一、乌司他丁对严重烧伤小型猪肠黏膜损伤的影响（论文文献综述）
程璐[1]（2020）在《通腑泻肺方治疗脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的临床及实验研究》文中提出脓毒症是宿主对感染应答失调所致的威胁生命的器官功能障碍,严重威胁人类健康。由感染引起的全身炎症反应,贯穿脓毒症病程始终。由于肺组织对炎症介质的显着易感性,肺脏是脓毒症最早累及的靶器官,表现为急性呼吸窘迫综合征（ARDS）,临床以进行性加重的呼吸衰竭和顽固性低氧血症为特征。在引起ARDS的诸多病因中,脓毒症是最常见的肺外因素,占40%-60%。随着小潮气量通气、俯卧位通气、肺复张等机械通气方式的应用,ARDS的治疗取得了长足的进步,但重度ARDS的病死率仍然高达70%。中医古籍中并无“脓毒症”记载。根据感染、炎症等临床表现归为温热病范畴,肺为娇脏,为五脏之华盖,最易受外邪入侵。毒邪壅肺,肺脏宣发肃降功能失常,气不布津,大量病理产物内聚,加重全身炎症反应。通过meta分析评估通腑泻肺治疗对ARDS的综合疗效,并依据“六腑以通为用,以降为顺”、“热者寒之,温者清之”理论,自制通腑泻肺方（TFXF）,肺肠同治。通过临床试验观察通腑泻肺方对脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者氧合、肠黏膜屏障功能,炎症介质水平的影响。鉴于NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号轴是涉及固有免疫系统和脓毒症炎症进展的关键信号通路,进一步通过动物实验,借助ELISA、Westerm blot等分子生物学技术,观察通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠一般情况,72h生存率以及NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-8等炎症因子表达的影响,探索中医“釜底抽薪,急下存阴”治则治法的原理,为研究开发应用“通腑泻肺”法治疗脓毒症相关ARDS提供科学的理论依据。研究目的:[1]对通腑泻肺为主的中西医结合方法治疗ARDS的临床随机对照研究进行系统评价,为中医在ARDS中的应用提供理论依据。[2]自拟通腑泻肺方应用于临床,评估其临床疗效,探讨通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS患者氧合、肠黏膜屏障功能以及炎症介质水平的影响。[3]建立脓毒症相关ARDS动物实验模型,通过观察通腑泻肺方对NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号轴关键分子的影响,阐明通腑泻肺法治疗脓毒症相关ARDS的分子机制。研究方法:[1]搜索2001年1月1日至2019年6月30日通腑泻肺法治疗ARDS的随机对照研究,最终纳入27项研究,观察通腑泻肺法对病死率,ARDS并发症（腹胀、呼吸机相关性肺炎、气道水样分泌物、应激性溃疡）发生率、临床治疗有效率、机械通气时间、ICU住院时间、APACHEⅡ评分、Murray肺损伤评分、氧合指数、二氧化碳分压、炎性介质表达（C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-2、白细胞介素-8）、呼吸机参数（气道峰压、气道平台压、平均气道压、气道阻力、肺顺应性）等的影响。以风险比（RR）及相应的95%置信区间（CI）作为二分类变量效应值,以MD或SMD作为连续型变量的效应值。效应模型采用固定效应模型或随机效应模型。应用Cochrane Q和I2统计学评价异质性。应用“漏斗图法”评价发表偏倚。[2]纳入2016年3月至2018年3月南京中医药大学重症医学科收治的诊断为脓毒症相关ARDS、中医辨证符合痰热壅肺证的患者共计40例。随机分为对照组和试验组,试验组给予通腑泻肺方免煎颗粒:大黄12g、枳实12g、厚朴9g、葶苈子20g、桑白皮20g、青皮12g。100ml温水冲调,每日1剂,2次/天;对照组给予等量温开水鼻饲。两组疗程均为7天。比较两组治疗前（0天）、治疗4天及7天氧合指数、肠粘膜通透性指标（血清二胺氧化酶DAO、丙二醛MDA）浓度、以及炎症介质（血清肿瘤坏死因子-α、白介素-6）水平,并统计两组28天累积死亡率。[3]采用腹腔注射LPS法复制脓毒症模型,以氧合指数<200mmHg,作为评价脓毒症相关ARDS造模是否成功的标准。观察大鼠一般状况及生命体征,采用ELISA、Westerm Blot等方法检测NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号轴中关键分子及IL-8,HMGB1、IL-27等炎性介质的表达,初步探讨通腑泻肺中药对脓毒症相关ARDS的调控机制。研究结果:[1]荟萃分析发现使用通腑泻肺为主的中西医结合治疗ARDS较西医常规治疗能显着降低ARDS患者的住院死亡率,减少腹胀、应激性溃疡、呼吸机相关性肺炎、气道水样分泌物等并发症的发生率。对于ARDS的治疗,结合通腑泻肺策略的中西医结合治疗在降低APACHEⅡ评分、肺损伤评分,改善肺氧合状态、减少炎性介质表达、减少机械通气时间、改善呼吸力学指标等方面存在突出优势。[2]临床研究表明,通腑泻肺治疗组第4天、第7天患者的氧合指数均显着高于对照组（P<0.05）。通腑泻肺治疗组患者第4天血清MDA水平较对照组显着下降（P<0.05）,通腑泻肺治疗组患者第7天血清DAO和IL-6水平较对照组显着下降（P<0.05）。但两组间TNF-α及NO表达的变化差异不具有统计学意义。[3]动物实验研究表明,通腑泻肺方治疗组大鼠生存率较模型组明显改善（P<0.05）,ELISA联合免疫组化检测结果提示通腑泻肺方能有效抑制脓毒症相关ARDS大鼠外周血清和肺组织中炎性因子HMGB1、IL-1β、IL-8、IL-27的蛋白的表达（P<0.05）,且大剂量通腑泻肺组抑制作用更为明显（P<0.05）;Westem Blot结果显示模型组NLRP3蛋白的表达较对照组显着增高,大、小剂量TFXF组NLRP3表达均较模型组降低。模型组活化的Caspase-1 p20蛋白的表达较对照组显着增高,给予通腑泻肺中药干预后,大、小剂量TFXF组Caspase-1 p20表达均较模型组降低。模型组HMGB1蛋白的表达较对照组显着增高,给予通腑泻肺中药干预后,小剂量TFXF组HMGB1蛋白的表达量无明显减少,仅观察到大剂量TFXF组HMGB1蛋白的表达较模型组下降。模型组IL-1β、IL-8及IL-27蛋白的表达较对照组显着增高,大、小剂量TFXF组IL-1β、IL-8及IL-27蛋白的表达均较模型组显着降低,其中大剂量TFXF组对IL-1β表达具有显着抑制效应。研究结论:[1]Meta分析结果表明通腑泻肺治疗可有效抑制病原菌的生长,减少内毒素的吸收,缓解胃肠道功能障碍所致的腹胀,防止菌群移位,修复受损的胃肠粘膜屏障。可清除内毒素,降低肺毛细血管通透性,有效改善肺水肿症状,有利于ARDS的缓解,从而降低ARDS患者呼吸机支持参数,减少气道阻力,改善氧合状态。其机制可能与通腑泻肺治疗减少炎性介质在肺部的聚集,调控体内促炎介质和抗炎介质反应平衡有关。[2]临床研究提示通腑泻肺治疗一定程度上可以抑制脓毒症相关ARDS患者的炎症反应,通过减轻因炎症反应带来的肺损伤,改善氧合。通腑泻肺治疗可减轻脂质过氧化及机体的氧化应激水平,减少肠源性内毒素的释放,保护肠粘膜屏障功能的完整性,进而减轻肠功能障碍引起的肺损伤的发生。[3]动物实验研究表明通腑泻肺方能显着抑制脓毒症相关ARDS大鼠NLRP3炎症小体蛋白的表达水平,下调NLRP3炎症小体的合成;抑制Caspase-1活化,下调下游IL-1β、IL-8,IL-27及HMGB1等炎性介质蛋白表达。
