成促进骨修复》文中指出Sirtuin家族蛋白是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的蛋白去乙酰化酶和(或)ADP核糖基转移酶,在不同的细胞过程都发挥着重要作用,如衰老、DNA修复、细胞周期、代谢和疾病发生等。有研究发现SIRTI、SIRT3和SIRT6等都参与了干细胞的成骨分化和骨缺损的修复。SIRT7是sirtuin家族蛋白的成员之一,主要绑定在核糖体RNA上在有丝分裂后核糖体DNA转录的过程中发挥抑制作用。我们前期研究发现成骨分化过程中,人骨髓间充质干细胞成骨分化过程中SIRT7基因的表达逐渐减少。体外研究发现在人骨髓间充质干细胞中敲降SIRT7基因能显着促进成骨相关基因和蛋白的表达,同时也增强了碱性磷酸酶的活力且促进钙结节的形成。随后我们发现敲降SIRT7能激活人骨髓间充质干细胞的Wnt/p-catenin通路,而后续的抑制剂实验也发现加入Wnt通路抑制剂后可部分逆转因敲降SIRT7所增强的成骨分化。紧接着我们采用大鼠胫骨骨缺损模型发现敲降SIRT7的人骨髓间充质干细胞结合壳聚糖支架后植入缺损处可明显促进骨形成。此外,我们也发现敲降SIRT7后可促进人骨髓间充质干细胞旁分泌血管内皮生长因子。同时敲降SIRT7可激活HIF-1α通路促进血管内皮生长因子的表达。随后我们利用收集的敲降SIRT7的人骨髓间充质干细胞的培养基制作成条件培养基,发现这些培养基能促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁徙、管腔形成和出芽。而加入血管内皮生长因子的中和性抗体会逆转敲降SIRT7的条件培养基对人脐静脉内皮细胞的血管生成的促进作用。这些结果均表明敲降SIRT7能促进人骨髓间充质干细胞的成骨分化和血管生成从而促进骨修复。
郑东敏[6](2019)在《人外周血单个核细胞建立诱导性多能干细胞(iPSCs)及永生化细胞的方法探究》文中指出诱导性多能干细胞于2006年在日本首次成功建立,是一种将高度分化的成熟体细胞通过诱导使其基因重编程的技术。最终细胞回归到类似于胚胎干细胞拥有能够自我更新复制以及强大分化潜能的多能干性的细胞状态。诱导性多能干细胞的应用前景十分广泛,可应用于疾病模型、再生医学及药物研发等领域。伴随着发展,诱导性多能干细胞在技术上也正在不断进步和突破,从最初的整合基因法到相对安全可靠的非整合基因法,从依赖滋养层细胞的培养方法到完全排除外源细胞干扰的无滋养层细胞培养方法,诱导性多能干细胞技术逐渐趋向简单化、程序化。海弗利克极限理论指出了细胞的分裂次数是有限的,但在一些特殊条件的刺激下,细胞能够逃脱此极限,从而达到永生化的状态。永生化的细胞是一种处于正常细胞与癌细胞之间的形态,细胞能够无限增殖,并且没有恶化的表征。对永生化细胞的深入研究可帮助我们了解正常细胞与肿瘤细胞之间生理及功能的变化,以及有助于探究细胞衰老的生理机制。永生化细胞也可作为一种人类遗传资源进行收集,尤其是某些疾病特性基因,以活细胞的形式储存起来,建立永生化细胞库。本研究采用人外周血单个核细胞作为细胞来源,采样便捷、安全,对人体的损伤小。以仙台病毒作为载体,将承载着的4种胚胎干细胞特异表达的关键细胞因子,导入来源细胞中使其重编程,以此构建诱导性多能干细胞系。在原代及传代的培养中摒弃传统的含外源细胞的滋养层培养方法,以无滋养层细胞培养的方法取代。同时,在来源细胞中提取微量的细胞,建永生化B淋巴细胞系。技术优化后所建立的细胞系在经过了培养、传代及鉴定,最终实验结果显示:1、培养至第12天出现明显的细胞克隆团,第18天成为典型的诱导性多能干细胞,诱导性多能干细胞间细胞间紧密接触、无明显间距,克隆团的边缘清晰,形态与胚胎干细胞相似;2、细胞AP染色结果呈阳性,表明细胞重编程并回归未分化的干细胞状态;3、免疫荧光检测诱导性多能干细胞表面抗原Oct4与SSEA4呈阳性;4、诱导性多能干细胞三胚层分化鉴定成功,证明了细胞的分化潜能;5、永生化B淋巴细胞以聚团的形态生长,流式检测CD19阳性细胞占总细胞的89.92%。诱导性多能干细胞与永生化B淋巴细胞建系方法的结合,充分利用了来源的细胞资源。永生化B淋巴细胞的收集,尤其是一些罕见的基因疾病细胞,可为日后细胞生理机制等科研探索提供遗传资源的储备。诱导性多能干细胞存在未来存在医学应用可能性,可填补永生化B淋巴细胞因细胞非正常而无法应用于临床的缺点。本文对技术细节的优化提高了效率,节省了时间成本,操作步骤的简化使未来细胞培养全自动化的可能性更进一步。
姚鹏[7](2017)在《干细胞在肝脏疾病中应用的现状与希望》文中进行了进一步梳理近年来干细胞研究越来越受到关注,干细胞可用于许多疾病,包括神经系统疾病、糖尿病、肾脏、肝脏疾病甚至癌症等的治疗.已有大量干细胞应用于肝病治疗的研究报道,尽管其中既充满了挑战也有许多困境与难题,但干细胞再生医学的临床应用仍将充满希望.
