一、视网膜前膜内相关炎性细胞因子的免疫组化研究（论文文献综述）
陈小鸟[1]（2019）在《角膜损伤诱发视网膜炎症中巨噬/小胶质细胞的作用机制及拮抗炎性因子疗效的研究》文中进行了进一步梳理背景:临床的长期观察表明角膜损伤（创伤,化学伤,手术损伤等）通常可引起患者发生难治性的视网膜炎,并伴有类似青光眼的不可逆视神经损害,对患眼伤后（或术后）的视力恢复产生不良影响,严重者可因视网膜及视神经损害导致失明。近期有研究表明肿瘤坏死因子家族及白介素家族的细胞因子可能参与了角膜损伤相关视网膜炎症的发生与发展过程,但目前角膜损伤后相关视网膜神经细胞数量丢失及视网膜炎性细胞浸润的具体机制尚不明确,也没有防治此类视网膜损害的有效方法。目的:本研究拟通过建立四种不同的角膜损伤模型,探究角膜损伤过程中免疫细胞参与视网膜炎性反应的作用;证实角膜损伤后视网膜组织中出现巨噬/小胶质细胞及炎性因子的作用机制;观察不同的治疗方案对视网膜炎性反应的抑制及神经保护作用,为临床治疗提供新的思路。方法:1.建立四种不同的角膜急性损伤模型,所有组别均选用C57BL/6小鼠进行NaOH角膜化学烧伤,单根角膜缝线,同种同体穿透性角膜移植术,自同种同体穿透性角膜移植联合晶状体摘除术处理。2.在不同时间点收集角膜及视网膜标本进行qPCR,流式细胞术,TUNEL及激光共聚焦显微镜检测,观察炎性细胞因子的表达情况。3.制备骨髓移植模型,验证视网膜内巨噬/小胶质细胞激活的来源并进一步对免疫细胞进行鉴定;利用Thy1-YFP小鼠检验角膜损伤7天后的视网膜神经细胞生存率。4.分别对四组损伤模型小鼠应用糖皮质激素、TNF-α单克隆抗体及IL-1 β拮抗剂三种免疫抑制药物进行干预治疗,观察不同用药方案对免疫炎性因子的抑制作用。5.利用微流控单细胞测序技术,对视网膜不同来源的免疫细胞表型及免疫治疗效果进行初步分析。结果:1.烧伤后的角膜及视网膜组织中CD45+CD11b+炎性细胞所占比例明显升高（p<0.05）,具体分析可见角膜碱烧伤后视网膜细胞可分为CD45hiCD11b+及CD45loCD11b+两群,发现损伤后免疫细胞分别来自血液和视网膜本身,其中CX3CR1+CD45+CD1 1b+MHCII+细胞比例显着增加,证明外周来源的巨噬/小胶质细胞大量浸润并参与炎性反应过程（p<0.01）。碱烧伤后可见TNF-α,IL-1β两种细胞因子的表达在角膜与视网膜两种组织中均明显上调,证明伤后角膜与视网膜同时出现了炎性反应。后续使用CX3CR1GFP/+小鼠骨髓移植模型,通过共聚焦显微镜及流式细胞术的观察验证了碱烧伤后大量血液来源的巨噬/小胶质细胞激活并突破血眼屏障进入视网膜。2.小鼠行穿透性角膜移植术后,角膜及视网膜组织中的CD45+CD11b+炎性细胞比例均明显增多,其中 CX3CR1+CD45+CD1 1b+MHCII+细胞比例显着升高（p<0.01）,证实穿透性角膜移植术使视网膜巨噬/小胶质细胞进入了激活状态。qPCR结果显示移植术后的视网膜内TNF-α及IL-1β表达显着上调（p<0.001）。TUNEL实验证实穿透性角膜移植术后存在明显的视网膜细胞凋亡现象,通过CX3CR1GFP/+小鼠骨髓移植模型同样观察到手术后外周血来源的巨噬/神经小胶质细胞激活并突破血眼屏障进入视网膜,共聚焦显微镜证实移植术后的Thy-YFP小鼠视网膜神经细胞的数量明显减少（p<0.01）。3.三种角膜手术模型的qPCR结果显示,TNF-α,IL-1β,IL-6及相应受体的表达均显着升高,穿透性角膜移植术联合晶状体摘除术组的炎性因子表达均上调至对照组的135倍以上,直接证明三种角膜手术模型均可诱发视网膜炎性反应的假设。