一、提高母猪繁殖性能的三种主要技术途径（论文文献综述）
李军辉[1]（2021）在《甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对大鼠和猪铁状况的影响》文中提出有研究表明甘氨酸铁（Fe-Gly）和氨基乙酰丙酸（ALA）对改善动物体内铁状况有作用。Fe-Gly作为补铁剂在畜牧业中研究较多,但ALA却在畜牧业中应用较少,尤其是二者搭配使用对动物体内铁状况的改善研究还不够完善。本研究旨在探究饲粮中添加Fe-Gly和ALA是否对母鼠及仔鼠体内铁状况存在协同作用;在此基础上以猪为研究对象,研究Fe-Gly和ALA对母猪及仔猪体内铁状况的影响,为在实际生产中给仔猪补铁提供理论参数。本研究分为以下两部分:1.甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠和仔鼠铁状况的影响试验选取体况一致、健康状况良好的妊娠SD大鼠54只,随机分为6个处理（每个处理9个重复,每个重复1只大鼠）,分别饲喂基础饲粮（Ⅰ组）以及在基础饲粮中添加50 mg/kg ALA（Ⅱ组）、100 mg/kg ALA（Ⅲ组）、100 mg/kg Fe-Gly（Ⅳ组）、100 mg/kg Fe-Gly+50 mg/kg ALA（Ⅴ组）和100 mg/kg Fe-Gly+100 mg/kg ALA（Ⅵ组）的饲粮,直至21天断奶。考察仔鼠生长性能和器官指数、母鼠和仔鼠血液指标、组织器官铁含量以及胎盘和仔鼠肝脏与铁相关基因的表达。结果表明:（1）与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组均显着提高仔鼠初生重（P<0.05）,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组均显着提高仔鼠断奶重和平均日增重（P<0.05）,且饲粮中添加Fe-Gly和ALA对仔鼠初生重、断奶重及平均日增重存在交互作用（P<0.05）。（2）添加Fe-Gly显着提高断奶仔鼠的心脏和脾脏器官指数（P<0.05）,添加100mg/kg ALA组显着提高新生仔鼠心脏器官指数、断奶仔鼠的心脏和脾脏器官指数（P<0.05）。（3）与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组均可以显着提高妊娠期母鼠红细胞（RBC）数量,泌乳期母鼠的RBC数量、血红蛋白（HGB）浓度,新生仔鼠的RBC数量、红细胞压积（HCT）和断奶仔鼠的HGB浓度、HCT（P<0.05）,此外,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组还显着提高断奶仔鼠RBC数量（P<0.05）。添加Fe-Gly显着提高泌乳期母鼠HCT和新生仔鼠HGB浓度（P<0.05）。添加50 mg/kg ALA组显着提高妊娠期母鼠HGB浓度,ALA组显着提高泌乳期母鼠HCT（P<0.05）。饲粮中添加Fe-Gly和ALA对妊娠期母鼠RBC数量,泌乳期母鼠的RBC数量、HGB浓度,新生仔鼠的RBC数量、HCT和断奶仔鼠的RBC数量、HGB浓度、HCT存在交互作用（P<0.05）。（4）添加Fe-Gly显着降低断奶仔鼠总铁结合力（TIBC）（P<0.05）。添加50 mg/kg ALA显着提高妊娠母鼠和断奶仔鼠血清铁（SI）含量（P<0.05）,显着降低断奶仔鼠TIBC（P<0.05）;此外,100 mg/kg ALA组显着提高断奶仔鼠SI含量（P<0.05）。（5）添加ALA可以提高断奶鼠肝脏和母鼠乳汁中铁含量,此外,添加50 mg/kg ALA还显着提高母鼠胎盘、断奶鼠肝脏铁含量（P<0.05）;而添加100 mg/kg ALA显着提高新生鼠中铁贮含量（P<0.05）。（6）与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组均可以提高Fn基因的表达量;而Ⅱ组、Ⅴ组还可以显着降低Tf R1基因的表达量（P<0.05）;Ⅲ组也显着降低DMT1基因的表达量（P<0.05）;此外,饲粮中添加Fe-Gly和ALA对母鼠胎盘中Tf R1、Fn、DMT1基因的表达量存在交互作用（P<0.05）。（7）与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组均可以提高断奶仔鼠Hepcidin基因的表达量;此外,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组均可以显着降低新生仔鼠Fpn1基因的表达量（P<0.05）;Ⅱ组、Ⅵ组显着提高新生仔鼠Hepcidin基因的表达量（P<0.05）;饲粮中添加Fe-Gly和ALA对新生仔鼠Fpn1、Hepcidin基因和断奶仔鼠Hepcidin基因的表达量存在交互作用（P<0.05）。2.甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪铁状况的影响选取体况相近、遗传背景一致的LY妊娠85 d母猪27头,随机分成3个处理（每个处理9个重复,每个重复1头母猪）,即基础饲粮组、基础饲粮+50 mg/kg ALA组、基础饲粮+50 mg/kg ALA+100mg/kg Fe-Gly组。母猪泌乳期与妊娠期饲喂相同饲粮,仔猪28天断奶。考察其对母猪繁殖性能、仔猪生长性能、母猪和仔猪血液指标以及组织器官铁含量的影响。结果表明:（1）与对照组相比,添加50 mg/kg ALA组对仔猪出生窝重,仔猪28天平均体重及平均日增重,新生仔猪和断奶仔猪红细胞（RBC）数目,妊娠母猪和断奶仔猪血红蛋白（HGB）浓度、新生仔猪红细胞压积（HCT）,妊娠母猪及断奶仔猪的血清铁（SI）含量,母猪常乳中的铁含量有显着提高的作用（P<0.05）。与50 mg/kg ALA+100mg/kg FeGly组相比,添加50 mg/kg ALA组可以显着提高仔猪的出生窝重,新生仔猪和断奶仔猪RBC数目,胎盘和常乳中铁含量等（P<0.05）。此外,50 mg/kg ALA组还可以显着降低妊娠母猪、新生仔猪、断奶仔猪的总铁结合力（TIBC）（P<0.05）。（2）与对照组相比,添加50 mg/kg ALA+100 mg/kg Fe-Gly组对仔猪28天平均体重及平均日增重,断奶仔猪RBC数目、新生仔猪和断奶仔猪HGB浓度,断奶仔猪SI含量,母猪的胎盘、初乳及常乳中的铁含量,有显着提高作用（P<0.05）;此外其还可以显着降低妊娠母猪及新生仔猪的TIBC（P<0.05）。综上所述,Fe-Gly和ALA对仔鼠的生长发育有促进作用,且二者间存在明显的协同作用。Fe-Gly和ALA可以影响大鼠和猪血液生理的变化,添加ALA可以提高母鼠胎盘、乳汁及仔鼠组织中的铁含量,进而提高机体的铁状况。Fe-Gly和ALA对母猪的繁殖性能产生影响,添加Fe-Gly和ALA可提高仔猪的生长性能、显着改善仔猪机体铁状况水平。综合各项指标在本研究条件下,在猪上添加50 mg/kg ALA为宜。
徐保阳[2]（2021）在《肠道菌群干预对母猪卵巢和子宫发育的作用及其机制》文中研究指明近年来研究发现:作为宿主第二基因组的肠道微生物具有内分泌器官的功能,提示其可能参与母猪繁殖生理的调控。本研究团队以高繁殖性能的梅山母猪、相对低繁殖性能的长白×大白（长×大）二元母猪和基因敲除小鼠为研究对象,采用（Fecal Microbiota Transplantation,FMT）技术和多组学方法解析肠道菌群参与调控母猪繁殖性能的机制。首先,我们比较了遗传背景一致的高低产仔数梅山母猪的肠道微生物。随后,我们研究了梅山母猪FMT对受体长×大后备母猪子宫和卵巢发育的影响并筛选出关键差异肠道微生物。最后,以广谱抗生素处理过的和基因敲除的小鼠为模型研究关键差异候选菌调控卵泡发育的机制。主要研究结果如下:第一部分遗传背景一致的梅山母猪产仔数与肠道微生物显着相关我们比较了高繁殖力梅山母猪（HMS,产仔数15.9±2.6）与低繁殖力梅山母猪（LMS,产仔数10.7±2.1）的粪样中微生物、雌二醇（estradiol,E2）、孕激素（progesterone,P4）和短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFAs）。主要结果如下:1)HMS肠道微生物的碳水化合物代谢能力强于LMS,而氨基酸和脂类代谢能力则弱于LMS;2)相应地,HMS的粪便SCFAs（包括乙酸、丙酸和丁酸）浓度显着高于LMS;3)高产仔数的梅山母猪粪便中生殖激素P4和E2浓度显着高于低产仔数梅山母猪,且E2、P4和产仔数与肠道微生物（差异物种和多样性指标）显着相关。小结:遗传背景一致的HMS与LMS的肠道微生物不仅差异显着,而且与产仔数及粪便中生殖激素浓度显着相关。第二部分梅山母猪FMT显着改变了受体长×大后备母猪繁殖生理我们采用FMT技术将日龄相近的后备梅山母猪粪菌移植至商品后备长×大母猪肠道内,研究FMT对长×大后备母猪子宫和卵巢发育的影响并筛选出关键差异肠道微生物。梅山（Meishan,MS）后备母猪8头（日龄95±7）作为FMT供体猪。28头长×大后备母猪（日龄90±4）随机分为4个处理组:对照组（control,Ctrl）、灭菌组（sterilized-dose fecal microbiota transplantation,SFMT）、低浓度组（low-dose fecal microbiota transplantatio,LFMT）和高浓度组（high-dose fecal microbiota transplantation,HFMT）,分别饲喂20 m L 0.9%Na Cl溶液、高压灭菌的粪菌悬液、107 CFU/m L粪菌悬液和108 CFU/m L粪菌悬液。隔天饲喂一次,至180日龄为止。屠宰取样后进行如下分析:子宫角和卵巢的组织形态学分析、粪样微生物的16S r DNA扩增子测序分析、血浆和肝脏组织代谢物的非靶向代谢组分析和卵巢组织的i TRAQ定量蛋白质组学分析。结果表明:1)FMT均改变了受体长×大后备母猪肠道微生物区系（LFMT组效果最好）,使它们向FMT供体梅山后备母猪的肠道微生物区系转变;2)LFMT促进了卵泡发育,显着增加了子宫腺的密度;3)LFMT促进了受体长×大后备母猪机体循环中类固醇激素代谢,增强了卵巢类固醇激素的合成小结:FMT可能通过影响受体长×大后备母猪生殖激素的分泌及机体类固醇激素的代谢调控子宫腺和卵泡的发育。第三部分口服繁殖相关差异菌促进了小鼠卵泡发育结合第一部分的HMS与LMS的肠道微生物差异分析和第二部分的FMT试验,我们筛选出4种与母猪繁殖性能相关的关键差异菌包括纤维杆菌（FI）、粘膜乳杆菌（LM）、嗜热双歧杆菌（BT）和瘤胃球菌（RF）。经广谱抗生素处理的21日龄ICR雌性小鼠经口灌服0.2 m L生理盐水（Ctrl）或0.2 m L微生物悬液处理,包括纤维杆菌（Fibrobacter＿intestinalis,FI）、粘膜乳杆菌（Lactobacillus＿mucosae,LM）、嗜热双歧杆菌（Bifidobacterium＿thermophilum,BT）、瘤胃球菌（Ruminococcus＿flavefaciens,RF）和上述混合物4种微生物（Mixture,Mix）。在第三个发情期的末期收集卵巢组织,下丘脑、血浆和肠道粪便进行分析。主要结果如下:1)单种差异菌或MIX可显着增加次级卵泡和有腔卵泡的密度,以及次级卵泡与原始卵泡的比例;但是,只有MIX增加了有腔卵泡相对于次级卵泡的比例;2)差异菌对生殖激素具有调节作用,特别是E2;3)差异菌显着促进了性腺白色脂肪组织（g WAT）发育和瘦素分泌;4)差异菌均显着促进了类固醇激素的合成途径。小结:口服单种或4种繁殖相关差异菌的混合物可能通过增加SCFAs产生促进g WAT发育并分泌瘦素,进而调控生殖激素的分泌,最终促进小鼠卵泡发育。第四部分SCFAs信号通路介导繁殖相关差异菌对小鼠卵泡发育的促进作用本试验旨在进一步探讨肠道菌群代谢产物SCFAs与卵泡发育之间的关系。考虑到SCFAs受体GPR43的激活具有配体偏好和浓度依赖性,我们以4种差异菌混合干预后小鼠盲肠的SCFAs的浓度为基础测试了一系列SCFA的浓度梯度以确定促进小鼠卵泡发育的最优SCFAs浓度。随后,我们使用Gpr43-/-小鼠进一步探究GPR43通路在SCFAs促进小鼠卵泡发育中的作用。主要结果如下:1)SCFAs以浓度依赖方式增加了次级卵泡和有腔卵泡的密度;可能是由于Gpr43基因在g WAT中的表达量显着高于其他脂肪组织,SCFAs选择性的促进了g WAT发育;2)SCFAs同时增加了下丘脑组织中亲吻素1和促性腺激素释放激素浓度;同时,SCFAs激活卵巢瘦素受体,促进了类固醇激素合成通路;3)SCFAs的这些效果在Gpr43-/-小鼠中无法观察到。小结:SCFAs以浓度依赖方式促进小鼠卵泡发育;GPR43介导SCFAs对小鼠卵泡发育的促进作用。综上所述,肠道微生物参与调控母猪的子宫腺和卵泡发育。初情期前,肠道微生物代谢产物SCFAs以浓度依赖的方式通过激活GPR43促进g WAT的脂肪生成和瘦素分泌。机体循环系统中升高的瘦素可通过下丘脑-垂体-性腺轴调控促卵泡激素,促黄体生成素和雌二醇分泌,从而促进卵泡发育。
伍剑[3]（2020）在《纯化膳食纤维对母猪繁殖性能及其和后代肠道微生物区系的影响》文中进行了进一步梳理母猪繁殖性能的高低与养殖场的生产效益紧密相关,提高母猪健康水平,改善母猪繁殖性能具有重要意义。近年来膳食纤维（dietary fiber,DF）对母猪繁殖性能的影响报道较多,但DF对母猪肠道微生物区系的影响及由此带来母猪免疫性能变化的研究较少,DF对母猪肠道微生物区系的调控是否会影响其后代仔猪肠道微生物区系的构建及免疫性能值得研究。本试验采用体外发酵试验技术研究纯化DF的发酵特性,并应用高通量测序和代谢组学研究技术分析肠道微生物和代谢组,研究纯化DF对母猪及仔猪肠道微生物区系和健康的影响,揭示DF、猪和肠道微生物之间的作用机制,并为生产实践DF的应用提供有价值的参考。具体研究内容如下:1.母猪粪便微生物体外发酵纯化膳食纤维的研究以体外发酵技术研究纯化DF的发酵特性,选取4种纯化DF（木质纤维素、纤维素、瓜尔胶、菊粉）,以母猪粪样制作纤维发酵接种物观察发酵特性。结果表明:菊粉和瓜尔胶理论最大产气量相近,并显着高于纤维素和木质纤维素（p<0.01）,木质纤维素理论最大产气量最低;发酵终产物中,菊粉乙酸产量显着高于其它三者（p<0.01）,瓜尔胶和菊粉的丙酸、丁酸和总酸产量均显着高于纤维素和木质纤维素（p<0.01）。2.妊娠期摄入纯化复合膳食纤维对母猪繁殖性能、肠道微生物区系及免疫性能的影响选取68头健康经产母猪（平均胎次3.2±1.4）,配种后按胎次、背膘一致的原则分为对照组（CON）和复合纤维（FM）组,每组34头,每头母猪1个重复,FM组妊娠母猪饲粮在CON基础上添加3%FM。结果表明,妊娠饲粮中添加FM显着提高母猪窝均产活仔数和泌乳期第3周采食量（p<0.05）,并有增加仔猪21 d断奶重和平均窝增重的趋势（p<0.1）。妊娠饲粮中添加FM对母猪血清免疫球蛋白、雌二醇、孕酮、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）水平无显着影响（p>0.05）。与CON组相比,FM组母猪血清中血清素水平在妊娠110 d显着增加（p<0.05）,并在妊娠30 d表现出增加趋势（p<0.1）。同时,FM组母猪血清中IL-10水平在妊娠30 d显着增加（p<0.05）,在妊娠110 d表现出增加趋势（p<0.1）,而30 d血清中干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）水平显着低于CON组（p<0.05）。另外,妊娠饲粮中添加FM显着提高母猪妊娠期30 d粪便中丁酸浓度和110 d丙酸浓度（p<0.05）,并有增加母猪妊娠期30 d粪便中丙酸浓度、妊娠期30 d和110 d粪便中总短链脂肪酸（short chain fatty acids,SCFAs）浓度的趋势（p<0.1）。妊娠饲粮中添加FM对母猪肠道微生物区系有显着影响,FM组母猪妊娠30 d粪便中Roseburia（罗斯氏菌属）和Eubacterium-hallii-group（霍氏真杆菌）相对丰度显着增加,而Spirochaetaceae（螺旋体科）、Spirochaetales（螺旋体目）、Treponema＿2（密螺旋体属＿2）相对丰度显着降低。同时,FM组母猪妊娠110 d粪便中Bacteroidales（拟杆菌目）、Bacteroidetes（拟杆菌门）、Bacteroidia（拟杆菌纲）、Bacteroides（拟杆菌属）、Prevotellaceae（普雷沃氏菌科）、Roseburia和Eubacterium-hallii-group相对丰度显着增加,而Peptostreptococcaceae（消化链球菌科）、Clostridiaceae＿1（梭菌科）、Clostridium sensu stricto＿1（产芽孢梭菌属＿1）相对丰度显着降低。3.母猪妊娠期摄入纯化复合膳食纤维对其后代仔猪肠道微生物组成及免疫性能的影响在试验二中母猪产仔时,从收集粪便的母猪后代仔猪中选取1头接近该窝平均初生重、且没有吃过初乳的初生仔猪,并在仔猪达21 d时选取1头接近该窝平均体重的仔猪,采血后收集脾脏、肠系膜淋巴结、结肠及其内容物测定Toll样受体（toll-like receptors,TLRs）表达量及微生物区系。试验结果表明,与CON组相比,FM组仔猪21 d血清中TNF-a水平显着降低（p<0.05）。妊娠饲粮中添加FM使母猪泌乳期21 d时粪便菌属Roseburia（罗斯氏菌属）相对丰度显着增加,使其后代仔猪21 d结肠微生物中Roseburia（罗斯氏菌属）和Lactobacillus（乳杆菌属）相对丰度显着增加,Odoribacter（臭味菌属）相对丰度显着降低。同时,妊娠饲粮中添加FM对初生仔猪肠系膜淋巴结、脾脏、结肠TLR m RNA表达量均无显着影响（p>0.10）,但显着降低21 d仔猪结肠TLR4和核转录因子κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）m RNA表达量（p<0.05）。4.母猪妊娠期摄入膳食纤维对其后代抵抗应激反应的影响采用2×2双因素试验设计,选取经产母猪（3-6胎）24头,随机分为四组,每组6头,试验组Ⅰ和试验组Ⅱ妊娠母猪饲粮中添加0%FM,后代断奶仔猪分别肌肉注射生理盐水和脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）,试验组Ⅲ和试验组Ⅳ妊娠母猪饲粮中添加3%FM,后代断奶仔猪分别肌肉注射生理盐水和LPS,母猪泌乳期及仔猪采食相同饲粮。结果表明,母猪妊娠期添加FM与LPS攻毒对仔猪平均日增重（average daily gain,ADG）和血清TNF-α存在显着交互作用（p=0.046;p=0.029）,试验组Ⅳ仔猪ADG显着高于试验组Ⅱ（p<0.05）,试验组Ⅳ仔猪血清TNF-a水平显着低于试验组Ⅱ（p<0.05）。5.膳食纤维对断奶仔猪肠道微生物和代谢组的影响选取23 d断奶仔猪12头随机分为对照组（C组）和试验组（F组）,每组6头,单栏饲喂。C组饲喂基础日粮,F组添加1%FM,在试验第14天无菌收集直肠内容物分析肠道微生物和代谢组。结果表明仔猪日粮中添加1%FM可显着降低Proteobacteria（变形杆菌门）、Escherichia-Shigella（埃希-志贺菌属）、Faecalicoccus（多形粪球菌属）等微生物相对丰度,显着增加Mogibacterium（艰难杆菌属）,Methanobrevibacter（甲烷短杆菌属）和Lactobacillus（乳杆菌属）相对丰度。代谢组共检出93个代谢物,其中F组相比C组显着升高9个代谢物,显着降低4个代谢物。差异代谢产物主要富集5-羟色胺（5-HT）途径,天冬氨酸丙氨酸、谷氨酸代谢,色氨酸代谢,酪氨酸代谢,丁酸代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸合成6种通路上。本研究的结论为:妊娠饲粮中添加FM可促进母猪肠道有益微生物的增殖,抑制潜在致病微生物的增殖,有利于母猪肠道健康。FM可提高活产仔数,其机制与FM介导的肠道微生物产生SCFAs的增加有关,其促进妊娠母猪辅助性T细胞（helper T cells,Th）趋于Th2细胞因子的分化,从而提高胚胎存活率。母猪妊娠饲粮中添加FM会影响其后代仔猪肠道微生物区系的构建,并由此对仔猪的免疫性能产生影响。仔猪饲粮中添加FM可影响肠道微生物菌群结构,并改变肠道内容物代谢组学特征,上调5-HT和谷氨酰胺水平、促进丁酸代谢,下调支链脂肪酸和吲哚代谢物水平,代谢组学的变化有利于促进断奶仔猪肠道健康。