薛冰华,刘忠华[8](2015)在《猪多能性干细胞研究进展与前瞻》文中提出多能干细胞具有能够分化为多种特定细胞类型的能力,主要包括胚胎干细胞、胚胎生殖细胞和诱导多能干细胞。猪因其在免疫学、形态学和生理结构上与人有着诸多类似的特点,正逐渐成为人类异种移植、细胞治疗和再生医学研究的理想生物学模型。然而,目前对猪多能干细胞的来源、特征及机制认识的不足直接阻碍了该研究领域的发展。因此,将对猪多能性干细胞的种类、鉴定标准、研究进展、亟待解决的问题进行详细地阐述,并在此基础上对猪多能性干细胞的研究进行了展望,希望为该研究领域的科研人员提供参考。
雷川云,柯亭羽,徐勉[9](2013)在《干细胞移植治疗2型糖尿病急性心肌梗死的研究进展》文中研究说明与2型糖尿病联系最紧密的莫过于心脏及血管系统,而心脏的干细胞移植治疗给心血管疾病带来了曙光,经诸多生物科学家研究显示,此种方式可加强左心室的收缩期强度,减轻心室肌重构,减慢心衰的生物学进展,从而改善生活质量,延长生命。本研究就干细胞治疗2型糖尿病心肌梗死的研究进行了阐述及对新进展的展望。
谭篆丽[10](2013)在《干细胞研究与应用的伦理思考》文中研究指明干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能特性的细胞,可以作为治疗性克隆的研究与治疗资源,并用于癌症、糖尿病、帕金森病和心脑血管病等复杂人类疾病模型的研究,目前已广泛应用于再生医学、细胞替代治疗及药物筛选等研究领域,成为了世界上最受人瞩目的前沿科技领域之一,且被认为是21世纪的人类健康工程。但是由于干细胞获得方式的特殊性和未来应用的不可预测性,使得它不可避免地会带来一系列的伦理风险。尤其是在干细胞的临床治疗中,除了技术本身的伦理问题,卫生系统内部多方的利益冲突、医患之间的利益冲突以及研究者、投资者与医疗机构及患方之间的利益冲突等问题更加值得关注。在干细胞的研究与应用中,我们要严格遵循医学伦理学原则和规范,促进干细胞治疗健康发展。本文包括四个部分,主要内容如下:第一部分主要概述干细胞的概念、分类及取得方式,以及目前国内外研究与应用的现状。通过对干细胞的概念的简要介绍,使大家对干细胞有个初步的了解。干细胞本身的来源争议是我们研究的前提和主要内容,是需要我们首先解决的。人类干细胞可分为具有争议性的胚胎干细胞和不具争议性的成体干细胞,而胚胎干细胞按照来源不同又可以分为几类。本部分着重介绍了干细胞基础研究和应用的现状。第二部分和第三部分分别对干细胞研究与应用中的伦理问题进行了分析,包括干细胞研究中的有关胚胎的道德价值、干细胞来源中的伦理争议的分析,以及干细胞应用中的生殖性克隆、治疗性克隆等的伦理思考。第三部分着重对干细胞与利益冲突的相关问题进行了阐述。第四部分进行了综合,希望在规范干细胞的道路上注重伦理原则和规范的遵循。通过综合前面部分对国内外现状以及争议的分析,并结合我国的具体国情,为我国干细胞进一步的健康发展提出合理的伦理原则规范的建议。同时我国现阶段针对干细胞临床应用的相关政策管理、伦理规范都有所缺失,也希望借此文章能为我国干细胞研究及其临床应用提供多方面的规范建议。务必使人类胚胎干细胞临床研究符合国际上有关的章程、宣言或准则,为人类健康服务。
二、全能干细胞的研究现状与前景(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、全能干细胞的研究现状与前景(论文提纲范文)
(2)孤雌生殖人类胚胎干细胞技术的专利适格性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
第一节 选题背景及意义 |
第二节 文献综述 |
一、国内研究现状 |
二、国外研究现状 |
第三节 研究内容及研究方法 |
一、研究内容 |
二、研究方法 |
第四节 创新点 |
第二章 我国孤雌生殖HESC技术的专利审查及现存问题 |
第一节 孤雌生殖HESC技术与传统技术的比较 |
一、孤雌生殖HESC技术的相关概念 |
二、HESC的获取来源 |
三、孤雌生殖HESC技术的优势 |
四、孤雌生殖HESC技术在我国的专利授权情况 |