单根角膜缝线组的免疫治疗研究表明糖皮质激素对TNF-α的抑制作用明显弱于单用英夫利昔单抗或阿那白滞素以及联合用药（p<0.001）;穿透性角膜移植术组的结果显示四种治疗方案均有效果,但是特异性免疫抑制剂的作用仍优于糖皮质激素（p<0.001）;穿透性角膜移植加晶状体摘除术的损伤程度远超前两种手术模型,特异性免疫抑制剂联合治疗组下调炎性因子的效果优于单种药物应用或糖皮质激素（p<0.001）。另外,联合治疗组在穿透性角膜移植术后24小时显着减轻视网膜细胞凋亡,减少外周血来源的免疫细胞进入视网膜参与炎性反应;术后7天联合治疗组仍能维持理想的视网膜神经细胞数量,炎性细胞比例与正常对照组无明显差异,效果优于单用免疫抑制剂或糖皮质激素（p<0.05）。4.单细胞测序结果:角膜碱烧伤模型建立6周后,发现急性期特异性免疫抑制剂治疗组小鼠视网膜小胶质细胞/巨噬细胞的转录组信息与正常组小鼠类似;角膜碱烧伤模型建立2年后,发现未治疗组小鼠视网膜小胶质细胞和巨噬细胞的转录组都明显偏离静息小胶质细胞轴,特异性免疫抑制剂治疗组小鼠视网膜内的小胶质细胞/巨噬细胞仍能保持相对静息的状态,其基因组也没有发生剧烈变化的迹象。结论:1.本研究建立四种角膜损伤模型并进行对比,创新性提出角膜手术损伤诱发视网膜炎性反应的新观点;2.发现外周巨噬细胞浸润并突破血眼屏障与小胶质细胞共同参与视网膜组织的炎性反应,穿透性角膜移植术联合晶状体摘除术处理组的炎性反应表现最为严重,说明角膜手术损伤程度与炎性因子的表达正相关,为阐明角膜损伤相关视网膜病变的发生机制提供理论基础;3.为角膜损伤相关的视网膜炎性反应提出新的临床治疗方案,提示在损伤急性期特异性免疫抑制剂可减轻视网膜炎性因子的表达,证实阻断免疫细胞激活可有效抑制视网膜组织中的巨噬/小胶质细胞数量的增长,防止视网膜细胞损伤。4.单细胞mRNA测序结果表明角膜损伤急性期的免疫治疗可防止视网膜巨噬/小胶质细胞的基因表达变化,对角膜损伤继发视网膜炎性损害的临床用药具有一定的指导意义。
郑斌[2]（2019）在《玻璃体手术联合瘤体切除治疗视网膜血管增生性肿瘤的有效性、安全性和可行性研究》文中研究说明第1部分:RVPT两种玻璃体手术治疗效果的比较研究目的:总结需行玻璃体手术治疗的RVPT患者的临床特征,及探讨玻璃体手术联合瘤体切除对治疗RVPT的有效性和安全性。方法:本研究采取双向队列研究。回顾性队列:温州医科大学附属眼视光医院温州院区自2011年1月到2017年7月行玻璃体手术的RVPT患者11名13眼;前瞻性队列:我院杭州院区自2014年1月到2017年7月连续收治的RVPT患者5名5眼。共计16名患者18眼,占我院同期玻璃体手术的1.2‰。详细记录患者术前临床资料和瘤体特征,用于总结需玻璃体手术治疗患者的临床特征。对术后随访时间不少于6个月的15名患者17眼次手术进行分析,术中切除瘤体的8眼纳入手术治疗组,其余9眼纳入保守治疗组。收集术后随访时间、术后6月最佳矫正视力、末次随访最佳矫正视力、术中和术后1月与末次随访时并发症、再次治疗方式、瘤体活性等。结果:女性（69%）发病较为常见;年龄平均50岁,大于40岁占81%,最小28岁,最大69岁;左眼（59%）略多于右眼（41%）。15人单眼发病,仅1人双侧发病。