徐川辉[4]（2020）在《功能性纤维通过调节肠道微生物改善机体胰岛素敏感性作用的研究》文中研究表明随着生活水平的提高,以肥胖、高血压、高血脂和高血糖为主要特征的代谢综合征已经成为影响人类健康的重大挑战。胰岛素抵抗是引起机体代谢紊乱,诱发代谢综合征的重要病理生理基础。近年来研究揭示,相比正常人,妊娠及肥胖个体的肠道微生物组成发生了显着改变,促进了机体慢性低度炎症、氧化应激及胰岛素抵抗的发生,但具体机制尚未完全阐明。膳食纤维是调控肠道微生物的重要因子,有益于肠道微生态稳定。课题组前期创制的功能性纤维对改善母猪肠道微生物组成,提高母猪的繁殖性能具有重要的作用。但尚未探究日粮中添加功能性纤维对母猪胰岛素敏感性的影响,以及这种影响与母猪繁殖性能的关系。另外,功能性纤维在高脂日粮或正常日粮条件下能否改善肥胖个体的胰岛素敏感性?间歇性禁食作为一种有效的肥胖干预手段,联合功能性纤维补充能否进一步提高肥胖个体的胰岛素敏感性?肠道微生物是否协同变化?也值得深入研究。本研究以妊娠母猪为对象,研究功能性纤维能否通过调节肠道微生物影响宿主代谢,改善机体胰岛素敏感性从而提高繁殖性能;以肥胖小鼠为动物模型,研究功能性纤维在高脂日粮或正常日粮条件下,对肥胖个体减肥、机体胰岛素敏感性及肠道各段微生物组成的影响;探索功能性纤维联合间歇性禁食是否对肥胖个体的代谢调节发挥协同作用。主要研究内容和结果如下:第一部分功能性纤维对母猪繁殖性能及围产期胰岛素敏感性的影响本试验研究了妊娠日粮中添加功能性纤维对母猪繁殖性能、围产期胰岛素敏感性、进程性氧化应激以及肠道微生物的影响。99头经产母猪随机分成三组,分别接受功能性纤维添加量为0%（对照组）、1%（试验1组）以及2%（试验2组）的妊娠日粮,喂料量保持一致,度量母猪繁殖性能。在妊娠第109 d及泌乳第3 d进行餐试验,在妊娠第110 d及泌乳第4 d进行葡萄糖耐受试验（glucose tolerance test,GTT）;采集妊娠第30 d、60 d、90 d、109 d、分娩当天及泌乳第3 d、7 d、21 d晨饲后2 h血浆样品,检测氧化应激指标;采集妊娠第30 d、60 d、109 d及泌乳第3 d粪便样品,检测相关特异性菌群丰度。主要结果如下:1.相比对照组,试验1组和2组母猪繁殖周期的体重及背膘厚度无显着差异（P>0.05）;试验1组和2组母猪总产仔数、产活仔数及仔猪初生窝重无显着差异（P>0.05）,但仔猪初生个体重极显着增加（P<0.01）,弱仔率（<800g,%）极显着降低（P<0.01）。在泌乳期带仔数一致的条件下,相比对照组,试验1组和2组母猪泌乳期采食量、断奶至发情间隔天数无显着差异（P>0.05）,但试验1组仔猪哺乳期平均日增重以及断奶个体重显着增加（P<0.05）,试验2组仔猪生长性能无显着差异（P>0.05）。以上结果说明,妊娠日粮中添加功能性纤维提高了母猪的产仔性能,1%添加比例促进仔猪哺乳期生长。2.相比对照组,试验2组母猪妊娠第109 d及泌乳第3 d餐试验葡萄糖曲线下面积（area under curve,AUC）极显着降低（P<0.01）,妊娠第110 d GTT中葡萄糖AUC显着降低（P<0.05）,表明围产期胰岛素敏感性提高。3.相比对照组,试验1组和2组母猪分娩当天血浆中丙二醛以及妊娠107d血浆中8-羟基脱氧鸟苷水平显着降低（P<0.05）,泌乳第7d血浆中总超氧化物歧化酶水平极显着增加（P<0.01）;试验1组分娩当天仔猪脐带血浆中活性氧水平极显着增加（P<0.01）,表明妊娠日粮中添加功能性纤维缓解了母猪围产期氧化应激。4.相比对照组,试验1组和2组母猪妊娠第109 d粪便中产气荚膜梭菌丰度极显着减少（P<0.01）,试验1组妊娠第60 d、109 d粪便中大肠杆菌数量显着增加（P<0.05）;试验2组妊娠第109 d粪便中乳酸杆菌属丰度最高（P<0.05）,表明功能性纤维添加增加了母猪妊娠中后期肠道中有益微生物丰度而减少有害微生物丰度。第二部分功能性纤维对高脂日粮诱导的肥胖小鼠体重及胰岛素敏感性的影响本试验研究了日粮添加功能性纤维对肥胖小鼠体重、体脂、糖脂代谢、系统性炎症、肠道屏障及肠道微生物组成及代谢的影响。110只4-5周龄C57BL/6雄性小鼠经高脂日粮饲喂10周后获得42只肥胖小鼠,根据体重相近原则选取21只,随机分为3组,分别为高脂日粮饲喂的负对照组、高脂日粮中分别添加功能性纤维4%的试验1组和6%的试验2组;以同批低脂日粮饲喂的7只正常小鼠为正对照组。所有肥胖小鼠接受高脂日粮饲喂12周期（6天/周期）（P1阶段）后转为普通日粮饲喂4周期（P2阶段）;正对照组小鼠P1阶段饲喂低脂日粮,P2阶段饲喂普通日粮。每周期记录每只小鼠体重,每日记录采食量。在P2阶段第2周期,采集餐后2 h血清,分析饱感激素肽YY（peptide yy,PYY）、胰岛血糖素样肽1（glucagon-like peptide 1,GLP-1）浓度。在P1阶段第12周期和P2阶段第4周期,采集空腹血清,分析所有样品中血脂组成和P2阶段血清中炎性因子水平。采血两天后进行GTT及胰岛素耐受试验（insulin tolerance test,ITT）。收集P1及P2阶段末期的粪便样品,利用16S rRNA测序技术分析各样品微生物组成情况,利用气相色谱法测定短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFAs）浓度。试验结束时处死小鼠,H&E染色观察结肠及附睾白色脂肪组织形态学变化,Brd U染色观察结肠细胞更新情况,油红O染色度量肝脂含量;RT-PCR度量结肠紧密连接蛋白基因m RNA的表达。主要结果如下:1.在P1阶段,试验1组和2组小鼠的体重及能量摄入量与负对照组无显着差异（P>0.05）,极显着高于正对照组（P<0.01）;在P2阶段,试验1组和2组的体重及能量摄入量极显着低于负对照组,仍高于正对照组（P<0.01）,且小鼠餐后血清中PYY、GLP-1浓度极显着高于负对照组（P<0.01）。试验结束时,试验1组和2组小鼠Lee’s指数、各皮下及内脏白色脂肪垫重量、附睾白色脂肪细胞面积、肝脂含量等肥胖相关指标显着低于负对照组（P<0.05）,与正对照组无显着差异（P>0.05）。上述结果表明,功能性纤维在普通日粮中添加提高了肥胖小鼠餐后饱感激素水平,减少能量摄入,促进体重降低,而在高脂日粮中添加无此效果。2.在P1阶段,各组间血清甘油三酯、游离脂肪酸、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇无显着差异（P>0.05）。在P2阶段,试验1组和2组LDL-C浓度显着低于负对照组（P<0.05）,与正对照组无显着差异（P>0.05）;而高密度脂蛋白胆固醇浓度极显着高于正、负对照组（P<0.01）。在P1阶段,试验2组ITT葡萄糖AUC显着低于负对照组（P<0.05）,与正对照组无显着差异（P>0.05）;试验1组与正对照组和负对照组无显着差异（P>0.05）。P2阶段,试验1组和2组空腹6 h血糖水平、ITT葡萄糖AUC均显着低于正对照组和负对照组（P<0.05）。上述结果表明,6%功能性纤维在高脂和普通日粮中添加均能提高肥胖小鼠胰岛素敏感性,在普通日粮中添加改善脂代谢。3.试验1组和2组结肠粘膜层厚度极显着高于负对照组（P<0.01）,但与正对照组无显着差异（P>0.05）;试验2组隐窝深度极显着高于正对照组和负对照组（P<0.05）。试验1组和2组结肠孔通道形成蛋白Claudin-2基因m RNA表达量显着低于负对照组（P<0.05）,而与正对照组无显着差异（P>0.05）;试验2组紧密连接蛋白ZO-1基因m RNA表达量（P<0.05）及结肠Brd U阳性染色细胞数量（P<0.05）显着高于负对照组,而与正对照组无显着差异（P>0.05）。系统性炎症指标检测发现,试验1组和2组血清中脂联素浓度极显着高于正对照组和负对照组（P<0.01）,瘦素浓度极显着低于负对照组（P<0.01）,与正对照组无显着差异（P>0.05）;试验2组血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及脂多糖浓度极显着低于负对照组（P<0.01）,极显着高于正对照组（P<0.01）。上述结果表明,6%的功能性纤维改善了肥胖小鼠的肠道屏障功能,缓解了系统性炎症。4.粪便SCFAs测定结果显示,在P1阶段,试验1组粪便中丁酸、异丁酸、异戊酸含量（P<0.05）以及试验2组粪便中丙酸、丁酸、戊酸、异丁酸、异戊酸含量均显着低于负对照组（P<0.05）,与正对照组无显着差异（P>0.05）。在P2阶段,试验1组粪便中各SCFAs与正对照组和负对照组无显着差异（P>0.05）,试验2组粪便中乙酸、丙酸和总SCFAs的含量显着高于正对照组和负对照组（P<0.05）。5.在P1及P2阶段,负对照组粪便中总微生物数量及α多样性与正对照组无显着差异（P>0.05）,但厚壁菌门/拟杆菌门（F/B）比值显着高于正对照组（P<0.05）,Ruminococcus、Dorea及Oscillospira等产SCFAs菌显着高于正对照组（P<0.05）,共生有益菌Allobaculum及S24-7显着低于正对照组（P<0.05）。在P1阶段,试验2组粪便总微生物数量及α多样性与负对照组无显着差异（P>0.05）,F/B比值显着低于负对照组（P<0.05）;在P2阶段,试验2组总微生物数量显着高于负对照组（P<0.05）,Allobaculum及S24-7（与体重和胰岛素抵抗显着负相关）显着高于负对照组（P<0.05）,而粘液消耗菌Ruminococcus（瘤胃球菌属）、Oscillospira（颤螺菌属）、Dehalobacterium（低嗜盐菌属）、Strptococcus（链球菌属）、Desulfovibrio（脱硫弧菌属）等（与体重和胰岛素抵抗显着正相关）显着低于负对照组（P<0.05）。上述结果说明,6%功能性纤维改变肥胖小鼠粪便微生物组成。第三部分功能性纤维对高脂日粮诱导的肥胖小鼠不同肠段微生物组成变化的影响试验结束时,采集第二部分试验小鼠十二指肠、回肠、盲肠及结肠内容物样品及粪便样品,利用16S rRNA测序技术分析各肠段样品中微生物组成情况。主要结果如下:1.所有试验小鼠的后肠段（盲肠、结肠）及粪便微生物组成中门和属的分类数减少,观测OTU数、Chao1指数显着高于前肠段（十二指肠、回肠）（P<0.01）,β多样性在前肠段和后肠断间具有显着差异（P<0.01）;厚壁菌门、变形菌门分别在回肠及盲肠段相对丰度最高（P<0.01）,拟杆菌门在盲肠段相对丰度最低（P<0.01）。2.主坐标分析（principal coordinate analysis,PCo A）结果显示,正对照组中十二指肠与回肠间微生物组成无显着差异（P>0.05）,回肠、盲肠、结肠及粪便之间微生物组成差异显着（P<0.01）,个体间微生物组成在回肠段差异最大、在结肠段最相似;负对照组中十二指肠、回肠及盲肠间微生物组成差异显着（P<0.01）。相邻肠段差异菌属分析显示,负对照组回肠中Parabacteroides（副拟杆菌）、Lactobacillus（乳杆菌属）、Faecalibacterium等有益菌显着低于十二指肠（P<0.05）;盲肠中Staphylococcus（葡萄球菌属）、Streptococcus（链球菌属）、Ochrobactrum（苍白杆菌属）、Serratia（沙雷氏菌属）等有害菌显着低于回肠（P<0.05）。相比正对照组,负对照组各肠段微生物α多样性无显着差异（P>0.05）,十二指肠、回肠、结肠及粪便微生物β多样性显着差异（P<0.05）,粪便中变形菌门相对丰度显着增加（P<0.05）。以上结果说明,高脂日粮引起前肠段微生物组成显着变化。4.试验2组的PCo A分析结果显示,前肠段和后肠段微生物结构差异显着（P<0.05）。相邻肠段差异菌属分析发现,盲肠中Mucispirillum、Prevotella（普氏菌属）、Bacteroides（拟杆菌属）、Allobaculum等多种碳水化合物代谢相关菌丰度显着高于回肠（P<0.05）,结肠中Coprococcus（粪球菌属）、Oscillospira（颤螺菌属）、Ruminococcus（瘤胃球菌属）等厚壁菌门碳水化合物代谢相关菌以及有害菌Desulfovibrio（脱硫弧菌属）显着低于盲肠（P<0.05）。试验2组全肠段α多样性与负对照组无显着差异（P>0.05）,微生物β多样性在盲肠、结肠及粪便与负对照组具有显着差异（P<0.05）,结肠及粪便中厚壁菌门显着低于负对照组（P<0.05）,粪便中放线菌门显着高于负对照组（P<0.05）。以上结果说明,6%功能性纤维从盲肠开始促进后肠段微生物组成变化,选择性富集纤维酵解菌。第四部分功能性纤维联合间歇性禁食对高脂日粮诱导肥胖小鼠胰岛素敏感性的影响在第二部分试验中获得的42只肥胖小鼠中,根据体重相近原则挑选21只肥胖小鼠随机分为3组:分别为高脂日粮隔天禁食组（对照组2）、隔天禁食+高脂日粮添加4%功能性纤维组（试验1组）以及隔天禁食+高脂日粮添加6%功能性纤维组（试验2组）。以第二部分试验负对照组为高脂日粮自由采食组（对照组1）。所有小鼠接受高脂日粮饲喂12周期（6天/周期）（P1阶段）后转为普通日粮饲喂4周期（P2阶段）,探究隔天禁食+功能性纤维组合模式对肥胖小鼠体重、体脂、糖脂代谢、肠道屏障、粪便SCFAs及微生物组成的影响。主要结果如下:1.隔天禁食组（对照组2、试验1组和2组）小鼠在P1及P2阶段的能量摄入量及体重,以及试验结束时小鼠Lee’s指数、各皮下及内脏白色脂肪垫重量、附睾白色脂肪细胞面积及肝脂含量等肥胖相关指标均极显着低于自由采食组（对照组1）（P<0.05）。相比对照组2,在P1阶段,试验1组和2组的能量摄入量及体重无显着差异（P>0.05）,但在P2阶段试验2组极显着降低（P<0.01）。相比对照组2,试验2组小鼠P2阶段餐后血液中PYY浓度显着增加（P<0.05）,进食当天采食量显着降低（P<0.05）。上述结果说明,隔天禁食显着减少肥胖小鼠能量摄入量,降低肥胖;6%功能性纤维在普通日粮中添加协同增强隔天禁食小鼠的摄食饱感,进一步减少能量摄入和体重,而高脂日粮中添加无此效果。2.P1阶段,试验1组和2组小鼠血清中甘油三酯、LDL-C浓度极显着低于对照组1（P<0.01）,与对照组2无显着差异（P>0.05）;P2阶段,试验1组和2组小鼠血清中LDL-C浓度显着低于对照组1（P<0.01）,与对照组2无显着差异（P>0.05）。P1阶段,试验1组ITT葡萄糖AUC极显着低于对照组1（P<0.01）,与对照组2无显着差异（P>0.05）,试验2组极显着低于对照组1和对照组2（P<0.01）;P2阶段,试验1组和2组ITT葡萄糖AUC极显着低于对照组1和对照组2（P<0.01）。上述结果表明,隔天禁食促进脂质代谢,提高胰岛素敏感性,在高脂及普通日粮中添加6%功能性纤维进一步增强了隔天禁食小鼠的胰岛素敏感性。3.结肠组织形态学测定结果显示,各组间结肠粘膜层厚度、隐窝深度、紧密连接相关蛋白基因m RNA表达量无显着差异（P>0.05）,但对照组2、试验1组和试验2组结肠Brd U阳性染色细胞的数量极显着高于对照组1（P<0.01）,且试验2组极显着高于对照组2（P<0.01）,表明隔天禁食促进肠道细胞更新,6%功能性纤维加强了这一作用。4.相比对照组1,对照组2和试验1组附睾白色脂肪组织产热相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活剂1-α（Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,Pgc1α）m RNA表达量显着增加（P<0.05）,试验2组Pgc1α及II型碘甲状腺原氨酸脱碘酶（Type II iodothyronine deiodinase,Dio2）m RNA表达量显着增加（P<0.05）;相比对照组2,试验2组Dio2的m RNA表达量显着增加（P<0.05）,这表明隔天禁食与功能性纤维在脂肪细胞产热中可能发挥重要的促进作用。5.SCFAs测定结果显示,在P1阶段,对照组2粪便中乙酸、丙酸、丁酸、戊酸及异戊酸及总SCFAs浓度极显着低于对照组1（P<0.01）,试验1组和2组各SCFA浓度与对照组2无显着差异（P>0.05）;在P2阶段对照组2各SCFA浓度与对照组1无显着差异（P>0.05）,试验1组粪便中乙酸浓度以及试验2组粪便中乙酸、丁酸及总SCFAs浓度显着高于对照组2（P<0.05）。以上结果表明,隔天禁食降低了高脂日粮饲喂阶段肥胖小鼠肠道中SCFAs的生产;功能性纤维补充增加了普通日粮饲喂阶段肠道中SCFAs的生产。6.在P1及P2阶段,与对照组1相比,对照组2粪便总微生物数量及α多样性无显着差异（P>0.05）,但β多样性具有显着差异（P<0.05）;在P1阶段有益菌Lactobacillus（乳杆菌属）及S24-7科显着高于对照组1（P<0.05）,在P2阶段Lactobacillus（乳杆菌属）、Paraprevotella（帕拉普氏菌属）等益生菌显着高于对照组1（P<0.05）,而葡萄球菌属、螺杆菌属、脱硫弧菌属等潜在有害菌显着低于对照组1（P<0.05）。试验2组P1及P2阶段粪便总微生物数量与对照组2无显着差异（P>0.05）,但是P2阶段的微生物α多样性极显着高于对照组2（P<0.01）,F/B比值极显着低于对照组2（P<0.01）。试验2组的S24-7、Lactobacillus、Bifidobacterium（双歧杆菌属）显着高于对照组1（P<0.05）,与对照组2无显着差异（P>0.05）。相关性分析表明,S24-7、Lactobacillus、Bifidobacterium与小鼠肥胖及胰岛素抵抗显着负相关（P<0.05）。上述结果表明,功能性纤维联合隔天禁食禁食可能通过协同促进肠道中有益菌富集,提高胰岛素敏感性。综上所述,本研究的主要结论如下:（1）功能性纤维通过提高围产期母猪胰岛素敏感性,改善繁殖性能;在高脂日粮及普通日粮下均能提高肥胖小鼠胰岛素敏感性,但在高脂日粮下无减肥效果。（2）功能性纤维从盲肠段开始选择性富集肠道中纤维代谢相关菌,改善肠道屏障功能,缓解LPS驱动的系统性炎症。（3）隔天禁食联合功能性纤维减少肥胖小鼠能量摄入量,降低肥胖,促进肠道中益菌Lactobacillus、Bifidobacterium、S24-7富集,改善机体胰岛素敏感性。