李东波[2]（2019）在《加味四君子颗粒剂对断奶獭兔肠道发育的影响及机理研究》文中研究表明獭兔是一种具有较高养殖效益的经济动物。獭兔断奶时由于消化系统发育不全、免疫力相对较低,容易发生腹泻甚至死亡,严重影响养殖效益。加味四君子颗粒是在传统四君子汤方剂的基础上添加了黄芪、柴胡等药物,利用现代药剂学技术制成的颗粒剂,前期研究表明加味四君子颗粒对断奶獭兔具有较好的的保健效果,能显着降低獭兔肠道腹泻及断奶后的死亡率。为了更加深入探讨加味四君子颗粒对断奶獭兔肠道发育的影响及机理,本研究通过病理切片、酶联免疫法、免疫组化法、RT-PCR等方法,研究了加味四君子颗粒对断奶獭兔小肠长度重量、肠道结构形态、免疫功能、肠道屏障功能以及主要营养物质吸收方面的影响,为加味四君子颗粒的临床应用提供实验依据。本研究选取160只断奶健康川白獭兔（45日龄）,随机分为5组。空白对照组饲喂基础日粮,低剂量组、中剂量组和高剂量组在基础日粮的基础上分别添加0.5%、1%、2%三个剂量的加味四君子颗粒剂,阳性对照组在基础饲粮基础上添加0.8%比例的谷氨酰胺。预试期7天,正式期30天。在试验的第15天和第30天每组抽取6只试验兔进行样品采集和检测,结果如下:1.对试验獭兔小肠长度和相对重量测定结果表明,日粮添加2%的加味四君子颗粒剂能够显着提高试验期间断奶獭兔小肠长度,阳性对照组谷氨酰胺能够显着提高试验第30天时断奶獭兔小肠长度。各组在试验期间对獭兔的小肠相对重量影响不显着。2.对试验獭兔肠道组织切片的结果表明,日粮添加2%的加味四君子颗粒剂能够显着增加试验第15天时断奶獭兔空肠的绒毛高度以及绒隐比,添加谷氨酰胺能组能够显着影响试验第15天时断奶獭兔空肠的绒隐比值。3.对试验獭兔肠道SIgA含量的测定的结果表明,在整个试验期间,日粮添加2%的加味四君子颗粒剂或谷氨酰胺能够显着提高试验期间獭兔十二指肠SIgA的含量,日粮添加2%加味四君子颗粒剂能显着提高试验期间断奶獭兔空肠SIgA含量。对试验獭兔肠道SIgA蛋白免疫组化结果表明,日粮添加2%加味四君子颗粒剂或谷氨酰胺能够显着增加试验期间断奶獭兔空肠SIgA的蛋白表达。4.对试验獭兔肠道屏障功能研究表明,日粮添加1%的加味四君子颗粒剂能够显着提高试验第30天时獭兔十二脂肠、回肠Occludin mRNA表达,日粮中添加2%加味四君子颗粒剂能够显着提高试验第15天獭兔空肠Zo1、Occludin mRNA表达,以及试验第30天十二指肠和空肠Zo1、Occludin mRNA表达。添加谷氨酰胺能够显着提高试验第15天时獭兔十二指肠和空肠Zo1、Occludin mRNA的表达,也能显着提高试验30天时獭兔十二脂肠和空肠Zo1、Claudin1、Occludin mRNA的表达。5.对试验獭兔肠道主要营养物质吸收研究表明,日粮添加1%加味四君子颗粒剂能够显着提高试验第30天獭兔空肠GLUT2 mRNA表达。日粮添加2%加味四君子颗粒剂能够显着提高试验期间獭兔空肠和回肠GLUT2 mRNA表达。日粮添加1%加味四君子颗粒剂能够显着提高试验期间獭兔十二脂肠SGLT1 mRNA表达。日粮添加2%加味四君子颗粒剂能够显着提高试验期间獭兔十二指肠和回肠SGLT1 mRNA表达。添加谷氨酰胺能够显着提高试验第15天时獭兔十二指肠SGLT1 mRNA表达。综上所述,日粮添加加味四君子颗粒剂能够提高断奶獭兔小肠长度,改善肠道形态,提高小肠免疫功能,增强小肠对葡萄糖的吸收,从而达到促进断奶獭兔肠道发育、防治断奶獭兔腹泻、促进獭兔生长发育、增加养殖效益的效果。其添加量以2%最优。该研究成果为加味四君子颗粒在獭兔断奶保健中的应用奠定了基础。
董伟[3]（2019）在《大黄调控mTOR/HIF-1a/VEGF信号通路治疗急性肺损伤的机制研究》文中研究说明目的:基于mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路探讨大黄治疗内毒素急性肺损伤的机制。方法:（1）建立内毒素急性肺损伤大鼠模型,观察大黄对模型肺组织病理形态和支气管肺泡灌洗液中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量的影响。（2）建立内毒素诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,研究大黄对TNF-α、IL-1β、IL-6含量和mTOR/HIF-1α/VEGF信号通路的影响。结果:（1）体内实验结果HE染色光镜下观察肺组织病理结构:模型组肺组织内可见局部肺出血,肺血管内白细胞数显着增多,肺间质水肿、炎细胞浸润;大黄低剂量组和大黄高剂量组的肺组织病理改变均有减轻。与正常组相比,模型组支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显升高（P<0.05）;与模型组相比,大黄低剂量组中TNF-α含量明显降低（P<0.01）,大黄高剂量组IL-6含量明显降低（P<0.05）。（2）体外实验结果与正常组相比,模型组TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,大黄组（200 ug/ml）中TNF-α含量明显降低（P<0.05）,大黄组（800 ug/ml）中IL-6、IL-1β含量明显降低（P<0.05或P<0.01）。与正常组相比,模型组HIF-1a m RNA、e IF4E m RNA、p70S6K1 m RNA表达显着升高（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,大黄组（200ug/ml）HIF-1a m RNA、p70S6K1 m RNA、e IF4E m RNA表达显着降低（P<0.01）;大黄组（400ug/ml）HIF-1a m RNA、p70S6K1 m RNA表达显着降低（P<0.01）;大黄组（800ug/ml）HIF-1a m RNA、p70S6K1 m RNA、e IF4E m RNA表达显着降低（P<0.01）。与正常组相比,模型组HIF-1a、VEGF蛋白表达明显升高（P<0.05）;与模型组相比,大黄组（200ug/ml）VEGF蛋白表达明显降低（P<0.05）,大黄组（400ug/ml）VEGF蛋白表达明显降低（P<0.01）,大黄组（800ug/ml）HIF-1a、VEGF蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论:（1）内毒素大鼠急性肺损伤的发病机制可能与TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高有关;（2）大黄减轻内毒素急性肺损伤大鼠肺组织病理损伤,同时降低内毒素急性肺损伤大鼠支气管肺泡灌洗液TNF-α、IL-6表达水平。大黄可以保护内毒素急性肺损伤大鼠的肺组织,其机理可能与大黄能够降低内毒素急性肺损伤大鼠TNF-α、IL-6的含量有关;（3）大黄下调内毒素诱导细胞RAW264.7炎性模型的炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β的表达水平;且能下调HIF-1α、e IF4E、p70S6K1 m RNA以及HIF-1α、VEGF蛋白表达;大黄下调内毒素诱导鼠RAW264.7细胞模型炎性因子的机制,可能与其下调HIF-1α、e IF4E、p70S6K1 m RNA以及HIF-1α、VEGF蛋白表达有关。