患者的临床症状以视力下降多见（89%）,其次为飞蚊症（39%）、视物变形（19%）、视野缺损（6%）、闪光感（6%）和眼红（6%）;症状持续时间范围0.25月到36月,平均7.88月;术前矫正视力范围1.0到手动,平均0.82LogMAR;术前眼压均正常。患者无高度近视,眼轴范围21.61mm到24.67mm,平均23.27mm;原发性RVPT11人（65%）,继发性6人（35%）,均与葡萄膜炎相关;眼底疾病中黄斑前膜最为常见（67%）,其次为玻璃体出血（39%）、葡萄膜炎（39%）、视网膜下积液（28%）、视网膜渗出物（23%）、牵拉性视网膜脱离（18%）和黄斑裂孔（6%）。术前检查发现瘤体12眼,术前B超检查发现3眼。所有瘤体均为孤立型,局灶样隆起。瘤体位置以下方（70%）和颞侧（72%）多见,其中颞下方约占53%。两组术前除性别外均无显着统计学差异。在术后6月和随访末次矫正视力与术前矫正视力的提高幅度方面,切除治疗组均较保守治疗提高显着（P=0.006和P=0.033）。6月矫正视力较术前提高0.2LogMAR及以上者,保守治疗组2眼,切除治疗组7眼;视力下降者保守治疗组2人,手术治疗组1人。术后切除治疗组8眼瘤体均完全切除,而保守治疗组3眼（33.3%）瘤体确定存在活性。两组术中无手术并发症发生,术后常见并发症为短暂的眼压升高和少量眼内出血,手术治疗组1眼发生晶状体移位。术后随访中葡萄膜炎持续存在最为常见,保守治疗组1眼而切除治疗组中4眼,但均较术前减轻;其次为视网膜前膜增生,保守治疗组3眼,切除治疗组1眼;保守治疗组2眼发生黄斑下渗出和黄斑区新生血管。结论:RVPT更倾向发生于非高度近视患者。黄斑前膜和玻璃体出血是RVPT患者行玻璃体手术的主要原因。手术中对瘤体切除与保守治疗相比,更有利于患者视力恢复和防止术后长期并发症的发生,是一种安全有效治疗RVPT的方式。第2部分:RVPT的病理学研究目的:通过观察连续5例未经治疗瘤体的自然病理特征,探讨RVPT可能的病理演变过程。方法:选取前瞻性队列中5例均未曾经历保守治疗的RVPT患者,术中获取标本后,进行石蜡包埋及HE染色,进一步行免疫组化检测GFAP、S100、SOX10、CD31、Olig2、VEGF、Ki67等指标。由高年资病理医师对切片进行判读。结果:病理形态学发现所有病例均可见小血管玻璃样变、纤维素样渗出物、伴不同程度的炎症细胞浸润及出血;瘤体中2例以玻璃样变的血管成分为主,其中1例伴有明显的纤维素性渗出及炎性细胞浸润,3例患者以星形神经胶质细胞增生为主。病变局限于神经纤维层、节细胞层和内丛状层,个别突破内核层,并且瘤体与各层之间相互交错,界限不清。其中2例患者亦同时送检了黄斑前膜标本,均可见玻璃样变性的血管成分。免疫组化结果显示:玻璃样变性血管的内皮细胞表达CD31及VEGF;增生的神经胶质细胞表达GFAP、VEGF。不同病例神经胶质细胞及血管内皮表达VEGF的强度不同,同一病例血管内皮与增生的神经胶质细胞内VEGF表达强度不同。增生的神经胶质细胞无异型性,Ki67染色显示增殖指数很低。结论:RVPT具有一种完全以玻璃样变性血管为主体的病理形态。血管的玻璃样变性是RVPT最具有特征性和重复性的病理特征,星形胶质细胞增生程度在不同瘤体差异很大,其他如纤维素性渗出、出血、炎症细胞和Rosenthal纤维等也是常见的病理改变。我们推测RVPT自然病理过程可能起始于异常血管的增生,后因某些因素的破坏,导致星形胶质细胞增生修复,并逐渐演变为瘤体的主要成分。RVPT继发的黄斑前膜内有玻璃样变性血管成分。VEGF可能在RVPT的发生发展中起重要作用。