张琰芳[5]（2020）在《母猪繁殖性状相关候选基因多态性及其与产仔数和乳头数的关联分析》文中指出母猪繁殖性状是低遗传力的数量性状,用传统育种方法选育其进展缓慢。分子遗传标记辅助选择与常规育种相结合能够有效提高繁殖性状的选择准确性,因此筛选与母猪繁殖性状相关的分子遗传标记具有重要意义。本研究以485头大白猪和290头巴马香猪为研究对象,对13个与繁殖性状相关的候选基因（ESR1、DPPA5、EPOR、LEPR、FUT1、VEGFA、OPN、PTGS2、RBP4、LIF、IGFBP2、PRLR、IGFBP1）进行SNP位点检测,分析各个SNP位点群体遗传信息及其与产仔数和乳头数的关联。主要研究结果如下:1.大白猪的平均窝产仔数（13.59±3.15头）极显着高于巴马香猪平均窝产仔数（9.60±2.00头）（P<0.001）。2.先利用样品DNA混合池PCR及测序分析,在13个候选基因中共筛选到50个SNP位点;再用多重PCR及二代测序技术在两个品种中进行个体基因分型,在13个基因中共检测出68个SNP位点。在巴马香猪中发现64个SNP位点,包括35个低度多态和29个中度多态的SNP;其中,58个SNP处于Hardy-Weinberg平衡状态,其余6个位点处于不平衡状态。在大白猪中检测出36个SNP位点,包括10个低度多态和26个中度多态的SNP;其中,29个SNP位点处于Hardy-Weinberg平衡状态,其余7个位点处于不平衡状态。3.SNP位点与产仔数和乳头数性状进行关联分析的结果显示:（1）ESR1基因rs14295786A>C位点与巴马香猪第二、四、六和六胎总平均产仔数存在显着关联（P<0.05）,AA型比CC型窝产仔数多0.860头。大白猪ESR1基因SNP位点与窝产仔数无显着关联（P>0.05）。（2）DPPA5基因在巴马香猪和大白猪中分别存在5个和3个SNP,其中,仅g:52987170C>A位点与巴马香猪第三、四、五、六胎和六胎总平均产仔数存在显着关联（P<0.05）。（3）EPOR基因在巴马香猪和大白猪中分别存在8个和5个SNP,与六胎总平均产仔数具有显着关联（P<0.05）。（4）巴马香猪LEPR基因存在的3个SNP位点中有2个与六胎总平均产仔数存在显着关联（P<0.05）,突变纯合子在各胎次中的产仔数均有下降趋势。而在大白猪中,该基因的SNP位点与产仔数无显着关联（P>0.05）。（5）巴马香猪和大白猪VEGFA基因均检测到8个SNP,其中巴马香猪大部分SNP位点与各胎次及六胎总平均产仔数均存在显着关联（P<0.05）,大白猪4个SNP位点与六胎总平均产仔数存在显着关联（P<0.05）。（6）巴马香猪和大白猪OPN基因分别检测到3和2个SNP位点,巴马香猪的3个SNP位点突变纯合子窝产仔数较低,其中2个SNP位点突变纯合子的六胎总平均产仔数显着降低（P<0.05）;大白猪的2个SNP位点没有检测到突变纯合子,各个胎次的杂合子窝产仔数有比野生纯合子降低的趋势。（7）PTGS2基因rs81219156C>T位点与大白猪六胎总平均产仔数存在显着关联（P<0.05）;在巴马香猪中rs81219156C>T位点,TT型比CC型乳头数增加0.23个（P<0.05）。（8）巴马香猪及大白猪RBP4基因SNP位点与窝产仔数关联不显着（P>0.05）,但是巴马香猪rs702101190C>A位点和rs55618789C>T位点与乳头数显着关联（P<0.05）。（9）巴马香猪IGFBP2基因rs1112268627T>C位点与第三、四、六胎和六胎总平均产仔数存在显着关联（P<0.05）;T基因是有利等位基因,但是大白猪中它是不利等位基因。（10）大白猪IGFBP1基因检测到4个SNP位点,形成一个连锁模块,该连锁模块与大白猪窝产仔数有一定的关联,突变纯合子产仔数较高,其中第五胎突变纯合子产仔数比野生纯合子增加了2.32头（P<0.05）。4、连锁不平衡与单倍型分析发现:这些SNP在巴马香猪群体中存在9种单倍型（H1-H9）,其中H1、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H9单倍型与产仔数性状显着关联（P<0.05）,H6与乳头数性状显着关联（P<0.05）;在大白猪群体中存在6种单倍型（H1-H6）,其中H2、H3、H4单倍型与产仔数性状关联差异显着（P<0.05）。
徐忠[6]（2020）在《基于基因组信息对金华猪种质特性及其保护、利用的研究》文中研究说明金华猪是我国猪种资源宝库中的佼佼者,因其肉质优良、肉味鲜美,深受人们喜爱,特别是以其后腿作为原料加工制作的金华火腿,堪称世界一绝。在生产实践中,金华猪相比于西方引进猪种更容易感染猪气喘病,严重影响其生产效率。而目前对金华猪的这些特性的遗传基础及形成机制尚不清楚。在保种过程中,金华猪的保种效果不能有效评估,缺乏从分子水平上的评估方法。此外,在金华猪的杂交利用中,缺乏有效的杂种优势预测理论及配合力测定进行指导。为此,本研究的主要目的是利用全基因组信息对金华猪进行种质特性和保护、利用研究,开展以下工作:（1）首先对金华猪进行简化基因组测序,并与其它群体一起进行全基因组单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）检测;（2）对金华猪在遗传资源分类中的地位进行深入了解;（3）从基因组结构、功能特性和信号选择分析等对其分子种质特性进行挖掘;（4）对金华猪气喘病易感性的分子机制进行生物信息学挖掘和全基因组关联分析;（5）利用传统系谱和全基因组分子标记对其保种效果进行分析和评估;（6）最后利用杂种优势预测及配合力测定试验找出最优杂交利用的组合模式。具体研究内容和结果如下:（1）基因组测序与遗传变异检测:本研究首先对金华猪国家级保种场在群的202头金华猪采集了耳组织样,利用基于基因组简化与测序的基因型分型（genotyping by genome reducing and sequencing,GGRS）平台对其进行了建库实验和测序。结果共得到12.5亿条高质量Reads数,每个个体平均测序深度为6.13,平均覆盖度为3.3%。进一步结合实验室前期数据,对金华猪与江、浙、沪等中国地方品种和西方品种共19个品种914头猪进行了遗传变异检测。最终共得到114687个高质量的SNPs位点,这些位点在染色体上分布较均匀,说明测序结果较理想。特别是与现有猪的SNP数据库进行对比分析,其中有16 656个为本次新发现的SNPs多态标记,大大丰富了我国地方猪品种及西方引进品种的分子遗传标记数据库。（2）金华猪在遗传资源分类中的地位:本研究在分子层面对金华猪与其它群体间遗传距离、遗传分化和遗传结构进行了分析。从聚类分析和PCA分析可以看出金华猪所有个体聚在一起,而与其它群体较独立,有着独特的遗传结构;从ADMIXTURE的群体结构来看,金华猪群体最早独立出来,说明金华猪起源相对较早,具有着较为古老的祖先血统;从遗传距离、遗传分化和PCA结果上也可以看,相比于西方商业品种猪,金华猪与中国地方品种猪有着更近的遗传背景;由Treemix分析也可以看金华猪有向兰溪花猪迁移事件,可能是因为两者地理距离较近,有基因交流的可能性也更大。这些结果表明金华猪在遗传资源分类中具有独特的地位,为其作为独立品种提供了分子依据。（3）金华猪基因组结构和功能特性:基因组结构的不同是动物表型差异的遗传基础。我们对SNPs在基因组的分布、单倍型块和连续纯合性片段（runs of homozygosity,ROH）等基因组结构进行分析。在本研究总共检测到114 687个SNPs遗传变异中85 287（74.4%）在金华猪中存在多态,说明金华猪的遗传多样性相对较高。特别是有29 400（25.6%）个位点在其它群体表现多态但在金华猪群体中表现纯合,这些点所在基因主要参与色素沉积（GO:0043473～pigmentation）、对刺激反应的调节（GO:0048585～negative regulation of response to stimulus）和气喘病（hsa05310～Asthma）等,这些说明金华猪群体内一些与色素沉积、对刺激的反应和气喘病相关的基因位点已经发生纯合。我们发现了249个金华猪品种特异的SNPs,这些SNPs可以作为品种鉴定的候选位点。金华猪单倍型块在基因组分布并不均匀,在6号染色体的单倍型区块最多（862个）,覆盖区域最长（33101 Kb）,占相应染色体总长度的比例最大（19.38%）。金华猪中最长的单倍型块位于7号染色体57 101 799～57 601 268的位置上,位于其中的基因与免疫、肌内脂肪含量和繁殖相关。金华猪基因组中ROH分布也不均匀,短的ROH片段多位于染色体的两端。在所有金华猪中出现频率最高的位点是Chr3:37449853,距离此位点最近的基因是SEC14L5,此基因与脂质转运与代谢相关。这些结果为进一步深入揭示金华猪种质特性的遗传机制提供参考。（4）金华猪选择信号分析:金华猪之所以形成如此独特的表型特征,是长期的自然选择和人工选择造成的,而这些选择信号可能是造成金华猪种质特性的原因。本研究通过基于金华猪群体内的（REHH、i HS和CLR三种方法）和金华猪与其它群体间的（基于PLS和XPEHH）信号选择方法,对金华猪基因组上的受选择区域进行了分析。金华猪群体内选择信号分析共找到62个候选基因,与肉质、繁殖、生长和免疫等相关（如PIK3R6、NOS2、ZNF423、IL21R）。而这些性状相关的候选基因为后续的功能基因验证提供了一定的指导意义。在金华猪与其它猪群体间的信号选择方法中,我们还找到了:与毛色性状相关的基因如MYO7A、EDNRB和KIT等;与骨组织生长相关的基因如PBX1、GSG1L和PAPPA2等;与肺部疾病相关的通路如气喘病通路（hsa05310～Asthma）和肺结核（hsa05152～Tuberculosis）等。这些可能与金华猪独特的两头乌毛色、皮薄骨细和易感气喘病等性状有关,值得深入研究。这些结果使我们对中国地方猪的基因组进化和选择机制有了更深入的了解。（5）金华猪气喘病相关研究:我们同时利用基因组到表型（选择信号分析方法）和表型到基因组（全基因组关联分析）研究分析金华猪气喘病的遗传机制,并进一步基于表达谱实验数据进行核实验证。选择信号分析方法是通过比较三个对气喘病易感的猪种（金华猪53头、二花脸猪31头、梅山猪80头）和两个相对不易感气喘病猪种（杜洛克猪48头、长白猪37头）的基因组,挖掘猪支原体肺炎（mycoplasmal pneumonia of swine,MPS）候选基因,结果找到了CYP1A1、TLR2和CXCL2等14个相关候选基因;同时对171头金华猪的基因型数据和连续100天的气喘病表型记录,利用全基因组关联分析（genome-wide association study,GWAS）找到KIAA1644、MAGI3、PGM1和ALK四个候选基因。这两种方法找到的18个候选基因中有2个（CYP1A1和TLR2）是前人研究已证实的,16个是本次研究新发现的。其中有4个基因（EPAS1,CXCL2,TLR2和IL7R）我们通过猪气喘病转录组的数据分析进一步进行了核实验证。这些MPS易感性位点可能是在对繁殖力和肉质等优良经济性状的选择过程中,由于多效性和搭便车效应从而导致受选择,在随后的选种中需要更加注意。本研究初步揭示了金华猪易感MPS的遗传机制,为后续金华猪抗MPS的基因组保护和和基因组选择方案提供指导作用。同时这些研究可能对人类呼吸系统疾病的研究起一定的参考作用。（6）金华猪保种效果分析:利用12 560个个体的系谱信息和6 018条繁殖记录对金华猪的保种效果进行纵向比较,发现在2009～2017年间,金华猪的近交系数稳定在较低（0.009左右）的水平,繁殖性能（总产仔数、活产仔数和出生窝重）的个体估计育种值（estimated breeding value,EBV）均呈现增加趋势,分别提升2.0头、1.9头和0.85kg,说明了近几年的总体保种效果较好。但利用传统系谱信息和分子遗传标记信息深入分析显示仍存在一些问题,需要进一步优化保种策略。其一,对本研究采样时的在群金华猪群体的近交系数、亲缘系数和血统结构进行了分析。分析结果表明金华猪个体平均近交系数和个体间亲缘系数总体虽较低,但也有极个别间较大,达到0.5以上,且金华猪每个血统个体数并不是很均匀,在以后的保种过程中群体结构有待优化。其二,系谱和分子计算的金华猪群体有效含量分别为63和88头,根据畜禽遗传资源受威胁程度的分类可知,金华猪可能仍处于受威胁状态,表明仍需进一步适当扩大保种群体规模,特别是基于分子标记指导选种、选配,逐步提高群体有效含量。其三,我们利用其它地方品种及西方品种等19个群体的分子遗传多样性指标,对金华猪的保种效果进行了横向比较,发现金华猪遗传多样性较高,但近交程度（基于分子的）在这些群体中处于中等水平,提示我们在今后保种过程中尽量避免近交,优化配种策略。本研究为金华猪今后的保种工作提供了参考价值。（7）金华猪的杂交利用:本研究基于全基因组遗传标记筛选金华猪候选杂交组合,并结合繁殖、育肥和屠宰等配合力测定试验确定了最优的杂交组合模式。首先利用全基因组性状特异（繁殖、健康、生长和胴体与肉质）的SNP对金华猪与三个西方引进品种杜洛克（DD）、大白猪（YY）和长白猪（LL）共180头猪的各种杂交组合进行了杂种优势的预测,结果显示在二元、三元和双杂交组合中最优选择为D×J、J×LY和DJ×LY。随后我们挑选了合适组合进行配合力测定试验,其中繁殖性能测定共88窝,育肥测定试验共91头,屠宰测定试验共83头。最终确定了DJ×LY为最佳的杂交组合模式。研究为金华猪的杂交利用提供了一套切实可行的方案。综上,本论文对金华猪种质特性的遗传基础及其形成机制进行了探究,进而为该遗传资源的保护、选育、利用奠定基础。这在非洲猪瘟流行的背景下,对我国地方猪遗传资源的保护和利用具有特殊意义。有关结果也为研究人类复杂性状的遗传机制提供了依据,对人类哮喘病等呼吸系统疾病的研究具有参考作用。
李扬[7]（2019）在《纤维营养对妊娠母猪繁殖性能和肠道菌群的影响》文中研究指明日粮纤维是改善母猪肠道健康和繁殖性能的重要营养素。课题组前期研究表明,母猪妊娠期一个或两个繁殖周期采用纤维处理,可改善母猪繁殖成绩。但仍有研究发现,妊娠期添加纤维对母猪繁殖性能无显着影响。造成结果不一致的原因可能有以下3点:（1）纤维添加水平。饲粮中纤维添加量过高会降低饲粮的养分消化率,添加过低则效果不显着,因此妊娠期纤维添加水平对母猪繁殖性能的影响还需要进一步研究。（2）纤维添加时间。研究证实,妊娠期添加纤维,连续处理两胎及以上,可显着改善母猪繁殖性能,如提高产仔数和初生窝重,但是连续多胎妊娠期添加纤维改善母猪繁殖性能的机理目前尚不清楚。（3）纤维添加类型。不同纤维原料的不可溶性纤维（ISF）和可溶性纤维（SF）的含量不同,导致饲粮中的ISF/SF比例存在巨大的差异。研究表明,饲粮中的ISF/SF比例可影响养分的消化利用率,这可能是纤维影响母猪繁殖性能的重要因素之一。然而,妊娠期ISF/SF比例对母猪繁殖性能的影响目前报道较少。纤维水平和类型均会影响肠道菌群的组成和多样性,而妊娠期添加纤维改善母猪繁殖性能机理是否与微生物有关,需要进行探究。因此,本论文旨在考察妊娠期添加纤维及ISF/SF比例对母猪连续多胎繁殖性能的影响,并从肠道菌群角度探讨纤维营养改善母猪繁殖性能的可能途径。本论文主要研究内容及结果如下:试验一妊娠期日粮添加纤维对母猪连续三胎繁殖性能和粪便菌群的影响试验选取体重（132.34±1.22 kg）、背膘（14.33±0.48 mm）和日龄（232±1 d）相近的新加系LY后备母猪36头。配种后随机分为低纤维组（LF）和高纤维组（HF）,每个处理18个重复,每个重复1头母猪。LF组日粮为典型的玉米-豆粕型饲粮,HF组日粮是在LF组日粮中额外添加22.60 g/kg菊粉和181.60 g/kg纤维素进行配制,并保证两个处理日粮中ISF/SF比例一致（ISF/SF=8.03）。试验进行连续的三个繁殖周期,LF组母猪前三胎妊娠1-89天平均每天摄入224.96 g膳食纤维（DF）、妊娠90-112天平均每天摄入265.80 g DF;HF组母猪前三胎妊娠1-89天平均每天摄入674.89 g DF、90-112天平均每天摄入797.40 g DF。同时,所有母猪在泌乳期饲喂同一泌乳饲粮。各胎次配种当天、妊娠110天、分娩当天和断奶当天对所有母猪进行称重并测定背膘厚,记录母猪连续三个胎次的产仔性能、哺乳性能和泌乳期采食量。记录第一胎分娩前后5天以及第二、三胎妊娠30、60、90和110天粪便形态并评分。第一胎妊娠30、60、90、110天和断奶当天以及第二胎妊娠30、60、90和110天采集母猪粪便样品,用于16S r DNA的测定。试验主要结果如下:（1）与LF组相比,HF组显着提高第二胎和第三胎总初生窝重和活产窝重（P<0.05）以及前三胎平均总初生窝重和活产窝重（P<0.05）;缩短第一胎分娩时长47min（P<0.05）;显着提高第二胎和第三胎的胎盘重（P<0.05）;第三胎活产仔数提高1.8头（P<0.1）,前三胎平均活产仔数提高1.24头（P<0.05）;（2）HF组显着提高第一胎母猪泌乳0-14天采食量、仔猪断奶个体重和泌乳0-28天仔猪体增重（P<0.05）;显着增加第二胎仔猪断奶个体重和泌乳0-28天仔猪体增重（P<0.05）;（3）HF组显着提高母猪第二胎妊娠30、60、90和110天粪样菌群的observed＿species指数和chao 1指数（P<0.05）,显着改变第一胎和第二胎妊娠期的粪样菌群β多样性（P<0.05）,且有改变第一胎断奶当天粪便菌群β多样性的趋势（P<0.10）;（4）HF组显着降低母猪第二胎妊娠30天粪便Tenericutes和Actinobacteria菌门以及Clostridium＿sensu＿stricto＿1、Streptococcus和Ruminococcus＿1菌属的丰度（P<0.05）,显着提高Fibrobacteres菌门以及Lactobacillus、Christensenellaceae＿R-7＿group、[Eubacterium]＿coprostanoligenes＿group和Lachnospiraceae＿AC2044＿group菌属的丰度（P<0.05）,并且Tenericutes和Ruminococcus＿1与第二胎初生窝重呈显着的负相关（P<0.05）,Lactobacillus、Christensenellaceae＿R-7＿group和[Eubacterium]＿coprostanolige nes＿group与第二胎初生窝重呈显着的正相关（P<0.05）。以上结果表明,（1）连续三胎妊娠期日粮添加纤维可提高母猪第一、二胎断奶窝重以及第二、三胎初生窝重,缩短分娩产程,改善母猪粪便评分;（2）妊娠期日粮添加纤维,处理至第二胎,可显着改变母猪妊娠期粪便菌群的种类和多样性;（3）妊娠期增加日粮纤维摄入量改善第二、三胎母猪初生窝重可能与提高了相应胎次妊娠30天Lactobacllius、Eubacterium和Lachnospiraceae等有益菌和纤维降解菌的丰度以及菌群多样性有关。试验二妊娠期日粮添加纤维对母猪粪便微生物组和血浆代谢物的影响试验一表明,母猪妊娠期日粮添加纤维提高仔猪初生窝重与肠道菌群的改变有关。本试验在试验一的基础上,利用宏基因组和代谢组学技术考察妊娠期日粮添加纤维对母猪粪便微生物组和血浆代谢物的影响,探究纤维调控母猪繁殖性能的微生物途径。试验设计同试验一。第二胎断奶母猪发情配种后,保持原处理不变,在第三胎妊娠30、60、90和110天,每个处理选取8头母猪空腹采血并收粪,用于相关指标分析,其中妊娠30天的母猪血样和粪便样品分别用于代谢组学和宏基因组学分析;母猪分娩当天,各处理选取6头正常分娩的母猪采集胎盘样品,考察胎盘相关基因的表达量。