第二节 《专利审查指南》修改前对孤雌生殖HESC技术的专利适格性认定 |
一、湖南光琇公司孤雌生殖HESC技术的专利复审案 |
二、专利适格性判断的法律依据 |
第三节 《专利审查指南》修改后依然存在的问题 |
一、新修正条款 |
二、最大的亮点 |
三、现存的问题 |
本章小结 |
第三章 传统与孤雌生殖HESC技术的专利适格性争议 |
第一节 干细胞领域专利适格性的判断模式 |
一、欧洲模式 |
二、美国模式 |
第二节 传统HESC技术的专利适格性争议 |
一、传统HESC技术的伦理争议 |
二、WARF案发明在美、欧、中的专利适格性认定 |
三、城户常雄案发明在美、欧、中的专利适格性认定 |
第三节 孤雌生殖HESC技术的专利适格性争议 |
一、孤雌生殖HESC技术的伦理争议 |
二、欧洲认定孤雌生殖HESC技术具有专利适格性 |
三、澳大利亚认定孤雌生殖HESC技术具有专利适格性 |
四、孤雌生殖HESC技术在其他国家的专利授权情况 |
本章小结 |
第四章 我国授予孤雌生殖HESC技术专利权保护的正当性与必要性 |
第一节 授予专利权保护的正当性 |
一、符合利益平衡要求 |
二、符合中国伦理指南的指导原则 |
三、符合不断变化的社会公德内涵 |
第二节 授予专利权保护的必要性 |
一、干细胞产业的政策导向 |
二、干细胞产业发展的需要 |
本章小结 |
第五章 对我国孤雌生殖HESC技术专利审查制度的完善建议 |
第一节 孤雌生殖HESC技术在我国具有专利适格性 |
一、不属于科学发现 |
二、不属于疾病的诊断和治疗方法 |
三、HESC及其制备方法不属于不可专利的主题 |
四、不属于人胚胎的工商业目的的运用 |
第二节 对《专利审查指南》的完善建议 |
一、在专利审查中将14天研究期限适用于孤雌囊胚 |
二、允许以现存孤雌干细胞系进行研究的成果可专利 |
三、对具体条款的修改建议 |
本章小结 |
结语 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
附件 |
(3)胚胎干细胞经外胚层向髁突软骨干细胞定向分化及其软骨损伤修复应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
缩略语表 |
绪论 |
第一部分 胚胎干细胞经外胚层向髁突软骨干细胞的分化过程及表型鉴定 |
1.1 研究背景 |
1.2 材料与方法 |
1.3 实验结果 |
1.4 讨论 |
1.5 小结 |
第二部分 评价软骨干细胞自我更新特性及其与髁突软骨的表达谱比较 |
2.1 研究背景 |
2.2 材料与方法 |
2.3 实验结果 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三部分 软骨干细胞体内、外成骨成软骨分化潜能研究 |
3.1 研究背景 |
3.2 材料与方法 |
3.3 实验结果 |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
第四部分 软骨干细胞在关节软骨损伤模型中的修复作用研究 |
4.1 研究背景 |
4.2 材料与方法 |
4.3 实验结果 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
全文总结 |
综述 干细胞向软骨细胞分化的研究进展 |
参考文献 |
致谢 |
攻读博士学位期间主要成果 |
(4)青光眼治疗现状及干细胞在治疗中的研究进展(论文提纲范文)
1 青光眼的特征及目前的临床治疗现状 |
2 干细胞的分类及特点 |
2.1 胚胎干细胞 |
2.2 iPS |
2.3 间充质干细胞 |
2.4 脂肪干细胞 |
3 干细胞在青光眼中的应用 |
3.1 MSC |
3.2 视网膜干细胞 |
3.3 iPS |
3.4 小梁网干细胞 |
3.5 脂肪干细胞 |
4 干细胞的移植方法及临床应用 |
5 总结与展望 |
(5)SIRT7调控骨髓间充质干细胞成骨分化和血管生成促进骨修复(论文提纲范文)
致谢 |
中文摘要 |
英文摘要 |
英文缩略词表 |
1 绪论 |