第3部分:RVPT相关玻璃体手术设计目的:探讨基于RVPT临床特征和病理学结果的玻璃体手术方案的可行性。方法:本研究对象为保守治疗组和切除治疗组共计15名患者17眼。记录两组患者手术时间,术中瘤体的处理方式、瘤体周围视网膜的处理方式、晶状体是否摘除、内界膜是否剥除、是否使用电凝、填充物、是否使用曲安奈德、术中的并发症、术后1月的手术并发症。并对3例患者的详细手术过程进行分析。结果:切除治疗组手术时间平均90分钟,直接切除瘤体3眼,平均时间83分钟,游离并取出瘤体5眼,平均时间94分钟。保守治疗组平均手术时间59分钟。两组手术时间有显着统计学差异（t=-3.582,P=0.003）。保守治疗组中8眼（88.9%）对瘤体进行了单纯的冷凝治疗,1眼（11.1%）进行了光凝治疗,末次随访证实3眼（33.3%）瘤体存在活性。瘤体周围的视网膜在保守治疗组4例采用了冷凝,其余患者均采用术中激光处理。晶状体摘除者均为50岁以上,保守治疗组5眼,切除治疗组1眼。内界膜剥除12眼,均有黄斑前膜,两组各6人。眼内填充物保守治疗组填充BSS液5眼,长效气体3眼,空气1眼;切除治疗组填充硅油6眼,长效气体2眼,空气1眼。术毕玻璃体腔内辅助使用曲安奈德者,保守治疗组7眼,切除治疗组1眼。两组术中均无手术并发症发生。术后1月内并发症主要是短暂性眼压升高和少量出血,手术治疗组中1例出现短期内晶状体后囊下羽毛状混浊。结论:玻璃体手术联合瘤体切除可以达到彻底切除瘤体的目的,合理的手术设计可以避免术中术后严重并发症的发生,是治疗RVPT的一种可行的治疗方案。
冯亚平[3]（2018）在《HMGB1在颞下颌关节骨关节炎血管化中的作用机制研究》文中认为第一部分:HMGB1在人颞下颌关节骨关节炎滑膜和穿孔关节盘中的表达目的:HMGB1（High mobility group protein 1,HMGB1）作为重要的促炎因子,在骨关节炎（Osteoarthritis,OA）中发挥着重要作用,本部分研究目的在于探究HMGB1 在人颞下颂关节骨关节炎（Temporomandibular joint osteoarthritis,TMJOA）滑膜和穿孔关节盘中的表达。研究方法:在TMJ手术过程中收集TMJOA滑膜组织和穿孔关节盘组织,髁突骨折的滑膜组织和关节盘组织标本为对照组。免疫组化、Real-time PCR、Western blot检测HMGB 1的表达情况。结果:与对照组比较,免疫组化结果显示TMJOA滑膜组织中HMGB1表达增强,主要表达于增生的血管内皮细胞和滑膜细胞。同时发现HMGB1在穿孔关节盘中表达增加,主要分布于关节盘穿孔的边缘。Real-time PCR和Western blot结果显示TMJOA滑膜细胞和关节盘细胞中HMGB1的表达增强。结论:HMGB1在TMJOA滑膜和穿孔关节盘中表达增强,并有可能促进TMJOA的进展。第二部分:HMGB1在人颞下颌关节穿孔关节盘细胞血管化中的作用机制研究目的:探讨HMGB1在TMJOA穿孔关节盘细胞血管化中的作用及其分子机制。方法:选取10例人颞下颌关节（Temporomandibularjoint,TMJ）穿孔关节盘组织标本,细胞培养及常规组织固定包埋处理,以正常的关节盘组织标本作为对照。免疫组织化学染色方法检测关节盘组织中缺氧诱导因子-lα（Hypoxia-inducible factor-lα,HIF-1α）的表达。