结果如下:（1）与LF组相比,HF组显着提高母猪第三胎妊娠30天粪样乙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸（VFAs）水平（P<0.05）,有提高丙酸水平的趋势（P=0.076）;显着提高妊娠60、90和110天粪样乙酸、丙酸、丁酸和总VFA水平（P<0.05）;（2）HF组显着提高母猪第三胎妊娠30天和110天血清中血清素浓度以及胎盘血清素和孕酮浓度（P<0.05）;显着上调胎盘血清素转运载体（SERT）、血清素受体（5-HT2B和5-HT7）、胰岛素样生长因子-2（IGF-2）、细胞色素P450 scc（CYP11A1）、钠偶联中性氨基酸转运载体-2（Slc38a2）和葡萄糖转运载体-2（GLUT2）的m RNA表达量（P<0.05）,下调色氨酸羟化酶-1（TPH1）和印迹基因H19的m RNA表达量（P<0.05）;（3）在门水平上,HF组显着降低母猪粪便Firmicutes/Bacteroidetes比值（P<0.05）,显着提高Bacteroidetes、Proteobacteria和Fibrobacteria的丰度（P<0.05）;在属水平上,显着降低母猪粪便Clostridium和Tuicibacter的丰度（P<0.05）,显着提高Prevotella、Oscillibacter、Eubacterium、Alistipes、Faecalibacterium和Fibrobacter的丰度（P<0.05）;在种水平上,显着降低Clostridium sp.CAG:452和Clostridium sp.CAG:138的丰度（P<0.05）,显着提高Firmicutes bacterium CGA:110、Firmicutes bacterium CGA:555、Prevotella sp.P2-180、Prevotella sp.CAG:279和Firmicutes bacterium CGA:129的丰度（P<0.05）;（4）将HF组和LF组粪便微生物的差异基因与KEGG代谢通路第二层级进行对比,发现23种聚类系统存在显着差异（P<0.05）;通过KEGG通路富集发现,具有显着差异且相对丰度在前35的通路（P<0.05）主要与营养物质的合成、代谢和转运相关;与碳水化合物活性酶数据库（CAZy）对比,发现与糖苷水解酶和糖苷转移酶的相关的基因丰度最高,且均在HF组富集（P<0.05）;（5）通过代谢组学分析发现,HF组和LF组第三胎妊娠30天血浆共有39种差异代谢物。将这些差异代谢物与KEGG数据库进行对比后发现,色氨酸代谢通路,苯并恶唑嗪酮生物合成通路,以及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成通路显着改变（P<0.05）,其原因是妊娠期日粮添加纤维显着降低第三胎妊娠30天血浆吲哚的浓度（P<0.05）;（6）将宏基因组学和代谢组学结果进行关联分析发现,Firmicutes bacterium CAG:110与吲哚的合成呈显着性负相关（P<0.05）。以上结果表明:（1）连续三胎在妊娠期日粮添加纤维可提高母猪第三胎妊娠30天粪便中纤维降解菌的丰度,促进VFAs的生成,降低粪便致病菌的丰度;（2）连续三胎在妊娠期日粮添加纤维可能通过提高母猪粪便中VFAs产生菌、Eubacterium和Firmicutes bacterium CAG:110的丰度,提高母猪和胎盘血清素的浓度,改善胎盘的发育和功能,进而提高母猪繁殖性能。试验三日粮纤维对妊娠母猪结肠和胎盘血清素水平的影响试验二发现,妊娠期日粮添加纤维显着提高了母体血清和胎盘血清素的水平。但是,妊娠日粮添加纤维是否会影响母猪结肠血清素的水平目前尚不清楚。试验选取体重和日龄相近的新加系LY后备母猪10头,配种后随机分为2个处理,即无纤维组（NF）和纤维组（F）,每个处理5个重复,每头重复1头母猪。NF组采用纯合日粮,F组妊娠期日粮是通过在NF组妊娠期日粮中额外添加菊粉（8.33 g/kg）和纤维素（200g/kg）配制。母猪配种后处理至妊娠106天,采用Zoletile 50静脉麻醉后屠宰取样,记录每头母猪的胎儿数和胎儿重,并采集母猪血样以及结肠和胎盘组织样,考察妊娠期添加纤维对母猪结肠和胎盘血清素水平的影响。试验主要结果如下:（1）与NF组相比,F组显着提高胎儿总重（P<0.05）,但不影响胎儿数（P>0.05）;（2）F组显着提高母猪结肠食糜中乙酸、丙酸和总VFAs的浓度（P<0.05）,显着提高母猪血清和结肠血清素的浓度以及结肠TPH1的浓度和表达量（P<0.05）,显着降低结肠SERT的表达量（P<0.05）;（3）F组显着提高胎盘血清素的浓度和SERT的表达量（P<0.05）,显着降低胎盘TPH1的浓度和表达量（P<0.05）。以上结果表明:（1）纤维处理可促进妊娠母猪结肠TPH1的表达,提高结肠和血清中血清素的水平;无纤处理可促进结肠SERT的表达。（2）纤维处理可促进妊娠母猪胎盘SERT的表达,提高胎盘血清素的水平;而无纤处理可促进胎盘TPH1的表达。试验四妊娠期日粮纤维比例对母猪连续四胎繁殖性能和粪便菌群的影响前三个试验结果表明,在妊娠饲粮ISF/SF比例一致的条件下,提高妊娠母猪纤维摄入量,可通过影响肠道菌群提高母猪的繁殖成绩。但是妊娠期ISF/SF比例对母猪繁殖性能的影响以及妊娠饲粮中适宜的ISF/SF目前尚不清楚,并且妊娠期ISF/SF比例能否通过改变肠道菌群影响母猪繁殖性能目前也尚未有研究报道。本试验选取体重（153.23±1.02 kg）、背膘（15.76±0.34 mm）和日龄（284±1 d）相近的新加系LY后备母猪64头,配种后随机分为4个处理,每个处理16个重复,每个重复1头母猪,妊娠期分别饲喂不同ISF/SF比例的饲粮（T1:3.89、T2:5.59、T3:9.12、T4:12.81）,母猪在泌乳期饲喂同一泌乳饲粮,系统考察妊娠期ISF/SF比例对母猪繁殖性能和粪便菌群的影响。试验持续四个连续的繁殖周期。各胎次配种当天、妊娠110天、分娩当天和断奶当天对所有母猪进行称重并测定背膘厚,记录母猪连续四个胎次的产仔性能、哺乳性能和泌乳期采食量。记录第一胎分娩前后5天以及第二、三胎妊娠30、60、90和110天粪便形态并评分。第一、二胎妊娠30、60、90、110天采集母猪粪便样品,用于16S r DNA的测定。采集第三胎妊娠30、60、90和110天血液样品以及分娩当天胎盘样品,用于相关指标的测定。试验主要结果如下:（1）ISF/SF比例对母猪第一至四胎每一胎的产仔数和初生窝重无显着影响（P>0.05）,但T1和T2组的前四胎平均总产仔数、活产仔数和总初生窝重显着高于T3组（P<0.05）,且T2组的平均活产仔数最高;（2）ISF/SF比例对各胎次母猪泌乳期采食量无显着影响（P>0.05）,但日粮纤维比例显着影响第一胎哺乳仔猪的生长性能;第一胎时T1组和T2组仔猪断奶重显着高于T4组（P<0.05）;（3）ISF/SF比例对第一胎母猪分娩产程无显着影响（P>0.05）,但第二胎时T1和T2组的仔猪出生间隔分别比T3组缩短5.25 min和6.44 min（P<0.05）,第三胎时T1和T2组的分娩时长分别比T3组缩短98.76 min和97.40 min（P<0.05）;（4）第一胎时,T1组母猪妊娠110天粪便乙酸浓度显着高于T3和T4组,T1组总VFAs浓度显着高于T4组（P<0.05）;第二胎时,T2组母猪妊娠110天乙酸和总VFAs浓度显着高于T3和T4组（P<0.05）;第三胎时,T2组母猪粪样乙酸含量最高且显着高于T4组（P<0.05）,T2组母猪血清中血清素浓度显着高于其他各组（P<0.05）,然而日粮纤维比例对胎盘血清素含量和孕酮浓度无显着影响（P>0.05）;（5）当ISF/SF=3.89时,初产母猪粪便中纤维降解菌Prevotella的丰度升高（P<0.05）;当ISF/SF=5.59时,第二胎母猪粪便中致病菌Streptococcus的丰度降低,有益菌Bifidobacterium和纤维降解菌Prevotella的丰度升高（P<0.05）;（6）ISF/SF比例对第一胎和第二胎母猪妊娠30天肠道菌群α多样性影响无显着影响（P>0.05）;第一胎妊娠110天时,T1、T2和T3组的chao 1指数显着高于T4组（P<0.05）;第二胎妊娠110天时,T4组母猪肠道微生物observed species指数、shannon指数显着高于T1组（P<0.05）,T1组的chao 1指数有低于T3和T4组的趋势（P<0.10）;与第一胎相比,第二胎妊娠110天Ruminococcaceae、Spirochaetaceae、Bacteroidales＿S24＿7、Lachnospiraceae和Rikenellaceae的相对丰度显着升高（P<0.05）,Prevotellaceae、Lactobacillaceae、Streptococcaceae和Clostridiaceae＿1的丰度显着降低（P<0.05）;（7）通过肠道微生物的β多样性分析,第一、二胎妊娠110天T1和T2组母猪肠道微生物菌落结构趋于一致,T3和T4组的菌落结构趋向一致,而T1和T2组与T3和T4组的群落结构具有明显的差异（P<0.05）。以上结果表明,（1）在本试验条件下,当ISF/SF=3.89和5.59时,可提高第一胎仔猪的断奶重,并缩短第二胎和第三胎分娩产程,提高母猪第一至四胎平均总产仔数、活产仔数和总初生窝重;（2）在本试验条件下,对于初产母猪,当饲粮中ISF/SF=3.89时,有利于纤维降解菌的增殖和VFAs的生成;对于经产母猪,当饲粮中ISF/SF=5.59时,有利于纤维降解菌的增殖和VFAs的生成。这可能与初产母猪和经产母猪肠道菌群的组成和多样性的差异有关。（3）在本试验条件下,当饲粮中ISF/SF=5.59时,更有利于有益菌Bifidobacterium的增殖。试验五母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪肠道发育、抗氧化能力和肠道菌群的影响试验四发现,当妊娠期饲粮ISF/SF=3.89和5.59时可显着改善仔猪生长性能,但是其原因尚不清楚。前人研究结果发现,母猪纤维营养可影响后代仔猪的肠道发育和菌群组成,因此,母猪妊娠期饲粮中适宜ISF/SF比例改善仔猪生长性能可能与促进仔猪肠道发育和改变肠道菌群有关。为了验证该假设,于第一胎分娩当天,从试验四T1、T2、T3和T4四个处理中分别选择6头产仔数正常、乳腺发育良好且健康的母猪,每窝选择一头接近该窝平均体重的仔猪于出生后2h内、吃到初乳前,采用Zoletile50肌肉注射麻醉后进行屠宰。各处理对应的后代仔猪编号分别为R1、R2、R3和R4。仔猪屠宰前称重并采集血样,测定血液免疫和抗氧化相关指标;仔猪屠宰后,采集肝脏和肠道样品用于指标的测定。结果如下:（1）R3组新生仔猪十二指肠绒隐比（V/C）显着高于R4组（P<0.05）,R1和R2组仔猪空肠V/C显着高于R3和R4组（P<0.05）;新生仔猪R1组乳糖酶活性显着高于R3和R4组,且R2组显着高于R4组（P<0.05）;R4组蔗糖酶活性显着低于其它三组（P=0.021）;（2）R1组新生仔猪血浆肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平显着低于R3和R4组,且R2组显着低于R3组（P<0.05）;R1和R2组新生仔猪血浆总抗氧化能力（T-AOC）显着高于R4组（P<0.05）,R1组和R2组血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显着高于R3和R4组（P<0.05）;R1和R2组新生仔猪肝脏过氧化氢酶（CAT）活性显着高于R4组（P<0.05）;R1组仔猪肝脏GSH-Px活性显着高于R3和R4组,且R2组显着高于R3组（P<0.05）;（3）R1组仔猪肝脏Nrf2 m RNA表达量显着高于R3和R4组（P<0.05）,且R2组显着高于R4组（P<0.05）;R1和R2组仔猪肝脏HO-1 m RNA表达量显着高于R4组（P<0.05）;R1和R2组仔猪肝脏NF-κB m RNA表达量显着低于R3和R4组（P<0.05）;（4）R1和R2组新生仔猪结肠乙酸、丁酸和总SCFAs的浓度显着高于R3和R4组（P<0.05）,并且R1和R2组仔猪结肠丙酸的浓度有高于R3和R4组的趋势（P<0.10）;（5）PCo A聚类分析表明,R1和R2具有相似的微生物菌群组成,而R3和R4具有相似的微生物组成。R1和R2组仔猪结肠中与纤维降解相关的微生物菌群丰度提高。另外R1和R2组仔猪结肠unidentified＿Enterobacteriaceae相对丰度显着低于R4组（P<0.05）。以上结果表明,在本试验条件下,当母猪妊娠期饲粮中ISF/SF=3.89和5.59时,可提高后代新生仔猪抗氧化能力并降低炎症反应,最终促进其后代的肠道发育,这可能与新生仔猪结肠有益菌的相对丰度提高、有害菌相对丰度降低有关。综上所述,本论文得到以下结论:（1）在本试验条件下,母猪前三胎妊娠1-89天平均每天摄入674.89 g DF、90-112天平均每天摄入797.40 g DF（ISF/SF=8.03）,可提高母猪第二胎和第三胎的初生窝重,这主要与增加纤维摄入量提高了妊娠母猪肠道纤维降解菌、Eubacterium和Firmicute bacteria CGA:110的丰度,促进结肠血清素的合成,提高母猪和胎盘血清素的水平,最终改善了胎盘的发育和功能有关。（2）在本试验条件下,当饲粮中ISF/SF=3.89和5.59时,可促进第一胎哺乳仔猪的生长发育,并提高母猪前四胎的平均产仔数和初生窝重。对于初产母猪,可调整妊娠饲粮中ISF/SF比例为3.89;对于第二至四胎母猪,可调整妊娠饲粮中ISF/SF比例为5.59。（3）母猪妊娠期日粮纤维比例可影响后代新生仔猪肠道菌群的组成,且新生仔猪的肠道菌群群落相似性和母猪的肠道菌群群落相似性一致。
成传尚[8]（2019）在《妊娠期功能性日粮纤维对母猪围产期代谢综合征和仔猪肠道发育的作用及其机制》文中指出在我国规模化养殖生产条件下,母猪繁殖效率不高是现代母猪生产面临的重要问题。其中,母猪泌乳期采食量不足和仔猪肠道发育不完善是导致仔猪育成率低和断奶重小的重要原因。研究指出,母猪泌乳期采食量与围产期胰岛素敏感性正相关。在孕妇中,由于激素分泌、免疫应答的改变,孕妇妊娠后期容易出现包括胰岛素抵抗和系统性低度炎症等为特征的代谢综合征。而妊娠期肥胖会进一步加剧孕妇的代谢紊乱。值得注意的是,孕妇妊娠后期的肠道菌群也发生了显着改变,这种改变与围产期代谢综合征的发生具有重要的关联。然而,整个繁殖周期母猪肠道菌群的变化尚未见报道,同时菌群变化是否及如何影响母猪代谢也值得深入研究。另一方面,新生仔猪肠道屏障和免疫功能的发育受到肠道菌群定植模式的影响。研究指出,母猪肠道和乳汁中的细菌是新生仔猪肠道菌群的重要来源。因此,调控母猪肠道和乳汁菌群组成可能是改善仔猪肠道发育的有效手段。本实验室前期研究发现,妊娠期日粮纤维可以提高母猪肠道产丁酸菌的丰度,并改善围产期胰岛素敏感性,但具体机制未被阐明。同时,妊娠期日粮纤维是否通过调控母猪肠道和母乳菌群组成,从而改善哺乳仔猪的肠道发育和生长性能,也值得进一步深入研究。因此,本研究试图阐明肠道菌群在母猪围产期代谢变化过程的作用;并以“肠道菌群”为靶点,进一步揭示妊娠日粮添加可溶性纤维改善母猪围产期代谢以及新生仔猪生长和肠道发育的效果和作用机理。主要研究内容和结果如下:第一部分妊娠后期肥胖对母猪围产期代谢及仔猪生长发育的影响本试验研究了妊娠后期肥胖对母猪产仔性能、围产期代谢综合征以及哺乳仔猪生长性能、肠道屏障和免疫系统的影响。选择遗传背景一致、胎次相近的60头经产母猪,根据妊娠109天背膘厚分为2个组,即正常背膘组（=17mm）和厚背膘组（≥21mm）。记录并度量母猪产仔性能以及仔猪生长性能。于妊娠第109天以及泌乳第3天采集母猪粪样和血样,测定粪样脂钙蛋白-2和摄食前血液葡萄糖、胰岛素、连蛋白、炎症因子和氧化应激标志物的含量。于泌乳第14天采集仔猪粪样和血样,测定粪样脂钙蛋白-2、β-防御素2、分泌型IgA、炎症因子和血浆连蛋白、IgM的含量。主要结果如下:1.与正常背膘组相比,厚背膘组母猪的产活仔数和仔猪出生窝重显着降低（P<0.05）,表明母猪妊娠后期肥胖降低了产仔性能。母猪妊娠后期肥胖对整个哺乳期仔猪的个体均重和平均日增重（average daily gain,ADG）的影响不显着（P>0.05）。2.与正常背膘组相比,厚背膘组母猪围产期的摄食前葡萄糖浓度和胰岛素抵抗指数（homestasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR）显着增加,血浆IL-6、TNF-α和硫代巴比妥酸反应物（thiobarbituric acid reactive substances,TBARS）浓度显着升高（P<0.05）,提示妊娠后期肥胖加剧了母猪的围产期代谢综合征。此外,厚背膘组仔猪粪样TNF-α含量显着增加,而粪样IL-10和血浆IgM的水平显着降低（P<0.05）,这表明母猪妊娠后期肥胖可能加剧了仔猪肠道炎症的发生。第二部分肠道菌群及其代谢物影响母猪围产期代谢的机制选择遗传背景一致、健康状况良好的12头经产母猪。采集母猪妊娠期第30天（G30）和第109天（G109）以及泌乳第3天（L3）和第14天（L14）的粪样和血样,利用16S rRNA基因测序技术和气相色谱分别测定了粪样菌群和短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFAs）的组成;分析了粪样中脂钙蛋白-2、内毒素和血液中肿瘤坏死因子（tumor necrosis factorα,TNF-α）、白介素-6（interleukin6,IL-6）、连蛋白和内毒素的水平。妊娠期第30天、第109天和泌乳期第3天,用餐实验评估母猪摄食后血液葡萄糖的变化情况。主要结果如下:1.餐后60 min-240 min,L3的血浆葡萄糖浓度明显高于G30和G109（P<0.05）。L3的血浆葡萄糖的曲线下面积显着高于G30和G109（P<0.05）。此外,G109和L3母猪的血浆IL-6水平高于G30和L14（P<0.05）。这表明,在围产期,特别是泌乳早期,母猪表现出明显的代谢综合征。2.16S rRNA基因测序结果显示,在门水平上,Firmicutes和Bacteroidetes是最优势门,其次是Spirochaetes和Proteobacteria。同时,L3的促炎症相关菌-Proteobacteria门和Fusobacteria门的相对丰度最高（P<0.05）。在属水平上,L3的Bacteroides、Escherichia Shigella和Fusobacterium相对丰度最高而产丁酸菌属Oscillospira最低（P<0.05）。LEfSe分析结果显示,L3主要富集Fusobacterium、Enterobacteriaceae和Escherichia Shigella。此外,L3的Chao 1和Shannon指数显着小于其他三个阶段（P<0.05）。主坐标分析（Principal coordinates analysis,PCoA）结果显示,母猪肠道菌群在G30和L14中分散较少,但在G109和L3表现出明显的分离（P<0.05）。气相色谱分析结果显示,L3的粪样丁酸含量低于其他三个阶段（P<0.05）。这些结果表明,泌乳早期母猪肠道菌群的组成、结构以及代谢发生了明显的改变,主要特征是促炎症相关菌群富集,而产丁酸相关菌群的相对丰度和丁酸产量显着降低。3.与G30和L14相比,G109和L3母猪的血浆连蛋白和粪便脂钙蛋白-2、IL-6和TNF-α的水平升高,而IL-10的水平降低（P<0.05）。同时,粪样内毒素含量从G30到L3显着上升,然后在L14显着降低。L3的血浆内毒素水平明显高于其他三个阶段（P<0.05）。Spearman相关性分析结果显示,Fusobacterium与血浆连蛋白和粪样内毒素呈正相关,与粪便IL-10呈负相关（P<0.05）。这提示,泌乳早期母猪肠道菌群的紊乱性改变可能导致了母猪肠道渗透性、血浆内毒素以及炎症水平的增加。第三部分日粮纤维调控母猪肠道菌群改善围产期代谢综合征的作用和机制本研究旨在探讨妊娠期日粮纤维能否通过调控母猪肠道菌群来降低肠道渗透性和血浆内毒素水平,进而改善母猪的代谢状态。选择56头经产母猪随机分为2个处理组,即对照组（CON）和2%日粮纤维组（SF）。两种日粮除可溶性纤维含量不同外,其他营养素的含量相同。在妊娠期第30天（G30）和第109天（G109）以及泌乳第3天（L3）和第14天（L14）喂料前（7:00）采集母猪血样和粪样,分析了母猪代谢状态、肠道菌群、肠道渗透性和肠道局部炎症的变化情况。主要结果如下:1.从4个阶段来看,G109和L3母猪的HOMA-IR值和血浆超敏C反应蛋白（hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP）浓度高于G30和L14,而妊娠期日粮添加纤维显着性降低了HOMA-IR值和血浆hs-CRP的水平（P<0.05）。