1.1 骨缺损的治疗是一个亟需解决的问题 |
1.2 骨组织工程修复骨缺损 |
1.3 基因水平调控BMMSCs的成骨能力和血管生成能力可能为骨修复提供了新的方向 |
1.4 SIRT7基因可能参与骨髓间充质干细胞成骨能力和血管生成能力的调控 |
1.5 参考文献 |
2 第一章人的BMMSCs的提取和鉴定 |
2.1 引言 |
2.2 主要实验材料和仪器 |
2.2.1 主要实验材料 |
2.2.2 主要实验仪器 |
2.2.3 实验溶液的配制方法 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 人骨髓间充质干细胞的提取和培养 |
2.3.2 人BMMSCs成骨诱导分化方案及茜素红染色 |
2.3.3 人BMMSCs成脂肪诱导分化方案及油红O染色 |
2.3.4 人BMMSCs成软骨诱导分化方案及阿利新蓝染色 |
2.3.5 人BMMSCs表面标记物的鉴定 |
2.4 实验结果 |
2.4.1 人BMMSCs贴壁培养 |
2.4.2 人BMMSCs能够进行成骨,成软骨,成脂肪分化 |
2.4.3 人BMMSCs表面抗原鉴定符合间充质干细胞分布标准 |
2.5 讨论 |
2.6 结论 |
2.7 参考文献 |
3 第二章SIRT7在BMMSCs成骨分化过程中的作用和基质 |
3.1 引言 |
3.2 主要实验材料和仪器 |
3.2.1 主要实验材料 |
3.2.2 主要实验仪器 |
3.2.3 实验溶液的配制方法 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 人骨髓间充质干细胞的提取和培养 |
3.3.2 慢病毒干细胞转染 |
3.3.3 细胞增殖能力检测 |
3.3.4 成骨分化诱导步骤 |
3.3.5 碱性磷酸酶染色 |
3.3.6 碱性磷酸酶活力检测 |
3.3.7 茜素红染色 |
3.3.8 RNA的提取和聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) |
3.3.9 蛋白质免疫印迹试验 |
3.3.10 蛋白质免疫荧光试验 |
3.3.11 壳聚糖支架消毒及接种干细胞 |
3.3.12 动物实验 |
3.3.13 X线检测 |
3.3.14 Micro-CT检测 |
3.3.15 组织学染色 |
3.3.16 统计学分析 |
3.4 实验结果 |
3.4.1 SIRT7在人BMMSCs内源性表达 |
3.4.2 人BMMSCs中成功敲降SIRT7 |
3.4.3 敲降SIRT7不影响人BMMSCs的增殖 |
3.4.4 敲降SIRT7增加成骨相关基因和蛋白的表达 |
3.4.5 敲降SIRT7增强碱性磷酸酶活力和钙结节的形成 |
3.4.6 敲降SIRT7激活Wnt/β-catenin信号通路 |
3.4.7 Wnt通路抑制剂可部分逆转敲降SIRT7对Wnt信号通路的激活作用 |
3.4.8 敲降SIRT7的人BMMSCs结合壳聚糖支架加速了大鼠胫骨骨缺损的修复 |
3.5 讨论 |
3.6 结论 |
3.7 参考文献 |
4 第三章SIRT7调控BMMSCs的旁分泌促进血管生成的作用和机制 |
4.1 引言 |
4.2 主要实验材料和仪器 |
4.2.1 主要实验材料 |
4.2.2 主要实验仪器 |
4.2.3 实验溶液的配制方法 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 人骨髓间充质干细胞的提取和培养 |
4.3.2 双抗体夹心ELISA法(VEGF-A) |
4.3.3 RNA的提取和聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) |
4.3.4 蛋白质免疫印迹试验 |
4.3.5 人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的培养 |
4.3.6 条件培养基的收集和保存 |
4.3.7 细胞增殖能力检测 |
4.3.8 划痕试验 |
4.3.9 Transwell试验 |