曹才文[4]（2019）在《乌司他丁预防重症中暑小鼠早期肠粘膜屏障功能损害的实验研究》文中研究表明研究背景和目的随着全球气候变暖以及热浪袭击频率和强度的逐年增加,中暑（Heatstroke,HS）的发病率明显增加。中暑如未得到正确救治,可能导致严重的多脏器损害,病死率高达10%～50%。目前对于中暑研究的普遍观点认为,中暑的病理生理学反应不仅仅是由热暴露的直接损伤引起的,而更多的是一种继发于热损伤之后的全身炎症反应综合征（Systemic inflammatory response syndrome,SIRS）,进而引发多器官功能障碍综合征（Multiple organ dysfunction syndrome,MODS）的过程。既往研究表明肠道作为体内最大的“储菌库”和“内毒素库”,以其在体内独特的生理环境参与SIRS和MODS的病理生理过程,因此肠道被称之为“MODS的原动力”。肠屏障功能可因各种因素而改变,各种刺激因素致肠粘膜屏障功能损伤后,使肠内细菌移位,内毒素、细菌、抗体介质不断进入血液和淋巴液,导致多种炎症介质释放,引发和加重失控性炎症反应综合征,而SIRS的发生更加重了肠道损伤,形成恶性循环,最终导致MODS。在对重症中暑的研究中已发现存在胃肠病变,包括肠道粘膜受损,肠上皮细胞凋亡、肠通透性增加等。Lambert等观察大鼠肠道（包括十二指肠、空肠、回肠和结肠）对高热打击的反应中,发现当大鼠核心体温达到42.5℃C后可见肠上皮细胞破坏,微绒毛丧失,紧密连接开放,线粒体肿胀、空泡化,并且对异硫氰酸荧光素（FITC）-葡聚糖的通透性增加。临床死亡的中暑病例主要症状常常包括胃肠道出血、内毒素血症,提示中暑肠屏障功能损害和全身炎症反应密切相关。后来一系列的实验室研究也发现,热打击与肠道衍生脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）有关,而去除LPS或治疗内毒素血症后,则对中暑预后有利,这些结果提示了内毒素血症中炎性细胞因子反过来加重肠粘膜损害,二者形成互为作用、互为因果。因此,要预防中暑肠源性内毒素血症和细菌移位发生,除“快速降温”外,针对于改善肠粘膜屏障功能的“第二关键点”治疗策略同样具有重要意义。乌司他丁（Ulinastatin,UTI）是从男性尿液分离纯化出来的尿胰蛋白酶抑制剂,能同时抑制磷脂酶A2,胰蛋白酶,弹性蛋白酶等多种水解酶活性;此外,还有改善休克时的循环状态,抑制心肌抑制因子的产生,抑制炎症介质的释放,稳定溶酶体膜等功能,目前广泛应用于临床。目前研究已证实UTI对多种疾病造成的肠粘膜损伤具有保护作用,然而对于UTI是否也对重症中暑肠粘膜损害具有保护作用,目前较少报道。鉴于以上现状,本研究通过建立热打击中暑小鼠动物模型,探讨高热对肠粘膜屏障功能的影响及其与全身炎症反应的相关性;进一步使用UTI预处理中暑动物,观察UTI对重症中暑动物模型肠粘膜屏障的影响。方法:采用6-8周龄SPF级雄性BALB/c小鼠(SYXK（YUE）2011-0015]建立中暑模型,随机分为对照组、40℃热打击组、42℃热打击组;观察药物治疗效应随机分为sham组、HS组（42℃热打击）、低剂量UTI组（5000U/kg）及高剂量UTI组（10000U/kg）。对照组/sham组动物始终置于常温下（25±0.5℃）,热打击组置于仿真气候舱内,舱内温度（35.5±0.5）℃,湿度（60±5）%,每30min用肛温表测小鼠直肠温度,当小鼠体温达到41.5 ℃时,每10min测小鼠直肠温度,40℃热打击组小鼠在体温达到40℃时停止热打击,42℃C热打击组小鼠体温达到42℃即停止热打击,各组动物按照不同复温时间点分为0、1、3、6、12、24h。药物治疗组在造模前腹腔注射UTI 5000U/kg或10000U/kg,24h/次,连续3d;sham组和HS组给予腹腔注射等量（容积）生理盐水,24h/次,连续3d。观察药物治疗效应所有动物均在成模后复温12h处死动物。组织病理和电镜观察各组小鼠肠粘膜组织形态学的改变;细菌学方法观察肠道细菌向肠系膜淋巴结（Mesenteric lymph nodes,MLN）、肝、脾、肾等移位的频率及组织细菌含量;鲎试剂比色法检测血清内毒素;酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA法）检测腔静脉血浆LPS、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）及肿瘤坏死因子-a（Tumornecrosis factor-a,TNF-a）的含量;免疫组化观察TJ蛋白（紧密连接蛋白）Occludin和ZO-1表达;TUNEL法检测肠粘膜上皮细胞凋亡率。统计学处理 所有数据录入SPSS17.0统计软件进行统计学分析,计量资料采用x±s表示,两组资料的均数比较采用t检验。多组间均数比较采用单因素方差分析,若方差齐采用LSD法进行组间比较,方差不齐则采用Games-Howell方法进行组间比较,P<0.05认为有统计学意义。结果 本课题研究主要结果如下1、通过建立的小鼠中暑动物模型,采用鲎试剂比色和酶联免疫吸附（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）的技术方法,研究肠粘膜屏障功能的变化对中暑后早期全身炎症反应的影响。使用Kaplan-Mier曲线和Log Rank检验评估中暑小鼠生存时间和生存率的改变。结果发现:1.1热打击过程中核心体温变化呈“双峰”样改变,在小鼠遭受热打击前15min先迅速升高到达39℃左右,15min～30min又迅速降至近38℃,之后随着热打击时间而逐渐上升,在体温达到41℃之前有一段较长的稳步上升期,其后当体温达到41℃后上升幅度加大,迅速上升至42℃以上。当小鼠体温到达42℃时生命体征极不稳定,可在短短10～30min体温急剧上升到43℃以上并死亡。本研究选取小鼠核心体温达到40℃及42℃后行复温观察,结果发现不同程度热打击后进行复温的体温可短时间（30min）迅速下降,并且热打击程度越重复温时体温降的越低。1.2小鼠全身炎症反应观察 小鼠腔静脉血浆LPS、TNF-a和IL-6水平与热打击程度及复温时间相关。使用重复测量方差分析方法,得到温度与血浆LPS存在交互效应（F=12.685,P<0.001）,与对照组比较,40℃组小鼠在复温1h开始血浆LPS开始升高,复温3h显着上升,至24达高峰;42℃组小鼠血浆LPS浓度在热打击后Oh即明显上升,其上升幅度明显大于40℃组。与对照组和40℃组小鼠比较,42℃组小鼠血浆TNF-a和IL-6水平显着上升,并且呈复温依赖性升高,差异有显着统计学意义。与对照组比较,40℃组小鼠血浆TNF-a和IL-6水平也有明显升高,差异有统计学意义（P<0.001）。1.3小鼠生存时间分析 本研究中常温对照组和40℃热打击组小鼠全部存活超过72h,而42℃组小鼠复温后72h内全部死亡,死亡率100%,其中大部分在24h内死亡,其中位生存时间为18h。2.采用组织病理形态学分析、电镜超微结构观察、细菌学分析、酶联免疫吸附（ELISA）、TUNEL及免疫组化等技术方法,探讨肠粘膜屏障功能障碍与全身炎症反应及肠上皮细胞凋亡的相关性。2.1 HE染色观察肠粘膜损伤 40℃热打击组小鼠回肠粘膜厚度均匀,肠上皮较为完整,绒毛排列尚规则,固有层略疏松,有少量淋巴细胞浸润,有炎性细胞浸润。42℃热打击组小鼠肠粘膜明显萎缩,黏膜层和固有层重度分离,绒毛基本完全脱落,固有层裸露、水肿,淋巴细胞及中性粒细胞浸润。与对照组比较,热打击组在小肠绒毛高度（F=84.833,P=0.000）、厚度（F=116.006,P=0.000）及表面积（F=63.27,P=0.000）,差异有显着统计学意义。2.2电镜观察肠粘膜损伤 40℃热打击后小鼠肠黏膜上皮细胞表面微绒毛排列尚整齐,部分上皮细胞轻度肿胀,线粒体肿胀、灶性空化,粗面内质网轻度扩张;42℃热打击后上皮细胞微绒毛稀疏、排列不整、呈倒伏状、部分缺如,上皮细胞连接增宽、形成大量指状突起,部分紧密连接增宽或开放,部分上皮细胞胞质可见空泡样结构,线粒体肿胀,内质网扩张。与对照组比较,热打击组小鼠肠粘膜超微结构改变明显。2.3小鼠热打击后各脏器细菌检出情况40℃热打击组样本和对照组无显着差异,42℃热打击组小鼠细菌检出了显着高于对照组和40℃热打击组（χ2=100,p=0.000）。2.4中暑小鼠早期出现肠粘膜屏障功能损害 对照组比较,血浆中DAO活性在40℃热打击轻度升高,42℃热打击后显着升高,与对照组和40℃热打击组比较有显着统计学意义（F=33.928,P=0.000）。