这表明,妊娠期日粮添加纤维改善了母猪围产期胰岛素敏感性和系统性炎症状态。2.16S rRNA基因测序结果显示,在科水平上,日粮纤维提高了产丁酸菌科-毛螺旋菌科和瘤胃球菌科的相对丰度;同时,在属水平上,提高了Oscillospira的相对丰度（P<0.05）。此外,日粮纤维显着提高了母猪粪样和血浆中丁酸的浓度（P<0.05）。这提示,妊娠期日粮添加纤维促进了产丁酸菌在母猪肠道中富集,提高了肠道中丁酸的产量。3.与G30和L14相比,G109和L3母猪的血浆连蛋白和粪便脂钙蛋白-2、IL-6和TNF-α的水平显着升高,而妊娠期日粮纤维显着降低了血浆连蛋白、内毒素和粪样脂钙蛋白-2、IL-6和TNF-α的水平（P<0.01）。此外,spearman相关性分析结果显示,Lachnospiraceae科与HOMA-IR值和血浆hs-CRP呈负相关（P<0.05）。Oscillospira与血浆连蛋白和粪便脂钙蛋白-2呈负相关（P<0.05）。这些结果表明,妊娠期日粮添加纤维可能通过调控母猪肠道菌群降低了肠道渗透性和血浆内毒素水平,最终改善了母猪围产期代谢综合征。第四部分妊娠期日粮纤维对母猪乳成分和菌群的调控作用本试验研究了妊娠期日粮纤维对不同泌乳阶段母猪乳成分和乳样菌群的调控作用。该研究的试验样品来源于第三部分试验。在泌乳期第1（初乳）、7、14和21天,每个处理组选择10头母猪无菌收集初乳和常乳,测定乳成分以及乳样菌群的变化情况。主要结果如下:1.与初乳相比,第7、14和21天常乳中乳蛋白的相对比例降低,而乳糖的相对比例升高（P<0.01）。日粮纤维对乳蛋白、乳糖和乳脂肪的影响不显着（P>0.05）。2.16S rRNA基因测序结果显示,Firmicutes和Proteobacteria是母猪乳样菌群的前两大优势菌门,Moraxella和Streptococcus是前两大优势菌属。与初乳相比,泌乳第7、14和21天乳样菌群的α多样性指数（Chao 1和Shannon指数）显着增加,同时Lactobacillus、Oscillospira、Ruminococcus、Coprococcus、Dorea、Eubacterium和Faecalibacterium的相对丰度显着升高（P<0.01）;值得注意的是,与对照组相比,妊娠期日粮纤维显着性提高了母乳中Lactobacillus、Oscillospira、Ruminococcus、Coprococcus和Eubacterium的相对丰度（P<0.05）。这表明,不同泌乳阶段母猪乳样菌群组成和结构明显不同,同时妊娠期日粮添加纤维改善了母乳菌群的组成。第五部分妊娠期日粮纤维调控仔猪肠道菌群增强肠道屏障和免疫功能的效果本试验评价了妊娠期日粮纤维对哺乳仔猪生长性能、肠道菌群、肠道屏障以及免疫功能的影响。选择24头经产母猪,随机分为2个处理组,妊娠期分别饲喂对照组（CON）和2%日粮纤维组（SF）日粮。主要研究结果如下:1.与对照组仔猪相比,日粮纤维组仔猪的21日龄结束重、第三周和全期平均日增重明显增加,全期腹泻率和腹泻指数显着降低（P<0.05）。这表明,妊娠期日粮添加纤维提高了哺乳仔猪的生长速度和抗病力,缓解了哺乳期腹泻的发生。2.16S rRNA基因测序结果显示,Bacteroidetes和Firmicutes为14日龄哺乳仔猪的前两大优势菌门,Bacteroides是最优势菌属。门水平上,与对照组相比,日粮纤维组仔猪的Fusobacteria和Saccharibacteria的相对丰度显着增加。在属水平上,Bacteroides、Lactobacillus和Roseburia在日粮纤维组仔猪肠道中显着富集;相反,Bilophila的相对丰度减小（P<0.05）。基于weighted-unifrac距离的PCoA结果显示,对照组和日粮纤维组哺乳仔猪的肠道菌群结构表现出明显的分离。以上结果表明,妊娠期日粮处理显着性改变了哺乳仔猪的肠道菌群组成和结构。3.与对照组相比,日粮纤维组仔猪的粪样和血浆乙酸、丁酸和总SCFAs含量显着增加（P<0.05）。同时,血浆连蛋白、内毒素和二胺氧化酶以及粪样脂钙蛋白-2的含量降低（P<0.05）,而血浆抗炎因子IL-10和TGF-β的水平升高（P<0.01）。这表明,妊娠期日粮添加纤维可以降低仔猪肠道渗透性,促进仔猪肠道屏障功能的发育。此外,日粮纤维组仔猪的粪样β-防御素2的含量显着增加（P<0.05）。Spearman相关性分析结果显示,Lactobacillus与仔猪ADG显着正相关,与腹泻率显着负相关（P<0.05）;Bacteroides与IL-10含量显着正相关;Bilophila与粪样脂钙蛋白-2的含量呈显着正相关（P<0.05）。这表明,妊娠期日粮对仔猪肠道屏障和生长速度的改善作用可能与其对仔猪肠道菌群组成和代谢的调控作用有关。综述所述,本研究的主要结论如下:（1）首次证实母猪发生了围产期代谢综合征,即围产期出现胰岛素抵抗和系统性炎症;阐明了菌群紊乱性变化引起的肠道丁酸产量减少,造成肠道渗透性和血浆内毒素水平增加,是菌群影响胰岛素敏感性的潜在机制。同时,证实妊娠后期母猪过肥加剧了母猪围产期代谢紊乱,降低了产活仔数和仔猪的出生窝重,影响了仔猪的肠道健康。（2）母猪妊娠期添加功能性日粮纤维后,改善了母猪的围产期代谢状态。可能的机制是:功能性日粮纤维促进了产丁酸菌-Oscillospira属的富集以及丁酸的产生,从而降低了母猪围产期肠道渗透性和血浆内毒素的水平。（3）母猪妊娠期添加功能性日粮纤维后,还改变了母乳菌群的组成,促进了仔猪早期肠道菌群的定植,提高了肠道屏障和免疫功能,降低了断奶腹泻,提高了仔猪的生长性能。
郜陆敏[9]（2019）在《母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道屏障和胎盘营养物质转运的影响及机理研究》文中研究指明为探究妊娠后期-哺乳期母猪日粮中添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道屏障和胎盘营养物质转运的影响及其机制,试验选取预产期相近的60头妊娠后期80±3d的长x大二元母猪随机分成两组,即对照组（CON组）和核苷酸组（YN组）,每组有30头母猪,每个重复一头母猪,CON组饲喂基础日粮,YN组饲喂试验日粮（基础日粮+4g/kg的酵母核苷酸）,试验于母猪妊娠后期80d开始,至仔猪断奶结束。母猪分娩时,记录产仔数、死胎数等繁殖性能,采集胎盘组织和新生仔猪血浆、肠道样品,此外,记录哺乳仔猪的日增重和腹泻率。生化试剂盒检测新生仔猪血浆D-乳酸和二胺氧化酶活性;采用q-PCR技术对新生仔猪小肠的三个肠段的紧密连接蛋白及细胞因子进行基因水平检测;胎盘样品提取RNA后,采用q-PCR技术对核苷酸、葡萄糖、脂肪酸和氨基酸等营养物质的转运蛋白在mRNA表达水平进行检测;蛋白免疫印迹技术对胎盘mTORC1-PPARs信号通路相关蛋白检测。试验结果如下:（1）与对照组相比,妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸显着降低死胎率和IUGR发生率,提高窝产活仔数（P<0.05）;妊娠后期-哺乳期添加酵母核苷酸显着降低哺乳仔猪的腹泻率（P<0.01）,显着提高断奶时的仔猪头数和平均个体重（P<0.05）;（2）与对照组相比,妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸极显着提高新生仔猪回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值（P<0.01）;（3）与对照组相比,妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸显着降低新生仔猪空肠和回肠中ZO-1蛋白的mRNA表达;显着降低十二指肠和空肠的Claudin-1蛋白mRNA表达（P<0.05）;（4）与对照组相比,妊娠后期母猪日粮添加核苷酸显着提高新生仔猪空肠的IL-17、IL-6、IL-1β、IL-8、IL-12、TNF-а和回肠IL-17、IL-1β、IL-8、IL-10、TNF-а的mRNA相对表达水平（P<0.05）;（5）与对照组相比,妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸显着提高胎盘SLC28A3和PPARa的mRNA表达水平（P<0.05）,显着降低PPARγ、EAAT3、PAT1、LAT1 mRNA表达水平（P<0.05）;此外,与对照组相比,妊娠后期母猪日粮添加核苷酸显着降低母猪胎盘AKT蛋白及其磷酸化水平、mTORC1蛋白的磷酸化水平和PPARγ蛋白表达（P<0.05）。综上,妊娠后期-泌乳期母猪日粮中添加酵母核苷酸降低了母猪的死胎率和IUGR发生率,此外,母猪日粮中添加酵母核苷酸降低了哺乳仔猪腹泻率,提高其生长性能;妊娠后期母猪日粮中添加酵母核苷酸提高了新生仔猪回肠绒毛高度和绒腺比,此外,母猪日粮中添加酵母核苷酸调控了新生仔猪小肠IL-17、IL-8、IL-10、IL-1β、TNF-a等细胞因子的mRNA表达,这有利于促进新生仔猪小肠屏障的发育;妊娠后期母猪日粮中添加酵母核苷酸通过mTORC1-PPARs信号通路调控胎盘营养物质转运功能,这可能在一定程度上促进了妊娠后期胎猪的肠道发育。
谢晶晶[10]（2019）在《三个品系大白猪的ESR、FSHβ和PRLR基因多态性及其与产仔性状的关联分析》文中研究指明本研究以美系、丹系和加系三个品系的大白猪为实验对象:（1）共测定201头三个品系大白猪个体的线粒体D-loop区核苷酸序列,结合从NCBI下载的227个来自中国、韩国、日本、俄罗斯以及印度尼西亚的野猪个体信息,分析三个品系间大白猪的遗传多态性及亲缘关系;（2）选取影响母猪产仔性状的三个候选基因雌激素受体（ESR）、促卵泡激素β亚基（FSHβ）和催乳素受体（PRLR）,采用PCR扩增及直接测序法对ESR基因的3号、6号以及8号外显子区域、FSHβ基因的3号外显子区域、PRLR基因的10号外显子区域进行SNPs位点检测,并将检测到的SNPs位点与母猪产仔性状进行关联性分析,从而筛选出有利于提高母猪产仔性状的优势基因型。结果如下:（1）三个品系的大白猪亲缘关系研究结果:在201头大白猪D-loop区域中共检测到了34个多态位点,其中包括单一多态位点7个,简约信息位点27个,检测到19种单倍型,单倍型多样性为0.891±0.008,核苷酸多样性为0.01198±0.00034。系统发育分析表明三个品系大白猪间的种群分化情况不明显,初步发现大白猪与中国、日本、韩国、俄罗斯等亚洲东北部地区猪种的遗传距离更近。（2）ESR基因研究结果:发现了4个SNPs位点,分别是位于3号外显子内的g.C669T、6号外显子内的g.A1296G、8号外显子内的g.C1665T和g.A1755G。g.C1665T位点的TT基因型和g.A1755G位点的AA基因型能显着提高美系大白猪的初产总产仔数（P<0.05）。H5H8、H2H5、H5H5单倍型组合为产仔性状的优势组合。（3）FSHβ基因研究结果:发现了8个SNPs位点,均位于3号外显子内,分别为g.A511G、g.A617G、g.C630T、g.C652T、g.C678T、g.C735T、g.A746G、g.A921G。g.A511G位点的AA基因型、g.A617G位点的AA和AG基因型、g.C630T位点的CC和CT基因型、g.C652T位点的CT和TT基因型、g.C735T位点的CT和TT基因型、g.A746G位点的AA和AG基因型、g.A921G的AA和AG基因型、g.C678T位点的CT基因型均能显着提高不同品系大白猪的产仔数（P<0.05）。H2H8单倍型组合为产仔性状的优势组合。和g.C678T位点的CT基因型为有利基因型（4）PRLR基因研究结果:发现了9个SNPs位点,均为于10号外显子内,分别为:g.C260G、g.C362T、g.C527G、g.A540G、g.A584G、g.A673T、g.A745G、g.C765T、g.A934G。g.C362T位点的CC和CT基因型以及g.A584G位点的AG基因型能显着提高不同品系大白猪的产仔数（P<0.05）。g.C765T位点的CC基因型和g.A934G位点的AA基因型能极显着提高大白猪的产仔数（P<0.01）。H2H7和H4H4单倍型组合为产仔性状的优势组合。本研究分别挖掘了ESR、FSHβ、PRLR基因中存在的SNPs位点以及有利于提高母猪产仔性状的优势基因型,为筛选高繁殖性能母猪的分子标记提供参考,并为母猪的遗传选育及繁殖性能检测提供理论依据。
二、提高母猪繁殖性能的三种主要技术途径（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、提高母猪繁殖性能的三种主要技术途径（论文提纲范文）
（1）甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对大鼠和猪铁状况的影响（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 铁的吸收代谢机制 |
| 1.2 铁的营养功能 |
| 1.2.1 铁参与蛋白质合成及物质代谢 |
| 1.2.2 铁参与氧气的运输和储存 |
| 1.2.3 铁与能量代谢 |
| 1.2.4 铁与免疫功能 |
| 1.3 仔猪贫血的原因及补铁方式 |
| 1.3.1 仔猪贫血的原因 |
| 1.3.2 补铁方式 |
| 1.4 氨基酸螯合铁在畜牧业中的应用进展 |
| 1.4.1 氨基酸螯合铁的概述及理化性质 |
| 1.4.2 氨基酸螯合铁的优点 |
| 1.4.3 氨基酸螯合铁在动物方面的应用 |
| 1.5 氨基乙酰丙酸在畜牧业中的应用进展 |
| 1.5.1 氨基乙酰丙酸的简介 |
| 1.5.2 氨基乙酰丙酸在机体内的生成途径 |
| 1.5.3 氨基乙酰丙酸在工业生产中的制备 |
| 1.5.4 氨基乙酰丙酸在动物体内的生理功能 |
| 1.5.5 氨基乙酰丙酸在动物方面的应用 |
| 1.6 本研究的目的意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠和仔鼠铁状况的影响 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验动物选择及日粮 |
| 2.1.3 试验设计 |
| 2.1.4 测定指标 |
| 2.1.5 乳汁及组织中铁含量的测定 |
| 2.1.6 肝脏铁染色 |
| 2.1.7 免疫组化法测定Hepcidin基因在肝脏中的分布 |
| 2.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪铁状况的影响 |
| 2.2.1 试验动物选择及日粮 |
| 2.2.2 试验设计 |
| 2.2.3 测定指标 |
| 3 数据处理 |
| 4 试验结果 |
| 4.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠和仔鼠铁状况的影响 |
| 4.1.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠生长性能的影响 |
| 4.1.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠器官指数的影响 |
| 4.1.3 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠血液生理指标的影响 |
| 4.1.4 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠血液生理指标的影响 |
| 4.1.5 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠和仔鼠血清中铁指标的影响 |
| 4.1.6 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对乳汁及组织中铁含量的影响 |
| 4.1.7 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠肝脏铁分布的影响 |
| 4.1.8 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠肝脏Hepcidin分布的影响 |
| 4.1.9 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠胎盘基因表达的影响 |
| 4.1.10 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠肝脏Fpn1、Hepcidin基因表达的影响 |
| 4.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪铁状况的影响 |
| 4.2.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪繁殖性能和仔猪生长性能的影响 |
| 4.2.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪血液生理指标的影响 |
| 4.2.3 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪血清中铁指标的影响 |
| 4.2.4 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对胎盘和乳汁中铁含量的影响 |
| 5 讨论与分析 |
| 5.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠和仔鼠铁状况的影响 |
| 5.1.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠生长性能的影响 |
| 5.1.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠器官指数的影响 |
| 5.1.3 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠和仔鼠血液生理指标的影响 |
| 5.1.4 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对乳汁及组织中铁含量的影响 |
| 5.1.5 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母鼠胎盘基因表达的影响 |
| 5.1.6 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对仔鼠肝脏Fpn1、Hepcidin基因表达的影响 |
| 5.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪铁状况的影响 |
| 5.2.1 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪繁殖性能和仔猪生长性能的影响 |
| 5.2.2 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪血液生理指标的影响 |
| 5.2.3 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对母猪和仔猪血清中铁指标的影响 |
| 5.2.4 甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对胎盘和乳汁中铁含量的影响 |