4.3.10 管腔形成试验 |
4.3.11 出芽试验 |
4.3.12 统计学分析 |
4.4 实验结果 |
4.4.1 敲降SIRT7促进人BMMSCs旁分泌VEGF-A |
4.4.2 敲降SIRT7促进VEGF-A的表达 |
4.4.3 采用敲降SIRT7的条件培养基促进HUVECs的增殖 |
4.4.4 采用敲降SIRT7的条件培养基促进HUVECs的迁徙 |
4.4.5 采用敲降SIRT7的条件培养基促进HUVECs的管腔形成 |
4.4.6 采用敲降SIRT7的条件培养基促进HUVECs的出芽 |
4.4.7 采用VEGF-A中和性抗体拮抗分泌的VEGF-A后可逆转敲降SIRT7的条件培养基对HUVECs的血管生成 |
4.4.8 敲降SIRT7激活HIF-1α促进VEGF-A的表达 |
4.5 讨论 |
4.6 结论 |
4.7 参考文献 |
5 综述:骨骼干细胞促进骨再生:研究现状和热点 |
参考文献 |
作者简介 |
(6)人外周血单个核细胞建立诱导性多能干细胞(iPSCs)及永生化细胞的方法探究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 诱导性多能干细胞(iPSCs)的研究现状 |
1.1.1 诱导性多能干细胞的应用 |
1.1.2 诱导性多能干细胞技术的发展 |
1.1.3 仙台病毒转导的原理及其应用 |
1.1.4 人外周血为供体细胞来源建系诱导性多能干细胞的研究现状 |
1.2 永生化细胞的研究现状 |
1.2.1 永生化细胞与肿瘤细胞的区别 |
1.2.2 细胞永生化的方法原理及研究进展 |
1.3 本论文研究的目的与意义 |
1.4 研究内容 |
第二章 诱导性多能干细胞的建系及鉴定 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 实验材料 |
2.1.2 方法步骤 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 原代诱导性多能干细胞的生长及形态 |
2.2.2 诱导性多能干细胞的传代培养 |
2.2.3 诱导性多能干细胞的AP染色鉴定 |
2.2.4 诱导性多能干细胞的免疫荧光鉴定 |
2.2.5 诱导性多能干细胞的三胚层分化鉴定 |
2.3 讨论 |
2.3.1 本研究建系方法的优势 |
2.3.2 诱导性多能干细胞传代技术细节的优化 |
2.3.3 诱导性多能干细胞的多能性表现 |
第三章 永生化B淋巴细胞的建系及鉴定 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 实验材料 |
3.1.2 方法步骤 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 永生化B淋巴细胞的生长及形态 |
3.2.2 永生化B淋巴细胞的流式检测 |
3.3 讨论 |
3.3.1 永生化B淋巴建系技术优化 |
3.3.2 永生化B淋巴细胞的特性 |
第四章 结论 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
附件 |
(7)干细胞在肝脏疾病中应用的现状与希望(论文提纲范文)
■背景资料 |
■同行评议者 |
■研发前沿 |
■相关报道 |
■创新盘点 |
■应用要点 |
■同行评价 |
核心提要: |
0 引言 |
1 肝损伤相关干细胞 |
1.1 ESCs |
1.2 HSCs |
1.3 BMSCs与肝损伤 |
1.4 脐血干细胞与肝损伤 |
1.5诱导全能干细胞与肝损伤 |
2 干细胞治疗肝病临床应用现状 |
2.1 BMSCs |
2.2 脐血干细胞移植 |
2.3 外周血干细胞 |
3 干细胞治疗肝病存在的问题 |
3.1 伦理问题 |
3.2 干细胞临床疗效评估 |
3.3 有关干细胞应用的政策 |
4 干细胞在肝病领域的前景 |
5 结论 |
(8)猪多能性干细胞研究进展与前瞻(论文提纲范文)
1多能性干细胞的定义和分类 |
2猪类胚胎干细胞的研究进展 |
3猪诱导多能干细胞的研究进展 |