热打击后血浆D-乳酸浓度变化与血浆DAO活性变化有所不同,40℃热打击与对照组比较无明显升高,42℃热打击后显着升高,与对照组和40℃热打击组比较有显着统计学意义（F=49.745,P=0.000）。2.5肠屏障功能障碍与全身炎症反应的相关性分析 对代表肠粘膜屏障功能损害的指标二胺氧化酶（Diamine oxidase,DAO）活性和D-乳酸浓度与反映全身炎症反应的指标（血浆INF-a、IL-6和LPS）的相互关系进行线性回归及直线相关分析,结果显示:小鼠血浆炎症反应的指标（血浆INF-a、IL-6和LPS）与血浆DAO活性（P值均小于0.001,相关系数分别为r=0.8075、0.8358、0.8341）和D-乳酸浓度（P值均小于0.001,相关系数分别为r=0.8111、0.8001、0.8107）呈显着正相关,说明肠屏障功能损害在中暑全身炎症反应中的发生中起着非常重要的作用。2.6免疫组化检测肠道TJ蛋白Occludin和ZO-1表达常温对照组的TJ蛋白Occludin和ZO-1均匀一致的分布于小肠粘膜上皮细胞连接处的尖端,呈蜂巢状;40℃热打击组的Occludin和ZO-1表达分布较一致,但与对照组比较表达减少;40℃热打击组Occludin和ZO-1表达显着减少,染色浅见图2-6和2-7。通过计算免疫组化平均OD值发现:热打击组Occludin和ZO-1蛋白的0D值明显低于对照组,各组之间比较有显着统计学意义（p<0.05）,这一结果提示中暑后肠道精密连接受损,即中暑可能早期诱导细胞旁途径的肠粘膜屏障损伤。2.7肠道TJ蛋白与小肠屏障功能损害和全身炎症反应的相关性分析 线性回归及直线相关分析显示:紧密连接蛋白Occludin和ZO-1与小鼠血浆炎症反应的指标（血浆TNF-a、IL-6）（P<0.001,相关系数分别为r=0.8156、0.8858、0.8548、0.9290）,呈显着正相关。这一结果提示中暑小鼠全身炎症反应和肠粘膜屏障损害有关。Occludin和ZO-1与血浆DAO活性（P<0.001,相关系数分别为r=-0.7640、-0.8003）和D-乳酸浓度（P<0.001,相关系数分别为r=-0.7215、-0.7639）呈显着负相关。这一结果提示DAO活性及D-乳酸浓度能较好反映中暑小鼠肠粘膜屏障功能。2.8 TUNEL法肠粘膜细胞原位凋亡检测 42℃C热打击组绒毛顶端及隐窝部可见较多的凋亡细胞。对照组、40℃C热打击组和42℃C热打击组的凋亡指数（AI）分别为3.95±0.96,9.55±2.20和33.72±6.14,与对照组比较,40℃C热打击组和42℃热打击组第细胞凋亡指数均具有显着统计学意义（χ2=47,P=0.000）。2.9肠粘膜上皮细胞凋亡指数（Apoptotic index AI）与小肠屏障功能损害和全身炎症反应的相关性分析 将不同程度热打击后小鼠肠上皮细胞AI分别与血浆DAO活性、D-乳酸浓度以及血浆INF-a、IL-6水平进行线性回归及直线相关分析,结果显示:1、AI 与血浆DAO活性（r=0.8687,p=0.000）和D-乳酸浓度（r=0.8388,p=0.000）,呈高度正相关。2、AI与血浆INF-a（r=0.9001,p=0.000）和IL-6（r=0.9193,p=0.000）水平呈显着正相关。3、采用前述技术方法,观察UTI预处理对重症中暑早期肠粘膜屏障的保护作用并对重症小鼠行生存分析。结果发现,与HS组（单纯热打击组）相比,UTI预处理组小鼠肠粘膜组织形态学、肠粘膜组织超微结果及肠屏障功能有明显改善;细菌移位率、血浆LPS浓度及炎症因子IL-6、TNF-a明显降低,重症中暑小鼠全身炎症反应明显减轻;肠道TJ蛋白Occludin和ZO-1表达增加;肠上皮细胞凋亡指数明显下降;同时生存分析显示UTI预处理也显着改善重症中暑小鼠的生存时间和生存率。并且,上述损伤指标在大剂量UTI（10000U/kg）组改善更为显着。结论:本课题在成功复制课题组前期中暑动物模型基础上,从整体动物水平阐述了中暑后早期肠粘膜屏障功能损害的发生机制及其与全身炎症反应的关系,并初步探讨了不同剂量UTI预处理对重症中暑后早期肠粘膜屏障功能损害的保护作用及机制。通过研究我们发现（1）中暑动物体温变化和生存时间与小鼠核心体温有关,中暑后小鼠全身炎症反应明显。（2）中暑后肠粘膜屏障功能损害可能是SIRS,甚至MODS的主要病理机制,其中肠上皮细胞大量凋亡可能是肠粘膜屏障功能受损的重要因素。（3）乌司他丁能有效减轻重症中暑早期肠上皮细胞凋亡、从而改善肠粘膜损害,减轻全身炎症反应水平,改善中暑动物预后。
黄超发[5]（2018）在《乌司他丁对老年重症患者肠屏障功能障碍影响的临床研究》文中指出老年患者由于其自身免疫功能处于衰退阶段,其胃肠道的屏障功能也开始退化,当患有急危重症时,如严重感染、大的创伤、大手术后,往往导致肠道屏障功能的损害。如何防治老年重症患者肠屏障功能障碍,是临床面临的一大难题。乌司他丁具有广谱的抑制多种蛋白酶的作用,且能防止多种因素引起的炎症因子的释放,对于许多脏器也具有一定的保护作用,已广泛运用于临床治疗中,但目前关于乌司他丁对老年重症患者肠道功能障碍的治疗上,临床证据仍比较缺乏。【目的】探讨乌司他丁对老年重症肠屏障功能障碍患者肠屏障功能及其预后的影响。【方法】收集2016年5月-2017年02月我院ICU病房收治的老年肠屏障功能障碍者,按照随机数字表法分为研究组和对照组,各25例。治疗期间,对照组给予积极纠正病因、高级生命支持、加强抗感染、纠正内环境紊乱、营养支持及多器官保护等常规治疗,研究组在常规治疗的基础上给予乌司他丁。所有患者于住院当天（D0）、第1、2、3、7天（D1,D2,D3,D7）抽取外周静脉血,采用酶联免疫吸附法检测患者降钙素原（Procalcitonin,PCT）,内毒素血症（Bacterial endotoxin,BT）,血浆二胺氧化酶（Diamine oxidase,DAO）,血浆D-乳酸（D-lactate,D-Lac）水平,并记录患者APACHE II评分、SOFA评分、ICU住院时间及28天生存情况。【结果】两组患者治疗前,APACHEⅡ评分、SOFA评分、血清PCT水平以及BT、DAO、D-Lac水平均无明显统计学差异（P均>0.05）。经治疗后两组患者APACHEⅡ评分和SOFA评分均有所下降,但研究组较对照组,APACHEⅡ评分和SOFA评分下降趋势更明显,研究组在D3、D7观察点APACHEⅡ评分均显着低于同时间点对照组,研究组在D2、D3、D7观察点SOFA评分均显着低于同时间点的对照组,差异具有统计学意义（P均<0.05）。另外,研究组和对照组PCT水平随着治疗的进行呈递减趋势,且研究组下降趋势更为明显,在D2、D3观察点时,研究组PCT水平明显低于对照组,差异具有统计学意义（P均<0.05）。同时,随着治疗的进行,两组患者血清BT、DAO及D-Lac水平均有所下降,且研究组下降趋势更为明显,治疗后各观察点,研究组BT水平均显着低于对照组;在D2、D3、D7观察点,研究组DAO水平均显着低于对照组;在D3、D7观察点,研究组D-Lac水平均显着低于对照组,差异具有统计学意义（P均<0.05）。此外,患者APACHE II评分、SOFA评分、血清PCT水平以及与患者住院时间患者血浆BT,DAO,D-Lac水平呈正相关关系,且差异具有统计学意义（P均<0.05）。研究组住院时间显着低于对照组（P<0.05）,但研究组和对照组28天病死率无明显差异（P>0.05）。【结论】（1）乌司他丁可缩短患者住院时间,但对于降低28d病死率无显着作用;（2）乌司他丁可改善肠屏障功能障碍患者的早期炎症反应,并降低内毒素水平。