| 6 结论、创新点和后续研究及展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 后续研究及展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 |
（2）肠道菌群干预对母猪卵巢和子宫发育的作用及其机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 缩略语表(Abbreviation) |
| 第一章 文献综述 |
| 1 前言 |
| 2 哺乳动物主要繁殖器官 |
| 2.1 卵巢 |
| 2.2 子宫 |
| 3 猪肠道微生物研究进展 |
| 3.1 猪肠道微生物定植规律 |
| 3.2 猪肠道微生物生态位分布 |
| 3.3 肠道微生物与猪性状互作研究进展 |
| 4 肠道微生物作为内分泌器官的功能 |
| 4.1 肠道微生物作为内分泌器官的基础 |
| 4.2 肠道微生物与生殖激素调控 |
| 5.FMT技术及多组学技术进展 |
| 5.1 FMT技术 |
| 5.2 FMT在解析肠道微生物与猪性状关系中的应用 |
| 6.研究目的和意义 |
| 第二章 猪肠道微生物与繁殖性能相关性研究 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 粪便样品采集 |
| 2.2.2 粪便微生物基因组DNA提取 |
| 2.2.3 微生物16S rDNA测序及生物信息分析 |
| 2.2.4 粪便中短链脂肪酸测定 |
| 2.2.5 粪便中E2及P4测定 |
| 2.2.6 数据统计与分析 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 高通量16S rDNA扩增子测序数据质量分析 |
| 3.2 高繁殖力与低繁殖力的梅山母猪肠道微生物多样性分析 |
| 3.3 高产仔数与低繁殖力的梅山母猪肠道微生物结构分析 |
| 3.4 高产仔数与低产仔数的梅山母猪肠道微生物功能分析 |
| 3.5 高产仔数与低产仔数的梅山母猪粪便SCFAs和生殖激素浓度 |
| 3.6 梅山母猪肠道微生物与其产仔数相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 第三章 FMT对受体长×大后备母猪繁殖生理的影响 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 动物试验设计 |
| 2.2.2 饲养管理 |
| 2.2.3 血浆样品采集 |
| 2.2.4 屠宰样品采集 |
| 2.2.5 卵巢组织形态学检测 |
| 2.2.6 组织RNA的提取 |
| 2.2.7 RNA反转录 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR |
| 2.2.9 血清激素的检测 |
| 2.2.10 粪便中SCFAs浓度测定 |
| 2.2.11 粪便微生物基因组DNA提取 |
| 2.2.12 微生物16S rDNA测序及生物信息分析 |
| 2.2.13 血浆及肝脏组织非靶向代谢组分析 |
| 2.2.14 卵巢组织蛋白质组学分析 |
| 2.2.15 数据统计与分析 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 16S rDNA扩增子测序数据质量控制 |
| 3.2 FMT对受体长×大母猪肠道微生物多样性的影响 |
| 3.3 FMT对受体长×大后备母猪肠道微生物物种丰度的影响 |
| 3.4 FMT对受体长×大后备母猪肠道微生物功能及其代谢产物影响 |
| 3.5 FMT对受体长×大后备母猪体重及卵巢发育的影响 |
| 3.6 FMT对受体长×大后备母猪卵巢组织蛋白表达影响 |
| 3.7 FMT对受体长×大后备母猪生殖激素的影响 |
| 3.8 FMT对受体长×大后备母猪卵泡中颗粒细胞形态的影响 |
| 3.9 FMT对受体长×大后备母猪子宫发育的影响 |
| 3.10 FMT对受体长×大后备母猪子宫腺发育相关激素分泌的影响 |
| 3.11 FMT富集的差异菌与母猪子宫发育相关指标的相关性分析 |
| 3.12 FMT对受体长×大后备母猪血浆和肝脏组织代谢组的影响 |
| 3.13 非靶向代谢组鉴定的长×大后备母猪血浆和肝脏组织中差异代谢产物KEGG富集分析 |
| 4 讨论 |
| 第四章 母猪繁殖性能相关差异菌对小鼠卵泡发育的影响 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 动物试验设计 |
| 2.2.2 饲养管理 |
| 2.2.3 样品采集 |
| 2.2.4 血浆激素的检测 |
| 2.2.5 粪便和血浆中SCFAs浓度测定 |
| 2.2.6 粪便粪便微生物基因组DNA提取 |
| 2.2.7 卵巢组织形态学检测 |
| 2.2.8 组织RNA的提取 |
| 2.2.9 RNA反转录 |
| 2.2.10 实时荧光定量PCR |
| 2.2.11 数据统计与分析 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 抗生素鸡尾酒法处理小鼠效果评价 |
| 3.2 繁殖性能相关差异菌对小鼠卵泡发育的影响 |
| 3.3 口服繁殖性能相关差异菌对小鼠生殖激素的影响 |
| 3.4 口服繁殖性能相关差异菌对小鼠性腺轴的影响 |
| 3.5 口服繁殖性能相关差异菌对小鼠粪便和血浆中SCFAs浓度影响 |
| 3.6 口服繁殖性能相关差异菌对小鼠卵巢激素合成相关通路影响 |
| 4 讨论 |
| 第五章 SCFAs干预对小鼠卵泡发育的影响及其机制 |
| 1 前言 |
| 2 试验材料方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 动物试验设计 |
| 2.2.2 饲养管理 |
| 2.2.3 血浆激素的检测 |
| 2.2.4 粪便和血浆中SCFAs浓度测定 |
| 2.2.5 小鼠基因型鉴定 |
| 2.2.6 卵巢组织形态学检测 |
| 2.2.7 组织RNA的提取 |
| 2.2.8 RNA反转录 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR |
| 2.2.10 数据统计与分析 |
| 3 试验结果与分析 |
| 3.1 SCFAs添加对小鼠卵泡发育的影响 |
| 3.2 SCFAs添加对小鼠脂肪组织发育的影响 |
| 3.3 Gpr43 基因在不同白色脂肪组织中表达情况 |
| 3.4 SCFAs添加对小鼠生殖激素的影响 |
| 3.5 SCFAs添加对小鼠gWAT细胞分化及瘦素分泌的影响 |
| 3.6 SCFAs添加对小鼠下丘脑激素分泌的影响 |
| 3.7 SCFAs添加对小鼠卵巢类固醇类激素分泌的影响 |
| 3.8 GPR43在SCFAs促进小鼠卵泡发育中的作用 |
| 3.9 GPR43在SCFAs促进小鼠脂肪组织发育中的作用 |
| 3.10 GPR43在SCFAs促进小鼠gWAT细胞分化中的作用 |
| 3.11 GPR43在SCFAs促进小鼠gWAT细胞分泌瘦素中的作用 |
| 3.12 GPR43在SCFAs促进小鼠下丘脑激素分泌中的作用 |
| 3.13 GPR43在SCFAs调控小鼠生殖激素的中的作用 |
| 3.14 GPR43在SCFAs调控小鼠卵巢类固醇类激素分泌中的作用 |
| 4 讨论 |
| 第六章 总结 |
| 1 结论 |
| 2 创新点 |
| 3 不足之处 |
| 4 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 |
| 致谢 |
（3）纯化膳食纤维对母猪繁殖性能及其和后代肠道微生物区系的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩写词对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 膳食纤维的定义及特性 |
| 1.1.1 膳食纤维的定义及测定方法 |
| 1.1.2 膳食纤维的理化性质 |
| 1.2 肠道微生物对宿主健康的影响 |
| 1.2.1 肠道微生物 |
| 1.2.2 肠道微生物的定殖 |
| 1.2.3 肠道微生物与健康 |
| 1.2.4 母体肠道微生物对后代健康的影响 |
| 1.3 .膳食纤维的生理效应 |
| 1.3.1 膳食纤维对肠道微生物的影响 |
| 1.3.2 膳食纤维对机体免疫的影响 |
| 1.3.3 膳食纤维对母猪繁殖性能的影响 |
| 1.3.4 膳食纤维对仔猪生长性能的影响 |
| 1.4 16S rDNA扩增测序技术在肠道微生物研究上的运用 |
| 1.5 研究的目的与意义 |
| 第二章 母猪粪便微生物体外发酵纯化膳食纤维的研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 粪样采集 |
| 2.2.2 底物的收集 |
| 2.2.3 成分和物理特性测定 |
| 2.2.4 底物的酶促水解 |
| 2.2.5 体外发酵设计 |
| 2.2.6 基础培养基成分及配制 |
| 2.2.7 接种物的稀释和接种 |
| 2.2.8 SCFAs的测定 |
| 2.2.9 数据统计与分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 膳食纤维成分比较 |
| 2.3.2 膳食纤维物理特性比较 |
| 2.3.3 膳食纤维体外发酵特性比较 |
| 2.3.4 膳食纤维成分与理化特性相关性分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 妊娠期摄入纯化复合膳食纤维对母猪繁殖性能、肠道微生物及免疫性能的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 试验动物和设计 |
| 3.2.2 饲粮配方 |
| 3.2.3 饲养管理 |
| 3.2.4 样品收集 |
| 3.2.5 检测指标 |
| 3.2.6 数据统计与分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 妊娠母猪繁殖性能 |
| 3.3.2 哺乳母猪哺乳性能 |
| 3.3.3 母猪粪便中SCFAs的浓度 |
| 3.3.4 血清激素及细胞因子水平 |
| 3.3.5 粪便微生物多样性的分析 |
| 3.3.6 菌群结构与分布 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 FM对肠道微生物的影响 |
| 3.4.2 FM对细胞因子的影响 |
| 3.4.3 FM对母猪繁殖性能的影响 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 母猪妊娠期摄入纯化复合膳食纤维对其后代仔猪肠道微生物组成及免疫的影响 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试验动物与设计 |
| 4.2.2 测定指标及方法 |
| 4.2.3 数据统计与分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 新生仔猪器官指数 |
| 4.3.2 母猪泌乳期粪便SCFAs水平 |
| 4.3.3 后代仔猪血清免疫球蛋白及补体蛋白水平 |
| 4.3.4 后代仔猪血清细胞因子水平 |
| 4.3.5 微生物多样性分析 |
| 4.3.6 菌群结构与分布 |
| 4.3.7 仔猪组织TLRs m RNA表达 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 FM对初生仔猪器官发育的影响 |
| 4.4.2 FM对后代仔猪肠道微生物区系的影响 |
| 4.4.3 FM对后代仔猪免疫性能的影响 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 母猪妊娠期摄入膳食纤维对其后代抵抗应激反应的影响 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 试验材料 |
| 5.2.2 试验动物及日粮 |
| 5.2.3 试验设计及饲养管理 |
| 5.2.4 检测指标 |
| 5.2.5 数据统计与分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 仔猪生产性能 |
| 5.3.2 LPS攻毒对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响 |
| 5.3.3 LPS攻毒对断奶仔猪血清细胞因子的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 复合膳食纤维对断奶仔猪肠道微生物和代谢组的影响 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 试验材料 |
| 6.2.2 试验设计及日粮 |
| 6.2.3 饲养管理 |
| 6.2.4 样品收集 |
| 6.2.5 检测指标 |
| 6.2.6 数据统计与分析 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 微生物多样性分析 |
| 6.3.2 菌群结构与分布 |
| 6.3.3 代谢组分析 |
| 6.4 讨论 |
| 6.4.1 FM对仔猪肠道微生物区系的影响 |
| 6.4.2 FM对仔猪肠道代谢组学的影响 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 结论与展望 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 主要创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（4）功能性纤维通过调节肠道微生物改善机体胰岛素敏感性作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表(Abbreviation) |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 前言 |
| 2. 胰岛素抵抗 |
| 2.1 胰岛素抵抗的概念 |
| 2.2 妊娠与胰岛素抵抗 |
| 2.2.1 妊娠与围产期胰岛素抵抗 |
| 2.2.2 影响妊娠母体胰岛素抵抗的因素 |
| 2.3 肥胖与胰岛素抵抗 |
| 2.3.1 肥胖与胰岛素抵抗 |
| 2.3.2 影响肥胖个体胰岛素抵抗的因素 |
| 3. 肠道微生物 |
| 3.1 不同肠段微生物组成变化 |
| 3.2 肠道微生物与围产期胰岛素抵抗 |
| 3.2.1 妊娠过程中肠道微生物组成变化 |
| 3.2.2 肠道微生物对围产期胰岛素抵抗的影响 |
| 3.3 肠道微生物与肥胖及胰岛素抵抗 |
| 3.3.1 肥胖个体肠道微生物组成的变化 |
| 3.3.2 肠道微生态失衡对肥胖及相关代谢的影响 |
| 4. 膳食纤维 |
| 4.1 膳食纤维调节肠道微生物组成与代谢 |
| 4.1.1 对肠道微生物组成的影响 |
| 4.1.2 对肠道微生物代谢的影响 |
| 4.2 膳食纤维对机体代谢的调节 |
| 4.2.1 膳食纤维减少能量摄入,促进能量消耗 |
| 4.2.2 膳食纤维改善肠道屏障功能 |
| 4.2.3 膳食纤维降低系统性炎症 |
| 4.2.4 膳食纤维调节胰岛素敏感性 |
| 4.3 新型功能性纤维 |
| 5. 间歇性禁食与肥胖 |
| 5.1 间歇性禁食 |
| 5.2 间歇性禁食改善肥胖及相关代谢紊乱 |
| 5.3 间歇性禁食对肠道微生物组成的影响 |
| 6. 研究目的和意义 |
| 第二章 功能性纤维对母猪繁殖性能及围产期胰岛素敏感性的影响 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料与方法 |
| 2.1 试验动物与分组 |
| 2.2 试验日粮 |
| 2.3 饲养管理 |
| 2.4 母猪性能 |
| 2.4.1 母猪体况及采食量 |
| 2.4.2 母猪繁殖性能 |
| 2.5 母猪围产期胰岛素敏感性测定 |
| 2.5.1 餐试验 |
| 2.5.2 颈外静脉注射葡萄糖耐受试验 |
| 2.6 母猪繁殖周期进程性氧化应激相关指标测定 |
| 2.7 特异性菌群定量分析 |
| 2.8 数据统计 |
| 3. 结果 |
| 3.1 繁殖周期母猪样本数变化情况 |
| 3.2 妊娠日粮添加功能性纤维对母猪繁殖性能的影响 |
| 3.2.1 母猪妊娠期及泌乳期采食量 |
| 3.2.2 母猪体重、背膘厚度和断奶至发情间隔天数 |
| 3.2.3 母猪产仔性能及仔猪生长性能 |
| 3.3 母猪围产期胰岛素敏感性 |
| 3.4 血浆中ROS、氧化应激产物和抗氧化酶活力 |
| 3.5 氧化应激和胰岛素敏感性指标与繁殖性能相关性分析 |
| 3.6 母猪粪便中特异性微生物丰度变化 |
| 4. 讨论 |
| 第三章 功能性纤维对高脂日粮诱导的肥胖小鼠体重及胰岛素敏感性的影响 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 体重及采食量 |
| 2.3 样品采集 |
| 2.4 饱感激素PYY、GLP-1测定 |
| 2.5 附睾白色脂肪组织形态学观察 |
| 2.6 肝脏油红O染色 |
| 2.7 血清脂质组成测定 |
| 2.8 葡萄糖及胰岛素耐受实验 |
| 2.9 血清炎性因子测定 |
| 2.10 结肠组织形态学观察 |
| 2.11 结肠细胞更新率测定 |
| 2.12 结肠紧密连接蛋白基因mRNA表达测定 |
| 2.13 粪便SCFAs测定 |
| 2.14 粪便总微生物数量测定 |
| 2.15 微生物16S rRNA基因测序 |
| 2.15.1 DNA提取,16S rRNA基因扩增和Illumina Miseq测序 |
| 2.15.2 序列过滤,OTU聚类和序列分析 |
| 2.16 数据处理及统计 |
| 3. 结果 |
| 3.1 高脂日粮诱导肥胖模型的构建 |
| 3.2 采食量及饱感 |
| 3.3 肥胖相关指标 |
| 3.4 脂质代谢 |
| 3.5 胰岛素敏感性 |
| 3.6 结肠屏障功能 |
| 3.7 血清炎性因子 |
| 3.8 粪便中SCFAs |
| 3.9 粪便微生物组成 |
| 3.9.1 总微生物数量 |
| 3.9.2 微生物多样性 |
| 3.9.3 微生物组成 |
| 3.10 肠道微生物与肥胖及代谢表型的相关性分析 |
| 4. 讨论 |
| 第四章 功能性纤维对高脂日粮诱导的肥胖小鼠不同肠段微生物组成变化的影响 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 样品采集 |
| 2.3 微生物16S rRNA基因测序 |
| 2.4 数据处理及统计 |
| 3. 结果 |
| 3.1 不同肠段微生物多样性的变化 |
| 3.1.1 α多样性 |
| 3.1.2 β多样性 |
| 3.2 不同肠段微生物组成变化 |
| 3.3 不同肠段微生物组成与肥胖小鼠肥胖及代谢表型的相关性分析 |
| 4. 讨论 |
| 第五章 功能性纤维联合间歇性禁食对高脂日粮诱导肥胖小鼠胰岛素敏感性的影响 |
| 1. 前言 |
| 2. 材料与方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 体重和采食量 |