3.1关于猪iPSCs的起源 |
3.2猪iPSCs转录因子的筛选 |
3.3在猪iPSCs提高效率的化合物筛选方面 |
3.4猪iPSCs载体系统和源头细胞优化 |
4猪类胚胎生殖细胞的研究进展 |
5猪多能性干细胞的鉴定标准 |
(9)干细胞移植治疗2型糖尿病急性心肌梗死的研究进展(论文提纲范文)
1 目前研究的干细胞 |
1.1 成体干细胞 |
1.1.1 间充质干细胞 |
1.1.2 造血干细胞 |
1.1.3 内皮祖细胞 |
1.1.4 心脏干细胞 |
1.2 胚胎干细胞 |
2 不同移植途径下干细胞疗效 |
2.1 经冠脉行途径的干细胞移植 |
2.2 心肌直接注射途径移植 |
3 临床应用的现状 |
3.1 干细胞移植临床应用及疗效评估 |
3.2 全能干细胞治疗心肌梗死的研究现状 |
4 长期结果与展望 |
(10)干细胞研究与应用的伦理思考(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
前言 |
一、干细胞概述 |
(一) 干细胞的概念、分类及取得方式 |
1. 干细胞的概念及分类 |
2. 干细胞的主要取得方式 |
(二) 干细胞研究的现状 |
1. 干细胞研究在域外的发展情况 |
2. 干细胞研究在国内的发展情况 |
(三) 干细胞应用的现状 |
1. 干细胞对于疾病治疗的应用 |
2. 生殖性克隆和治疗性克隆的应用 |
3. 利益冲突下干细胞的应用 |
二、干细胞研究与应用的伦理困境 |
(一) 干细胞研究中的伦理困境 |
1. 胚胎的道德价值争议 |
2. 胚胎干细胞来源的伦理争议 |
(二) 干细胞应用中的伦理困境 |
1. 干细胞应用于治疗尚未成熟 |
2. 干细胞应用于克隆尚存争议 |
三、利益冲突下的干细胞研究与应用 |
(一) 利益冲突产生的原因 |
1. 医方利益关系产生的利益冲突 |
2. 医院不当治疗引发的利益冲突 |
3. 医药制度分立造成的利益冲突 |
(二) 利益冲突对干细胞研究与应用的影响 |
1. 干细胞研究主体多样缺乏协作意识 |
2. 干细胞研究组织多样影响患者权益 |
3. 干细胞应用急功近利危害患者健康 |
4. 干细胞规范缺乏实效伦理监管不足 |
四、干细胞研究与应用的伦理解决路径 |
(一) 干细胞研究与应用应遵循的伦理原则 |
1. 以人为本的原则 |
2. 有利无伤原则 |
3. 知情同意原则 |
4. 严格准入原则 |
5. 非商业化原则 |
(二) 干细胞研究与应用应遵循的伦理规范 |
1. 遵循人胚胎干细胞研究伦理指导原则 |
2. 遵循医学技术临床应用管理办法 |
结语 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
致谢 |
四、全能干细胞的研究现状与前景(论文参考文献)
- [1]ZYXH公司甘肃市场干细胞存储业务营销策略研究[D]. 李昊昱. 兰州交通大学, 2021
- [2]孤雌生殖人类胚胎干细胞技术的专利适格性研究[D]. 卢琴. 华南理工大学, 2020(07)
- [3]胚胎干细胞经外胚层向髁突软骨干细胞定向分化及其软骨损伤修复应用研究[D]. 沈佩. 上海交通大学, 2019(06)
- [4]青光眼治疗现状及干细胞在治疗中的研究进展[J]. 张雪劼. 现代商贸工业, 2019(25)
- [5]SIRT7调控骨髓间充质干细胞成骨分化和血管生成促进骨修复[D]. 陈尔曼. 浙江大学, 2019(03)
- [6]人外周血单个核细胞建立诱导性多能干细胞(iPSCs)及永生化细胞的方法探究[D]. 郑东敏. 华南理工大学, 2019(01)
- [7]干细胞在肝脏疾病中应用的现状与希望[J]. 姚鹏. 世界华人消化杂志, 2017(01)
- [8]猪多能性干细胞研究进展与前瞻[J]. 薛冰华,刘忠华. 生物技术通报, 2015(04)
- [9]干细胞移植治疗2型糖尿病急性心肌梗死的研究进展[J]. 雷川云,柯亭羽,徐勉. 中国医药科学, 2013(19)
- [10]干细胞研究与应用的伦理思考[D]. 谭篆丽. 天津医科大学, 2013(02)