崔源菲[6]（2017）在《高压电烧伤大鼠血清SOD、MDA的变化及乌司他丁的干预作用》文中提出目的:高压电通过电热效应、电化学效应及电场力等作用,对机体神经、血管、肌肉等组织及器官造成损伤。高压电烧伤致伤的病理及生理机制尚未完全明了。研究认为,氧化应激参与高压电对机体的损伤过程。研究表明,烧伤后机体产生大量活性氧（reactive oxygen species,ROS）,活性氧通过脂质过氧化等反应损伤组织和器官,并与炎症因子和血管活性物质协同作用,造成氧化应激损伤。高压电烧伤导致全身氧化应激反应的因素很多,其中血浆超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）在调节氧化应激方面有重要作用。SOD是广泛存在于生物体的金属氧化酶,能催化超氧阴离子自由基的歧化反应,通过清除细胞产生的超氧离子而发挥作用。MDA是脂质过氧化反应的产物。目前,关于高压电烧伤后大鼠血清SOD、MDA定量及定性变化的相关研究较少,本研究检测高压电烧伤大鼠血清SOD、MDA含量的变化,并采用乌司他丁（Ulinastatin,UTI）进行干预,旨在探索大鼠高压电烧伤后血清SOD、MDA的变化规律,证明氧化应激在高压电烧伤渐进性损伤发生和发展过程中的作用,探索UTI对高压电烧伤的治疗效果。方法:1实验动物分组:本实验用成年SD大鼠240只,大鼠由河北医科大学动物实验中心提供（合格证编号832457）,体重291-362g,按随机区组设计法将其随机分为四组,每组60只,即假高压电烧伤组（假伤组）、高压电烧伤组（电伤组）、高压电烧伤UTI治疗组（UTI组）、高压电烧伤盐水治疗组（盐水组）。按随机数字表法,每组按观察时相分为电伤前15min、电伤后5min、电伤后1h、2h、4h、8h六个时相组,每一时相组10只大鼠。2实验前准备:（1）将实验大鼠称重并给予其编号登记;（2）准备实验用采血管、采血针等物品,记录实验数据;（3）按药品说明配置实验药品使其达到实验所需浓度。3高压电烧伤动物模型制备:用10%的水合氯醛（0.3ml/100g）溶液注入大鼠腹腔以麻醉实验大鼠,待麻醉成功后,将麻醉后大鼠仰卧固定于专用的电击实验台上。大鼠左上肢及右下肢脱毛处理,大鼠的左上肢（电流入口）及右下肢（电流出口）分别连接1cm×1cm电极片。将实验变压器和调压器电线相连接;再接通电源,调节调压器指针,将升压器输出电压调至2kv,接通升压器输出电源开关,使高压电流通过大鼠致电击,持续电击3s,高压电烧伤模型制作完成。将电伤后大鼠分笼放好,待采血。假伤组不予通电,其余处理步骤与电伤组及uti组的相同。盐水组电后5min内注射生理盐水5ml/kg至大鼠腹腔内,uti组电后5min内注射uti（2ml/kg）至大鼠腹腔内。每组样品按时相进行采血、分离血清。4标本采集与保存:将高压电烧伤大鼠再次麻醉,待麻醉后开胸暴露心脏,于心脏内直接抽血取样,血量约6ml,将抽出的血液注入促凝管中,静置30min,待血清析出后,放入离心机,调整转速3000转/min,离心10min,取上清液置于eppendorf管中于-70℃条件下保存。5指标检测:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa）,分别检测每组大鼠的六个时相组血清sod、mda含量。6实验数据处理:采用spss21.0统计软件,行两因素析因设计的方差分析,多重比较采用lsd法t检验。以p<0.05为显着性检验水准。结果:1大鼠血清sod含量变化电伤组大鼠血清sod含量与假伤组差异有显着性,总体低于假伤组（主效应f=165.245,p<0.05）;电伤组血清sod含量各时相变化差异有显着性（主效应f=16.905,p<0.05）,伤后5min8h各时相均低于本组伤前值（p<0.05）,且呈逐渐降低趋势,sod含量在8h时相时达到最低,但电伤组sod含量仍较假伤组同时相低。血清sod含量uti组与盐水组差异有显着性,总体高于盐水组（主效应f=31.043,p<0.05）;uti组sod含量各时相变化差异有显着性（主效应f=62.830,p<0.05）,uti组sod含量伤后5min8h各时相均高于本组伤前值（p<0.05）,且呈逐渐降低趋势。2大鼠血清mda含量变化电伤组血清mda含量与假伤组差异有显着性,总体高于假伤组（主效应F=1586.203,P<0.05）;电伤组MDA含量各时相变化差异有显着性（主效应F=126.552,P<0.05）,伤后5min8h呈逐渐增高趋势,且各时相均高于本组电伤前值（P<0.05）。UTI组血清MDA含量与盐水组差异有显着性,总体低于盐水组（主效应F=45.326,P<0.05）;UTI组MDA含量各时相变化差异有显着性（主效应F=246.201,P<0.05）,UTI组伤后5min8h各时相均高于本组伤前值（P<0.05）,且呈逐渐增高趋势。结论:高压电烧伤使大鼠血清SOD含量降低、MDA含量升高,诱导高压电烧伤后氧化应激反应。高压电烧伤后采用UTI治疗,可使血清SOD的含量增加,MDA含量降低,表明UTI可以抑制高压电烧伤后的氧化应激反应,减轻氧化应激对高压电烧伤后机体的损伤。
叶胜捷,张文振,庞淑光,方声教,章锦成,陈如俊,叶鹂柳[7]（2014）在《乌司他丁与沐舒坦治疗严重烧伤伴吸入性损伤的疗效分析》文中进行了进一步梳理目的:探讨严重烧伤伴中重度吸入性损伤患者早期联合使用大剂量乌司他丁与沐舒坦的临床疗效。方法:选择2003年5月2013年5月在我院接受治疗的185例严重烧伤伴中重度吸入性损伤患者,随机分为两组,治疗组93例,对照组92例。两组患者在确诊为中重度吸入性损伤后,立即给予传统常规治疗:吸氧、视情尽早预防性气管切开、湿化气道及气道灌洗、翻身拍背吸痰、呼吸机辅助呼吸等。治疗组在常规治疗的基础上给予乌司他丁40万单位,每隔8h静脉滴注,沐舒坦450 mg,每隔12h微泵静推;对照组给予乌司他丁10万单位,每隔8h静滴,沐舒坦30 mg,每隔8h静滴,疗程为10天,比较两组患者急性肺损伤（ALI）的发生率、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的发生率、呼吸机使用时间、死亡率。结果:治疗组93例患者,治愈92例,死亡1例,死亡率为1.08%（1/93）,治疗过程中发生ALI34例,ARDS12例,呼吸机使用时间为（4.2±2.1）d。对照组92例患者治愈88例,死亡4例,死亡率率为4.35%（4/92）,治疗过程中发生ALI43例,ARDS17例,呼吸机使用时间为（8.2±2.7）d。两组患者ALI发生率、ARDS发生率、呼吸机使用时间、治愈率差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:对于严重烧伤伴中重度吸入性损伤的患者,在气管切开的前提下,给予常规传统治疗的同时,采用大剂量乌司他丁与沐舒坦早期联合使用给药,能够明显的提高治愈率,降低并发症,值得在临床上广泛推广应用。
何英,廖毅[8]（2014）在《早期应用乌司他丁对严重烧伤的治疗作用》文中认为该研究概述了乌司他丁的理化性质、生理功能和临床应用,并重点就其早期应用于重度烧伤的治疗作用及其作用机制进行了探讨。
胡骁骅,孙永华[9]（2008）在《乌司他丁对严重烧伤后脏器的保护作用》文中提出