| 2.3 样品采集 |
| 2.4 饱感激素PYY、GLP-1测定 |
| 2.5 附睾白色脂肪组织形态学观察 |
| 2.6 肝脏油红O染色 |
| 2.7 血清脂质组成测定 |
| 2.8 葡萄糖耐受试验和胰岛素耐受试验 |
| 2.9 结肠组织形态学观察 |
| 2.10 结肠细胞更新率的测定 |
| 2.11 结肠紧密连接蛋白基因mRNA表达测定 |
| 2.12 附睾白色脂肪组织产热相关基因的表达 |
| 2.13 粪便SCFAs测定 |
| 2.14 粪便总微生物数量测定 |
| 2.15 粪便微生物16S rRNA基因测序 |
| 2.16 数据处理及统计 |
| 3. 结果 |
| 3.1 能量摄入及饱感 |
| 3.2 肥胖相关指标 |
| 3.3 脂质代谢 |
| 3.4 胰岛素敏感性 |
| 3.5 血清炎性因子 |
| 3.6 肠道屏障功能 |
| 3.7 脂肪细胞产热相关基因的表达 |
| 3.8 粪便中SCFAs |
| 3.9 肠道微生物组成 |
| 3.10 肠道微生物与胰岛素敏感性的相关性分析 |
| 4. 讨论 |
| 第六章 总体讨论和结语 |
| 1. 总体讨论 |
| 2. 主要结论 |
| 3. 创新点 |
| 4. 研究不足之处与展望 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ 研究生期间发表的主要论文 |
| 致谢 |
（5）母猪繁殖性状相关候选基因多态性及其与产仔数和乳头数的关联分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 产仔数和乳头数的影响因素 |
| 1.3 单核苷酸多态性(SNP)及分子标记辅助选择应用 |
| 1.4 本研究涉及候选基因的研究进展 |
| 1.4.1 ESR1基因 |
| 1.4.2 DPPA5基因 |
| 1.4.3 EPOR基因 |
| 1.4.4 LEPR基因 |
| 1.4.5 VEGFA基因 |
| 1.4.6 OPN基因 |
| 1.4.7 PTGS2基因 |
| 1.4.8 RBP4基因 |
| 1.4.9 LIF基因 |
| 1.4.10 PRLR基因 |
| 1.4.11 IGFBP1和IGFBP2基因 |
| 1.5 研究目的和意义 |
| 第二章 大白猪、巴马香猪繁殖性状描述性统计 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 数据来源 |
| 2.2.2 数据资料统计与分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 巴马香猪与大白猪繁殖性状的描述性统计 |
| 2.3.2 胎次对巴马香猪和大白猪窝产仔数的影响 |
| 2.3.3 品种对猪窝产仔数的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 不同品种对猪窝产仔数的影响 |
| 2.4.2 胎次对猪窝产仔数的影响 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 大白猪、巴马香猪繁殖性状相关基因SNP的筛选 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 试验材料 |
| 3.2.1 母猪样品及生产数据的记录 |
| 3.2.2 主要试剂 |
| 3.2.3 主要设备仪器 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 猪基因组DNA提取 |
| 3.3.2 DNA纯度和浓度检测 |
| 3.3.3 引物的设计以及PCR过程 |
| 3.3.4 数据分析 |
| 3.3.5 多重PCR结合二代测序检验SNP多态性 |
| 3.3.6 基因的群体遗传学统计分析 |
| 3.4 试验结果 |
| 3.4.1 不同品种母猪基因组DNA提取结果 |
| 3.4.2 PCR扩增效果 |
| 3.4.3 基因分型结果 |
| 3.4.4 基因遗传学分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 大白猪、巴马香猪相关基因SNP与繁殖性状的关联分析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 数据资料的统计分析 |
| 4.2.2 基因多态性与繁殖性状的关联分析 |
| 4.2.3 连锁不平衡检验及单倍型分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 基因多态性位点与产仔数性状的关联分析 |
| 4.3.2 基因多态性位点与巴马香猪乳头数性状的关联分析 |
| 4.3.3 SNP位点单倍型分析 |
| 4.3.4 单倍型和繁殖性状关联分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 ESR1基因SNP多态性与产仔数性状的关联分析 |
| 4.4.2 DPPA5基因SNP多态性与产仔数性状的关联分析 |
| 4.4.3 EPOR基因SNP多态性与产仔数性状的关联分析 |
| 4.4.4 LEPR基因SNP多态性与产仔数性状的关联分析 |
| 4.4.5 FUT1基因SNP多态性与产仔数性状的关联分析 |
| 4.4.6 VEGFA基因SNP多态性与繁殖性状的关联分析 |
| 4.4.7 OPN基因SNP多态性与产仔数性状的关联分析 |
| 4.4.8 其它候选基因SNP多态性与繁殖性状的关联分析 |
| 4.4.9 基因多态性位点间连锁不平衡及单倍型分析 |
| 4.5 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
（6）基于基因组信息对金华猪种质特性及其保护、利用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 文章部分缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 金华猪概况 |
| 1.1.1 产地分布及品种形成 |
| 1.1.2 种质特性 |
| 1.1.3 保种现状 |
| 1.1.4 研究进展 |
| 1.1.5 主要问题 |
| 1.2 猪的基因组研究 |
| 1.2.1 猪基因组的组装 |
| 1.2.2 基因组测序在猪中的应用 |
| 1.3 分子种质特性研究方法 |
| 1.3.1 遗传变异检测 |
| 1.3.2 基因组结构分析 |
| 1.3.3 基因组功能注释 |
| 1.3.4 选择信号分析 |
| 1.4 家畜遗传资源的保护 |
| 1.4.1 家畜遗传多样性 |
| 1.4.2 遗传多样性检测方法 |
| 1.4.3 在分子水平上评估遗传多样性的指标 |
| 1.4.4 保种相关理论和方法 |
| 1.4.5 保种方式 |
| 1.5 遗传资源的利用 |
| 1.5.1 利用的必要性 |
| 1.5.2 利用的主要途径 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 2 金华猪在遗传资源分类中的地位 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物与样品 |
| 2.1.2 主要试剂及其来源 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 |
| 2.1.4 基因组DNA的提取及质量检测 |
| 2.1.5 文库的构建及测序 |
| 2.1.6 测序数据分析及存贮 |
| 2.1.7 群体及SNPs检测 |
| 2.1.8 群体遗传距离分析 |
| 2.1.9 群体遗传分化 |
| 2.1.10 群体遗传结构分析 |
| 2.1.11 群体迁移分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 测序数据分析结果 |
| 2.2.2 SNPs的数量和频率分布 |
| 2.2.3 金华猪与其它群体间的遗传距离 |
| 2.2.4 群体间遗传分化结果 |
| 2.2.5 群体遗传结构结果 |
| 2.2.6 群体迁移分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 金华猪的基因组测序及遗传变异检测 |
| 2.3.2 金华猪在遗传资源分类的地位 |
| 2.4 小结 |
| 3 金华猪的分子种质特性研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 基因组结构分析 |
| 3.1.2 基因组功能分析 |
| 3.1.3 金华猪群体内选择信号检测 |
| 3.1.4 群体间选择信号检测 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 SNPs在基因组上的分布 |
| 3.2.2 群体单倍型块构建 |
| 3.2.3 群体ROH分布 |
| 3.2.4 金华猪群体内选择信号分析 |
| 3.2.5 群体间选择信号分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 基因组结构上的分析 |
| 3.3.2 选择信号分析 |
| 3.4 小结 |
| 4 金华猪易感猪支原体肺炎遗传机制的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 生物信息学挖掘方法 |
| 4.1.2 全基因组关联分析 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 生物信息学挖掘结果 |
| 4.2.2 全基因组关联分析结果 |
| 4.2.3 候选基因的验证 |
| 4.3 小结 |
| 5 金华猪保种效果分析 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 基于系谱的近交系数计算 |
| 5.1.2 繁殖性能育种值评估 |
| 5.1.3 在群金华猪近交系数、亲缘系数计算和群体结构分析 |
| 5.1.4 在群金华猪群体有效含量估计 |
| 5.1.5 群体遗传多样性分析 |
| 5.1.6 遗传近交程度估计 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 金华猪历年近交系数变化 |
| 5.2.2 金华猪历年繁殖性能变化 |
| 5.2.3 在群金华猪近交系数、亲缘系数和群体结构 |
| 5.2.4 在群金华猪群体有效含量 |
| 5.2.5 群体遗传多样性分析结果 |
| 5.2.6 群体近交程度估计 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 6 金华猪的最宜杂交配套模式 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 杂种优势预测方法 |
| 6.1.2 配合力测定试验方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 杂种优势预测结果 |
| 6.2.2 配合力测定试验结果 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 杂种优势预测 |
| 6.3.2 配合力测定试验 |
| 6.4 小结 |
| 7 结语 |
| 7.1 具体工作及结果 |
| 7.2 论文创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 论文中的附表 |
| 附录2 论文中其它附件 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间取得的主要成果 |
| 学术论文 |
| 专利 |
（7）纤维营养对妊娠母猪繁殖性能和肠道菌群的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 日粮纤维的定义及性质 |
| 1.2 纤维对母猪繁殖性能的影响 |
| 1.2.1 纤维水平对母猪繁殖性能的影响 |
| 1.2.2 纤维类型对母猪繁殖性能的影响 |
| 1.3 纤维影响母猪繁殖性能的可能机制 |
| 1.3.1 纤维提高妊娠母猪饱腹感,降低刻板行为 |
| 1.3.2 纤维调控母猪繁殖激素的分泌 |
| 1.3.3 纤维对胎盘发育和功能的影响 |
| 1.3.4 纤维对母猪泌乳期采食量的影响 |
| 1.3.5 纤维对肠道菌群及其代谢产物的影响 |
| 1.4 有待研究的问题 |
| 第二章 研究目的、意义和内容 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究意义 |
| 2.3 技术路线 |
| 2.4 研究内容 |
| 第三章 试验研究 |
| 试验一妊娠期日粮添加纤维对母猪连续三胎繁殖性能和粪便菌群的影响 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.2.1 试验动物及处理 |
| 1.2.2 试验饲粮 |
| 1.2.3 饲养管理 |
| 1.2.4 样品采集 |
| 1.2.5 测定指标及方法 |
| 1.2.6 统计分析 |
| 1.3 结果与分析 |
| 1.3.1 妊娠期日粮添加纤维对母猪连续三胎繁殖性能的影响 |
| 1.3.2 妊娠期日粮添加纤维对母猪粪便评分的影响 |
| 1.3.3 妊娠期日粮添加纤维对母猪血浆激素的影响 |
| 1.3.4 妊娠期日粮添加纤维对母猪粪便菌群的影响 |
| 1.4 讨论 |
| 1.4.1 妊娠期日粮添加纤维对母猪连续三胎繁殖性能的影响 |
| 1.4.2 妊娠期日粮添加纤维对母猪便秘和产程的影响 |
| 1.4.3 妊娠期日粮添加纤维对母猪粪便菌群的影响及其与繁殖性能的关系 |
| 1.5 小结 |
| 试验二妊娠期日粮添加纤维对母猪粪便微生物组和血浆代谢物的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试验设计 |
| 2.2.1 动物的选择及处理 |
| 2.2.2 试验饲粮 |
| 2.2.3 饲养管理 |
| 2.2.4 样品采集 |
| 2.2.5 测定指标及方法 |
| 2.2.6 统计分析 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎血液指标的影响 |
| 2.3.2 血浆代谢组学分析 |
| 2.3.3 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎血清中血清素水平的影响 |
| 2.3.4 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎粪便挥发性脂肪酸的影响 |
| 2.3.5 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎胎盘激素水平的影响 |
| 2.3.6 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎胎盘基因相对表达量的影响 |
| 2.3.7 粪便宏基因组学分析 |
| 2.3.8 宏基因组和代谢组学关联性分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎粪便微生物种类和功能的影响 |
| 2.4.2 妊娠期日粮添加纤维对母猪第三胎胎盘发育和功能的影响 |
| 2.4.3 妊娠期日粮添加纤维改善母猪繁殖性能的微生物途径 |
| 2.5 结论 |
| 试验三日粮纤维对妊娠母猪结肠和胎盘血清素水平的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 动物的选择及处理 |
| 3.2.2 试验饲粮 |
| 3.2.3 饲养管理 |
| 3.2.4 样品采集 |
| 3.2.5 指标测定 |
| 3.2.6 统计分析 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 日粮纤维对母猪胎儿数和胎儿总重的影响 |
| 3.3.2 日粮纤维对妊娠母猪结肠食糜挥发性脂肪酸浓度的影响 |
| 3.3.3 日粮纤维对妊娠母猪血清素浓度的影响 |
| 3.3.4 日粮纤维对妊娠母猪结肠TPH1和SERT表达量的影响 |
| 3.3.5 日粮纤维对妊娠母猪胎盘TPH1和SERT表达量的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 试验四妊娠期日粮纤维比例对母猪连续四胎繁殖性能和粪便菌群的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 动物选择及处理 |
| 4.2.2 试验饲粮 |
| 4.2.3 饲养管理 |
| 4.2.4 样品采集 |
| 4.2.5 指标测定 |
| 4.2.6 统计分析 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 妊娠期日粮纤维比例对母猪连续四胎繁殖性能的影响 |
| 4.3.2 妊娠期日粮纤维比例对母猪粪便评分的影响 |
| 4.3.3 妊娠期日粮纤维比例对母猪血液指标的影响 |
| 4.3.4 妊娠期日粮纤维比例对母猪粪便VFAs的影响 |
| 4.3.5 妊娠期日粮纤维比例对母猪胎盘激素水平的影响 |
| 4.3.6 妊娠期日粮纤维比例对母猪胎盘基因表达量的影响 |
| 4.3.7 妊娠期日粮纤维比例对母猪粪便菌群的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 妊娠期日粮纤维比例对母猪连续四胎繁殖性能的影响 |
| 4.4.2 妊娠期日粮纤维比例对母猪分娩产程的影响 |
| 4.4.3 妊娠期日粮纤维比例对母猪粪便微生物的影响 |
| 4.5 小结 |
| 试验五母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪肠道发育、抗氧化能力和肠道菌群的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 试验设计 |
| 5.2.1 动物选择及处理 |
| 5.2.2 饲养管理 |
| 5.2.3 样品采集 |
| 5.2.4 指标测定 |
| 5.2.5 统计分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪肠道发育的影响 |
| 5.3.2 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪肠道形态的影响 |
| 5.3.3 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪肠道酶活的影响 |
| 5.3.4 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪炎症因子的影响 |
| 5.3.5 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生猪血浆和肝脏抗氧化能力的影响 |
| 5.3.6 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪肝脏基因表达量的影响 |
| 5.3.7 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪结肠短链脂肪酸水平的影响 |