张福清[10]（2008）在《乌司他丁对脓毒症大鼠肠粘膜屏障的影响》文中研究说明研究背景:脓毒症（sepsis）是机体对感染的一种全身性炎症反应（SIR）,是严重感染、重度创伤,大手术后,重型急性胰腺炎和休克等常见的并发症,进一步发展可导致感染性休克,急性呼吸窘迫综合征（ARDS）和多器官功能障碍综合征（MODS）。虽然抗感染治疗、外科技术、危重病监护和治疗技术取得很大进展,但脓毒症的发病率和死亡率仍居高不下。国外流行病学调查显示,脓毒症的病死率已超过急性心肌梗死,每年欧洲和美国死于此病超过35万人,治疗费用高达250亿美元。每年全球有超过1800万严重脓毒症病例,且患者数目每年以1.5%速度递增。正是由于脓毒症的患病率高、病死率高、治疗费用高的特点,2002年,欧美学者在西班牙发表“巴塞罗那宣言”,呼吁动员全社会力量,力争在较短的时间内把脓毒症的发生率和病死率降低到可接受的水平。与此相呼应,一项由欧洲危重病学会（ESICM）、美国危重病学会（SCCM）和国际脓毒症论坛（ISF）发起,并得到了其他7个学术团体和组织响应,以及由Baxter、Lilly、Edwards等公司支持的所谓“拯救脓毒症战役”（surviving sepsis campaign,SSC）被同时启动。国内外大量研究表明,细胞因子在脓毒症的病理生理过程中起决定性的作用,由于感染、烧伤、创伤、手术等打击下,细菌内毒素、外毒素代谢产物等炎症刺激物过度激活巨噬细胞、中性粒细胞等炎症效应细胞,从而导致这些细胞过度释放促炎因子、蛋白消解酶类、氧自由基等炎性介质,损伤细胞并产生瀑布式放大效应,破坏体内炎症平衡,促炎作用超过抑炎作用,加重细胞、组织损伤以及器官功能障碍,表达出脓毒症的症状和体征。近年来,肠屏障功能已成为判断危重病人预后的一个重要指标,肠道不仅是MODS的靶器官,更是MODS的启动者。因此,对肠屏障功能衰竭的防治研究已成为当前医学领域研究的一个重要课题,而重度脓毒症会导致肠粘膜屏障严重受损进一步加重脓毒症的演变。乌司他丁又称尿抑制素（urinastatin）,是从健康成年男性新鲜尿液中分离纯化得到一种广谱的蛋白酶抑制剂（ulinary trypsin inhibitor,UTI）,是人体内源性抑炎物质之一,能很好地抑制蛋白水解酶的活性,减轻促炎因子的释放.减轻炎症反应,稳定溶酶体膜,抑制氧自由基和心肌抑制因子的产生,改善血液循环,保护细胞组织。临床上主要用于治疗急性胰腺炎、慢性胰腺炎急性发作、休克、免疫功能调节和肝、肾移植手术以及体外循环引起缺血再灌注损伤中保护重要器官功能等。动物实验证明乌司他丁能减少脓毒性休克动物的死亡,但目前关于是否能改善肠粘膜中指标的报道甚少。研究目的:通过检测肠粘膜屏障障碍的敏感指标,来评价乌司他丁对脓毒症大鼠肠粘膜的保护作用和安全性。研究方法:SD大鼠80只,采用经典盲肠打孔法做成脓毒症模型,模型成功后6小时开始治疗,随机均分为四组:空白对照组（C组）、氧氟沙星组（O组）、乌司他丁组（U组）和氧氟沙星加乌司他丁组（O+U组）,其中每组又分为24h和48h组。O组给予氧氟沙星8mg/kg,U组给予乌司他丁（广东天普生物化学制药有限公司生产,批号:20061223）15×104u,O+U组则同时给予氧氟沙星8mg/kg和乌司他丁15×104u,一日二次,连续两天,C组给予生理盐水4ml/kg作为对照。在治疗后24小时和48小时取大鼠肠组织检测肠组织中MDA、SOD、DAO,观察肠粘膜的改变和MDA、SOD、DAO的变化情况,在治疗后48h取大鼠肠组织行显微镜观察。研究结果:三组经过治疗的大鼠肠粘膜在显微镜下改变不如C组明显,MDA、SOD、DAO等指标均较对照组明显改善,肠组织MDA在治疗组中均明显降低,降低程度为O<U<O+U,DAO、SOD在治疗组中均明显升高,升高程度为O<U<O+U。对以上所查指标进行比较,O组、U组与C组比较差异有显着性（P<0.05）,O+U组与C组比较差异异常显着（P<0.01）,O+U组与O组、U组比较差异有显着性（P<0.05）,O组与U组之间差异无显着性（P>0.05）。结论:乌司他丁能显着抑制过度的炎性反应,改善大鼠脓毒症的病情,减少氧自由基释放,降低SOD消耗,增加SOD活性,减少MDA的产生,减轻对肠黏膜屏障的损伤,保护肠粘膜的屏障功能,增加肠粘膜中DAO的活性,与抗感染药物合用效果更为明显;本研究还表明乌司他丁安全可靠,是避免及防止MODS和MOF发生、发展的综合治疗的一个重要手段。
二、乌司他丁对严重烧伤小型猪肠黏膜损伤的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、乌司他丁对严重烧伤小型猪肠黏膜损伤的影响（论文提纲范文）
（1）通腑泻肺方治疗脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 脓毒症相关ARDS的概念及认识的变迁 |
| 1.2 ARDS异质性研究 |
| 1.3 脓毒症相关ARDS的主要发病机制 |
| 1.3.1 促炎反应与抗炎反应的平衡失调 |
| 1.3.2 血管内皮损伤和肺泡表面活性物质减少 |
| 1.3.3 凝血功能紊乱 |
| 1.3.4 肠道细菌/细菌内毒素移位 |
| 1.4 中医对脓毒症相关ARDS的理论认知 |
| 1.5 中西医结合治疗脓毒症相关ARDS进展 |
| 1.5.1 脓毒症病因治疗 |
| 1.5.2 机械通气治疗 |
| 1.5.3 新型治疗策略的选择 |
| 1.5.4 中医药及针灸治疗 |
| 第二章 通腑泻肺法对急性呼吸窘迫综合征疗效的系统评价 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 搜索方案和研究选择 |
| 2.2.2 确定研究的特点 |
| 2.2.3 偏倚风险 |
| 2.2.4 统计学分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 通腑泻肺方对脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征患者肺肠功能的影响 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 资料与方法 |
| 3.2.1 研究设计 |
| 3.2.2 病例选择 |
| 3.2.3 研究方法 |
| 3.2.4 观察指标 |
| 3.2.5 统计学方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 一般情况 |
| 3.3.2 动脉血气分析及氧合指数 |
| 3.3.3 肠屏障功能及炎症因子指标 |
| 3.3.4 28d累积死亡率 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠NLRP3炎症小体及细胞因子影响的实验研究 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.1.1 失控的炎症反应继发的肺损伤是脓毒症相关ARDS核心发病机制 |
| 4.1.2 NLRP3炎症小体介导的炎症反应可能与脓毒症炎症风暴相关,进一步加重继发靶器官损伤 |
| 4.1.3 通腑泻肺(TFXF)治疗脓毒症相关ARDS临床疗效显着,可能通过抑制NLRP3的激活,抑制过度的炎症反应,减轻脓毒症相关肺损伤 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 通腑泻肺方对脓毒症大鼠72h生存率的影响 |
| 4.3.2 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠肺组织炎性因子蛋白表达的影响 |
| 4.3.3 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠血清炎性因子蛋白表达的影响 |
| 4.3.4 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠肺组织炎症小体及炎性因子蛋白表达的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录: 中英文缩略语 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）加味四君子颗粒剂对断奶獭兔肠道发育的影响及机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号一览说明表 |
| 第一章 文献综述及立题依据 |
| 1 獭兔肠道发育的研究概况 |
| 1.1 獭兔肠道解剖生理特点 |
| 1.2 断奶獭兔消化道发育规律及特点 |
| 1.3 断奶獭兔腹泻原因 |
| 1.4 断奶獭兔肠道发育的影响因素研究 |
| 2 四君子汤对肠道发育影响的研究概况 |
| 2.1 四君子汤的主要成分及功效 |
| 2.2 四君子汤对肠道的调节作用 |
| 2.3 四君子汤在畜禽生产上的研究应用 |
| 3 立题背景及目的意义 |
| 3.1 立题背景 |
| 3.2 目的意义 |
| 第二章 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠形态的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 试验日粮及饲养管理 |
| 1.3 药材 |
| 1.4 试剂 |
| 1.5 仪器设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 试验设计 |
| 2.2 样品的采集及处理 |
| 2.2.1 小肠长度以及相对重量的测定 |
| 2.2.2 小肠样品组织切片的制作 |
| 2.2.3 组织学测量 |
| 2.3 数据处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠长度重量的影响 |
| 3.2 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔十二指肠形态的影响 |
| 3.3 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔空肠形态的影响 |
| 3.4 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔回肠形态的影响 |
| 4 讨论 |
| 第三章 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠黏膜免疫功能的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 试验日粮及饲养管理 |
| 1.3 药材 |
| 1.4 试剂 |
| 1.5 仪器设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 试验设计 |
| 2.2 样品的采集 |
| 2.3 Elisa法测定小肠组织SIgA含量 |
| 2.3.1 Elisa检测SIgA |
| 2.3.2 数据分析 |
| 2.4 免疫组化法分析SIgA的蛋白表达 |
| 2.4.1 小肠组织切片的制备 |
| 2.4.2 小肠组织切片的免疫组化 |
| 2.4.3 图像采集 |
| 2.4.4 数据分析 |
| 2.5 数据处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠SIgA含量的影响 |
| 3.2 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠SIgA蛋白表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 第四章 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠紧密连接蛋白和葡萄糖转运体基因表达的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 试验日粮及饲养管理 |
| 1.3 药材 |
| 1.4 试剂 |
| 1.5 仪器设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 试验设计 |
| 2.2 样品的采集 |
| 2.3 小肠组织RNA的提取及检测 |
| 2.3.1 RNA的提取 |
| 2.3.2 RNA完整性的检测 |
| 2.3.3 RNA纯度和浓度的检测 |
| 2.4 RNA反转录成c DNA |
| 2.5 Real-Time PCR |
| 2.5.1 引物设计 |
| 2.5.2 RT-PCR扩增反应 |
| 2.5.3 计算方法 |
| 2.6 数据处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠紧密蛋白基因表达的影响 |
| 3.1.1 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠Zo1 基因表达的影响 |
| 3.1.2 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠Claudin1 基因表达的影响 |
| 3.1.3 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠Occludin基因表达的影响 |
| 3.2 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠葡萄糖转运体基因表达的影响 |
| 3.2.1 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠GLUT2 基因表达的影响 |
| 3.2.2 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠SGLT1 基因表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠肠道屏障的影响 |
| 4.2 加味四君子颗粒剂对断奶獭兔小肠葡萄糖吸收功能的影响 |
| 第五章 结论与创新 |
| 1 结论 |
| 2 创新 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 1.十二指肠形态结构切片图 |
| 2.空肠形态结构切片图 |
| 3.回肠形态结构切片图 |
| 4.十二脂肠SIGA蛋白免疫组化图 |
| 5.空肠SIGA蛋白免疫组化图 |
| 6.回肠SIGA蛋白免疫组化图 |
| 作者简历 |
（3）大黄调控mTOR/HIF-1a/VEGF信号通路治疗急性肺损伤的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 1.高效液相色谱法的实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 仪器 |
| 1.1.2 试剂与试药 |
| 1.1.3 方法 |
| 1.2 实验步骤 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.3.1 分离条件的确定 |
| 1.3.2 大黄的图谱 |
| 1.4 结果分析与讨论 |
| 2.体内实验 |
| 2.1 体内实验路线 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 主要设备与仪器 |
| 2.2.3 试剂和药物 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 动物模型建立以及分组 |
| 2.3.2 麻醉取材 |
| 2.3.3 ELISA对支气管肺泡灌洗液中炎性因子的测定 |
| 2.3.4 HE染色观察肺组织病理形态 |
| 2.3.5 统计学处理 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 动物模型各组肺组织病理情况 |
| 2.4.2 肺组织干湿重测定 |
| 2.4.3 支气管肺泡灌洗液炎性因子比较 |
| 2.5 结果分析与讨论 |
| 3.体外实验 |
| 3.1 体外实验技术路线 |
| 3.2 细胞系的培养 |
| 3.2.1 细胞系 |
| 3.2.2 主要试剂和设备 |
| 3.2.3 细胞培养 |
| 3.3 主要溶液的配制 |
| 3.4 MTS细胞毒性测定 |
| 3.4.1 主要试剂,设备 |
| 3.4.2 方法与步骤 |
| 3.5 Western blot测 mTOR、HIF-1a、VEGF蛋白的表达 |
| 3.5.1 主要试剂 |
| 3.5.2 主要溶液的配制 |
| 3.5.3 主要仪器与设备 |