| 5.3.8 母猪妊娠期日粮纤维比例对新生仔猪结肠微生物的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第四章 总体讨论和结论 |
| 4.1 总体讨论 |
| 4.1.1 妊娠期日粮纤维水平和比例对母猪繁殖性能的影响 |
| 4.1.2 妊娠期日粮纤维影响母猪繁殖性能的微生物途径 |
| 4.1.3 母体纤维营养对后代肠道菌群的影响 |
| 4.2 全文结论 |
| 4.3 创新点 |
| 4.4 研究不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（8）妊娠期功能性日粮纤维对母猪围产期代谢综合征和仔猪肠道发育的作用及其机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 前言 |
| 2 代谢综合征 |
| 2.1 代谢综合征的定义、病因和危害 |
| 2.2 围产期代谢综合征 |
| 2.3 围产期代谢综合征的影响 |
| 2.3.1 对孕妇的影响 |
| 2.3.2 对母猪的影响 |
| 2.3.3 对子代的影响 |
| 2.4 影响围产期代谢综合征的因素 |
| 3 肠道菌群 |
| 3.1 猪肠道菌群的组成和功能 |
| 3.2 新生仔猪肠道菌群的定植和发育 |
| 3.3 妊娠和泌乳母体肠道菌群的变化及其影响因素 |
| 3.4 肠道菌群对围产期代谢综合征的影响 |
| 4 母代肠道菌群对子代肠道菌群发育的影响 |
| 4.1 母代肠道菌群影响胎儿肠道菌群的组成 |
| 4.2 母代肠道菌群影响母乳菌群组成调控子代肠道菌群组成 |
| 4.3 根源分析技术解析子代肠道菌群的来源 |
| 5 日粮纤维与肠道菌群 |
| 5.1 日粮纤维对肠道菌群的影响 |
| 5.2 日粮纤维的菌群代谢产物的种类及生成途径 |
| 5.2.1 短链脂肪酸 |
| 5.2.2 其它代谢产物 |
| 5.3 日粮纤维及其代谢物对肠道健康和机体代谢的影响 |
| 5.3.1 对肠道粘膜屏障的影响 |
| 5.3.2 对肠道和系统性炎症的影响 |
| 5.3.3 日粮纤维对围产期代谢综合征的影响 |
| 5.4 妊娠期日粮纤维对子代的影响 |
| 5.4.1 对子代肠道菌群的影响 |
| 5.4.2 对子代免疫系统的影响 |
| 6 研究目的和意义 |
| 第二章 妊娠后期肥胖对母猪围产期代谢及仔猪生长发育的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 饲养管理和试验记录 |
| 2.3 母猪背膘厚度的测定 |
| 2.4 仔猪性能测定 |
| 2.5 样品收集 |
| 2.6 代谢和免疫相关指标分析 |
| 2.7 数据统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 妊娠后期母猪背膘过厚对仔猪性能的影响 |
| 3.2 妊娠后期背膘过厚对母猪围产期代谢综合征的影响 |
| 3.3 妊娠后期背膘过厚对母猪围产期氧化应激状态的影响 |
| 3.4 妊娠后期背膘过厚对母猪肠道炎症和肠道渗透性的影响 |
| 3.5 妊娠后期背膘过厚对仔猪肠道炎症和肠道渗透性的影响 |
| 3.6 妊娠后期背膘过厚对仔猪免疫系统的影响 |
| 4 讨论 |
| 第三章 肠道菌群及其代谢物影响母猪围产期代谢的机制 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 饲养管理和试验记录 |
| 2.3 样品收集 |
| 2.4 粪样短链脂肪酸测定 |
| 2.5 代谢相关标记物分析 |
| 2.6 菌群16S rRNA基因测序 |
| 2.6.1 DNA提取,16S rRNA基因扩增和Illumina Miseq测序 |
| 2.6.2 序列过滤,OTU聚类和序列分析 |
| 2.7 数据统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 繁殖周期不同阶段母猪胰岛素敏感性和系统性炎症的变化情况 |
| 3.2 繁殖周期不同阶段母猪肠道菌群组成的变化情况 |
| 3.3 繁殖周期不同阶段母猪肠道菌群多样性的变化情况 |
| 3.4 繁殖周期不同阶段母猪肠道菌群代谢产物的变化情况 |
| 3.5 繁殖周期不同阶段母猪肠道渗透性和血浆内毒素的变化情况 |
| 3.6 繁殖周期不同阶段母猪肠道炎症的变化情况 |
| 3.7 关键肠道菌群与肠道渗透性及炎症指标的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 第四章 功能性日粮纤维调控母猪肠道菌群改善围产期代谢综合征的作用和机制 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 饲养管理和试验记录 |
| 2.3 样品收集 |
| 2.4 粪样和血样丁酸测定 |
| 2.5 代谢相关标记物分析 |
| 2.6 菌群16S rRNA基因测序 |
| 2.6.1 DNA提取,16S rRNA基因扩增和Illumina Miseq测序 |
| 2.6.2 序列过滤,OTU聚类和序列分析 |
| 2.7 数据统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 妊娠期功能性日粮纤维对母猪围产期代谢综合征的影响 |
| 3.2 妊娠期功能性日粮纤维对母猪肠道菌群和丁酸产量的影响 |
| 3.3 妊娠期功能性日粮纤维对母猪肠道渗透性和血浆内毒素的影响 |
| 3.4 妊娠期功能性日粮纤维对母猪肠道局部炎症的影响 |
| 3.5 产LPS和产丁酸细菌与代谢指标的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 第五章 妊娠期功能性日粮纤维对母猪乳成分和菌群的调控作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 饲养管理和试验记录 |
| 2.3 样品收集 |
| 2.4 乳样常规营养成分分析 |
| 2.5 菌群16S rRNA基因测序 |
| 2.5.1 DNA提取,16S rRNA基因扩增和Illumina Miseq测序 |
| 2.5.2 序列过滤,OTU聚类和序列分析 |
| 2.6 数据统计与分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 妊娠期功能性日粮纤维对母猪乳成分的影响 |
| 3.2 妊娠期功能性日粮纤维对母猪乳样菌群α多样性的影响 |
| 3.3 妊娠期功能性日粮纤维对母猪乳样菌群β多样性的影响 |
| 3.4 母猪乳样菌群门和属水平的整体组成 |
| 3.5 妊娠期日粮纤维对母猪乳样菌群组成的影响 |
| 4 讨论 |
| 第六章 妊娠期功能性日粮纤维调控仔猪肠道菌群增强肠道屏障和免疫功能的效果研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验动物与日粮 |
| 2.2 饲养管理和试验记录 |
| 2.3 仔猪生长性能和腹泻率测定 |
| 2.4 样品收集 |
| 2.5 粪样和血浆短链脂肪酸测定 |
| 2.6 血浆激素和肠道屏障、免疫及炎症指标分析 |
| 2.7 菌群16S rRNA基因测序 |
| 2.7.1 DNA提取,16S rRNA基因扩增和Illumina Miseq测序 |
| 2.7.2 序列过滤,OTU聚类和序列分析 |
| 2.8 数据统计与分析 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪生长性能和腹泻情况的影响 |
| 3.2 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪生长激素轴的影响 |
| 3.3 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪肠道菌群多样性的影响 |
| 3.4 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪肠道菌群组成的影响 |
| 3.5 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪肠道菌群代谢功能的影响 |
| 3.6 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪肠道菌群代谢产物的影响 |
| 3.7 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪肠道屏障功能的影响 |
| 3.8 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪肠道炎症的影响 |
| 3.9 妊娠期功能性日粮纤维对哺乳仔猪免疫系统的影响 |
| 3.10 差异菌群和生长性能及肠道功能指标的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 第七章 总体讨论和结语 |
| 1 总体讨论 |
| 2 研究结论 |
| 3 创新点 |
| 4 研究不足之处与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 I研究生期间发表的主要论文 |
| 致谢 |
（9）母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道屏障和胎盘营养物质转运的影响及机理研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 (Abbreviations) |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 妊娠后期和哺乳期母-仔猪生长代谢规律 |
| 1.1.1 妊娠后期-哺乳期母猪生长代谢规律 |
| 1.1.2 胎盘营养物质转运功能 |
| 1.1.2.1 胎盘营养物质转运过程 |
| 1.1.2.2 胎盘mTORC1-PPARs信号途径 |
| 1.1.3 仔猪肠道发育规律 |
| 1.2 核苷酸研究进展 |
| 1.2.1 酵母核苷酸组成 |
| 1.2.2 核苷酸在动物机体中的代谢 |
| 1.2.3 外源核苷酸对母猪生产性能的影响 |
| 1.2.4 外源核苷酸对肠道发育的影响 |
| 1.2.4.1 外源核苷酸对机体肠道生长发育和成熟的影响 |
| 1.2.4.2 外源核苷酸对机体肠道损伤后的修复的影响 |
| 1.2.4.3 外源核苷酸对机体肠道免疫功能的影响 |
| 第二章 母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道屏障和胎盘营养物质转运的影响及机制研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验仪器和试剂 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 试验设计 |
| 2.3.2 试验日粮组成及营养水平 |
| 2.3.3 技术路线 |
| 2.3.4 样品采集及测定指标和方法 |
| 2.3.4.1 母猪生产性能 |
| 2.3.4.2 胎盘组织样品 |
| 2.3.4.3 新生仔猪血清和肠道样品 |
| 2.3.5 指标检测与方法 |
| 2.3.5.1 酶联试剂盒检测血浆D-lactate和 DAO活性 |
| 2.3.5.2 HE染色技术检测仔猪肠道绒毛形态 |
| 2.3.5.3 实时-聚合酶链式反应检测基因表达水平 |
| 2.3.5.4 蛋白免疫印迹检测蛋白表达水平 |
| 2.4 数据处理与分析 |
| 2.5 结果与分析 |
| 2.5.1 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对母猪生产性能的影响 |
| 2.5.2 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪血清D-lactate和 DAO浓度的影响 |
| 2.5.3 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道形态的影响 |
| 2.5.4 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道紧密连接蛋白mRNA表达的影响 |
| 2.5.5 .妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对肠道细胞因子mRNA表达的影响 |
| 2.5.6 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对胎盘营养物质转运的影响 |
| 2.6 讨论 |
| 2.6.1 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对母猪生产性能的影响 |
| 2.6.2 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道绒毛发育的影响 |
| 2.6.3 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道紧密连接蛋白mRNA的影响 |
| 2.6.4 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道细胞因子mRNA表达的影响 |
| 2.6.5 妊娠后期母猪日粮添加酵母核苷酸对胎盘营养物质转运的影响 |
| 第三章 总结与建议 |
| 3.1 主要结论 |
| 3.2 创新点 |
| 3.3 有待进一步研究的问题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）三个品系大白猪的ESR、FSHβ和PRLR基因多态性及其与产仔性状的关联分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 前言 |
| 2 大白猪品种及不同品系介绍 |
| 2.1 大白猪 |
| 2.2 美系、丹系、加系大白猪 |
| 3 分子标记技术的研究概述 |
| 3.1 扩增片段长度多态性技术(AFLP) |
| 3.2 随机扩增多态性DNA技术(RAPD) |
| 3.3 限制性片段长度多态性技术(RFLP) |
| 3.4 单核苷酸多态性(SNP) |
| 3.5 单链构象多态性技术(SSCP) |
| 3.6 简单重复序列技术(SSR) |
| 4 线粒体基因研究概况 |
| 4.1 线粒体D-loop基因简介 |
| 4.2 线粒体基因多态性在猪种分子系统学研究中的应用 |
| 5 雌激素受体基因(ESR)研究概况 |
| 5.1 ESR基因的发现与结构 |
| 5.2 ESR的生物学作用 |
| 5.3 ESR基因与产仔数性状的相关性研究 |
| 6 卵泡刺激素β亚基基因(FSHβ)研究概况 |
| 6.1 FSHβ基因的发现与结构 |
| 6.2 FSHβ的生物学作用 |
| 6.3 FSHβ基因与产仔数性状的相关性研究 |
| 7 催乳素受体基因(PRLR)研究概况 |
| 7.1 PRLR基因的发现与结构 |
| 7.2 PRLR的生物学作用 |
| 7.3 PRLR基因与产仔数性状的相关性研究 |
| 8 研究目的与意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 1 试验材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 主要试验仪器及设备 |
| 1.3 主要试验试剂及配制 |
| 1.4 分析软件 |
| 2 试验方法及步骤 |
| 2.1 基因组DNA提取 |
| 2.2 DNA纯度及浓度检测 |
| 2.3 目的片段PCR扩增 |
| 3 数据处理及分析 |
| 3.1 遗传多态性分析及系统发育树构建 |
| 3.2 基因及基因型频率计算 |
| 3.3 Hardy-Weinberg平衡检验 |
| 3.4 多态信息含量(PIC)计算 |
| 3.5 连锁不平衡及单倍型构建 |
| 3.6 ESR、FSHβ、PRLR基因与产仔性状的相关性分析 |
| 第三章 结果与分析 |
| 1 毛囊基因组DNA提取效果 |
| 2 线粒体基因D-loop区多态性及系统发育分析 |
| 2.1 PCR扩增产物检测 |
| 2.2 遗传多样性分析 |
| 2.3 系统发育树构建 |
| 3 ESR基因多态性及关联分析 |
| 3.1 ESR基因PCR扩增产物检测 |
| 3.2 ESR基因SNPs位点检测 |
| 3.3 ESR基因的等位基因频率及基因型频率 |
| 3.4 ESR基因连锁不平衡及单倍型分析 |
| 3.5 ESR基因与大白猪产仔性状的关联性分析 |
| 4 FSHβ基因多态性及关联分析 |
| 4.1 FSHβ基因PCR扩增产物检测 |
| 4.2 FSHβ基因SNPs位点检测 |
| 4.3 FSHβ基因的等位基因频率及基因型频率 |
| 4.4 FSHβ基因连锁不平衡及单倍型分析 |
| 4.5 FSHβ基因与大白猪产仔性状的关联性分析 |
| 5 PRLR基因多态性及关联分析 |
| 5.1 PRLR基因PCR扩增产物检测 |
| 5.2 PRLR基因SNPs位点检测 |
| 5.3 PRLR基因的等位基因频率及基因型频率 |
| 5.4 PRLR基因连锁不平衡及单倍型分析 |
| 5.5 PRLR基因与大白猪产仔性状的关联性分析 |
| 第四章 讨论 |
| 1 关于毛囊基因组DNA提取 |
| 2 线粒体DNA多态性 |
| 3 ESR基因 |
| 3.1 ESR基因多态性 |
| 3.2 ESR基因与猪产仔性状的关系 |
| 4 FSHβ基因 |
| 4.1 FSHβ基因多态性 |
| 4.2 FSHβ基因与猪产仔性状的关系 |
| 5 PRLR基因 |
| 5.1 PRLR基因多态性 |
| 5.2 PRLR基因与猪产仔性状的关系 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
四、提高母猪繁殖性能的三种主要技术途径（论文参考文献）
- [1]甘氨酸铁和氨基乙酰丙酸对大鼠和猪铁状况的影响[D]. 李军辉. 山东农业大学, 2021(01)
- [2]肠道菌群干预对母猪卵巢和子宫发育的作用及其机制[D]. 徐保阳. 华中农业大学, 2021(02)
- [3]纯化膳食纤维对母猪繁殖性能及其和后代肠道微生物区系的影响[D]. 伍剑. 广西大学, 2020(07)
- [4]功能性纤维通过调节肠道微生物改善机体胰岛素敏感性作用的研究[D]. 徐川辉. 华中农业大学, 2020(02)
- [5]母猪繁殖性状相关候选基因多态性及其与产仔数和乳头数的关联分析[D]. 张琰芳. 广西大学, 2020
- [6]基于基因组信息对金华猪种质特性及其保护、利用的研究[D]. 徐忠. 上海交通大学, 2020
- [7]纤维营养对妊娠母猪繁殖性能和肠道菌群的影响[D]. 李扬. 四川农业大学, 2019(06)
- [8]妊娠期功能性日粮纤维对母猪围产期代谢综合征和仔猪肠道发育的作用及其机制[D]. 成传尚. 华中农业大学, 2019(01)
- [9]母猪日粮添加酵母核苷酸对新生仔猪肠道屏障和胎盘营养物质转运的影响及机理研究[D]. 郜陆敏. 湖南农业大学, 2019
- [10]三个品系大白猪的ESR、FSHβ和PRLR基因多态性及其与产仔性状的关联分析[D]. 谢晶晶. 四川农业大学, 2019(01)