| 3.5.4 Western Blot的细胞总蛋白提取 |
| 3.5.5 BCA法测定细胞蛋白浓度 |
| 3.5.6 SDS-PAGE凝胶配制,电泳,转膜,抗体孵育及显影 |
| 3.6 ELISA对炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平的测定 |
| 3.6.1 主要试剂和材料 |
| 3.6.2 主要仪器与设备 |
| 3.6.3 方法与步骤 |
| 3.7 PCR |
| 3.7.1 RNA抽提 |
| 3.7.2 RT-PCR |
| 3.8 实验结果 |
| 3.8.1 MTT细胞毒性结果 |
| 3.8.2 ELISA测定TNF-α、IL-1β 、IL-6 的含量比较结果 |
| 3.8.3 PCR测定HIF-1a、p70S6K1、4E-BP1、e IF4E表达结果 |
| 3.8.4 Western Blot测定结果 |
| 3.9 结果分析与讨论 |
| 4 讨论 |
| 4.1 从肠论治急性肺损伤 |
| 4.1.1 肺病治肠的理论基础 |
| 4.1.2 大黄治疗急性肺损伤的机制研究 |
| 4.2 现代医学对急性肺损伤的认识 |
| 4.2.1 急性肺损伤的病因与病理生理 |
| 4.2.2 ALI的发病机制 |
| 4.3 mTOR/HIF-1a/VEGF与 ALI的相关性研究 |
| 4.3.1 mTOR与急性肺损伤 |
| 4.3.2 HIF-1a与急性肺损伤 |
| 4.3.3 VEGF与急性肺损伤 |
| 4.4 大黄防治内毒素ALI作用机制 |
| 4.4.1 大黄对内毒素ALI模型大鼠的肺组织病理观察 |
| 4.4.2 大黄对TNF-α、IL-1β、IL-6 含量的影响 |
| 4.4.3 大黄对LPS诱导细胞模型mTOR、HIF-1a、VEGF蛋白表达的影响 |
| 4.4.4 大黄对LPS诱导细胞模型HIF-1a、e IF4E以及p70S6K1 mRNA表达的影响 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 脓毒症肺损伤发病机制研究进展及中医辨证的思考 |
| 参考文献 |
| 发表论文 |
（4）乌司他丁预防重症中暑小鼠早期肠粘膜屏障功能损害的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 中暑流行病学 |
| 2 中暑与全身炎症 |
| 3 肠屏障功能与全身炎症反应 |
| 4 中暑发病与肠屏障功能的相关性研究 |
| 5 乌司他丁研究 |
| 第一部分 中暑小鼠全身炎症反应变化 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 肠粘膜屏障功能损害在重症中暑小鼠早期全身炎症反应中的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 乌司他丁对重症中暑小鼠早期肠粘膜屏障功能损害的保护作用研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（5）乌司他丁对老年重症患者肠屏障功能障碍影响的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 1 肠屏障功能及其损伤机制 |
| 2 肠屏障与多器官功能障碍综合征 |
| 3 乌司他丁的临床应用现状 |
| 1 研究对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 研究方法 |
| 1.3 实验仪器与试剂 |
| 1.4 检测方法 |
| 1.5 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组患者基线资料比较 |
| 2.2 两组患者APACHEⅡ评分与SOFA评分比较 |
| 2.3 两组患者治疗前后PCT水平比较 |
| 2.4 两组患者治疗前后BT水平比较 |
| 2.5 两组患者治疗前后DAO水平比较 |
| 2.6 两组患者治疗前后D-Lac水平比较 |
| 2.7 患者血浆BT,DAO,D-Lac水平与APCHEII评分、SOFA评分、ICU住院时间及炎症水平的相关性 |
| 2.8 两组患者住院时间以及住院28d病死率比较 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩略语 |
| 硕士期间发表论文 |
| 致谢 |
（6）高压电烧伤大鼠血清SOD、MDA的变化及乌司他丁的干预作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述SOD、MDA在烧伤氧化应激损害中的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）乌司他丁与沐舒坦治疗严重烧伤伴吸入性损伤的疗效分析（论文提纲范文）
| 前言 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 治疗方法 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组患者的治疗效果 |
| 2.2 两组患者并发症发生情况及呼吸机使用时间比较 |
| 3 讨论 |
（8）早期应用乌司他丁对严重烧伤的治疗作用（论文提纲范文）
| 1 乌司他丁的理化性质及功能 |
| 2 乌司他丁在严重烧伤中的应用 |
| 3 乌司他丁的治疗作用机理 |
| 3.1 减少炎性介质释放 |
| 3.2 抑制水解酶, 稳定溶酶体膜 |
| 3.3 改善微循环 |
| 3.4 改善血流动力学 |
| 3.5 其它机制 |
（9）乌司他丁对严重烧伤后脏器的保护作用（论文提纲范文）
| 1.乌司他丁生化性质: |
| 2. UTI对休克的治疗作用 |
| 3.UTI对缺血再灌注 (I/R) 损伤器官的保护作用: |
| 4.脓毒症: |
（10）乌司他丁对脓毒症大鼠肠粘膜屏障的影响（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 正文 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 攻读学位期间论文发表情况 |
| 致谢 |
四、乌司他丁对严重烧伤小型猪肠黏膜损伤的影响（论文参考文献）
- [1]通腑泻肺方治疗脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的临床及实验研究[D]. 程璐. 南京中医药大学, 2020(08)
- [2]加味四君子颗粒剂对断奶獭兔肠道发育的影响及机理研究[D]. 李东波. 四川农业大学, 2019(01)
- [3]大黄调控mTOR/HIF-1a/VEGF信号通路治疗急性肺损伤的机制研究[D]. 董伟. 上海中医药大学, 2019(03)
- [4]乌司他丁预防重症中暑小鼠早期肠粘膜屏障功能损害的实验研究[D]. 曹才文. 南方医科大学, 2019(09)
- [5]乌司他丁对老年重症患者肠屏障功能障碍影响的临床研究[D]. 黄超发. 苏州大学, 2018(01)
- [6]高压电烧伤大鼠血清SOD、MDA的变化及乌司他丁的干预作用[D]. 崔源菲. 河北医科大学, 2017(01)
- [7]乌司他丁与沐舒坦治疗严重烧伤伴吸入性损伤的疗效分析[J]. 叶胜捷,张文振,庞淑光,方声教,章锦成,陈如俊,叶鹂柳. 现代生物医学进展, 2014(15)
- [8]早期应用乌司他丁对严重烧伤的治疗作用[J]. 何英,廖毅. 中外医疗, 2014(15)
- [9]乌司他丁对严重烧伤后脏器的保护作用[J]. 胡骁骅,孙永华. 中华损伤与修复杂志(电子版), 2008(05)
- [10]乌司他丁对脓毒症大鼠肠粘膜屏障的影响[D]. 张福清. 福建医科大学, 2008(01)