Real-time PCR、Western blot、免疫荧光染色方法分析HMGB1对TMJ穿孔关节盘细胞HIF-1α、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）及丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinases,MAPKs）信号通路的作用,以及在加入MAPKs相关抑制剂后对细胞中HIF-1α、VEGF的表达情况。管成型及Transwell小室实验检测HMGB1对人血管内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的管成型情况及细胞迁移的作用。结果:①在人TMJ穿孔关节盘细胞中,HMGB1以剂量和时间的依赖方式促进HIF-1α、VEGF的表达。免疫荧光结果进一步表明HMGB1可有效激活HIF-1α。② HMGB1 可有效激活 Erk、JNK。③ U0126（ERK1/2 抑制剂）和 SP600125（JNK抑制剂）可显着抑制HMGB1诱导的HIF-1α、VEGF的表达。④管成型实验和Transwell小室实验显示HMGB1可以显着提高HUVECs的管成型能力并促进细胞的迁移,分别用VEGF、HIF-1α、Erk和JNK抑制剂可逆转此现象。结论:在人TMJ穿孔关节盘细胞中,HMGB1通过激活Erk和JNK信号通路来调控HIF-1α的表达,进而促进VEGF的合成,导致关节盘的血管化并且加速关节盘的退行性变。第三部分:HMGB1在人颞下颌关节滑膜细胞血管化和炎症反应中的作用机制研究目的:本研究旨在研究HMGB1在人TMJOA滑膜细胞中血管化和炎症反应的作用及其分子机制。方法:用 Real-time PCR、Western blot、免疫荧光染色、HUVECs 管成型及 Transwell小室实验评估HMGB1在TMJOA滑膜细胞中的作用。结果:①HMGB1以剂量和时间的依赖方式促进TMJOA滑膜细胞中VEGF、HIF-1α、MMP13、ADAMTS5 以及细胞上清液中 VEGF、IL-1β、IL-6 的表达。此外,细胞免疫荧光实验表明HMGB1可激活HIF-1α。②管成型实验显示HMGB1可以显着提高HUVECs的血管成型能力,VEGF抑制剂可以减弱此现象。③HMGB1能有效激活TMJOA滑膜细胞中的Erk、JNK信号途径。④HMGB1促进滑膜细胞中VEGF、HIF-1α、MMP13、ADAMTS5的表达依赖于Erk和JNK信号通路。⑤HMGB1可通过激活Erk和JNK信号传导途径促进细胞上清液中VEGF、IL-1β和 IL-6 的分泌。结论:在人TMJOA滑膜细胞中,HMGB1可能通过激活炎症因子和血管生成相关因子而促进炎症反应和血管化。
钟海彬,许吉萍[4]（2017）在《胶质细胞及其相关细胞因子在视网膜前膜形成中的作用》文中研究表明视网膜前膜由视网膜色素上皮细胞、血管内皮细胞、胶质细胞等组成,而促发视网膜前膜中的增生性糠尿病视网膜前膜（PDR）和增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）,一些特殊细胞和生长因子的高表达有一定关系,尤其是视网膜前膜中的胶质细胞能表达一些营养因子和转录因子（如NF-κB）,在其中起着主导作用。
许吉萍[5]（2017）在《Wip1在糖尿病视网膜病变前膜中的表达》文中指出目的:通过检测野生型P53诱导的磷酸酶1（Wild-type p53-induced phosphatase 1,Wip1）在增生性糖尿病视网膜病变前膜中的表达,同时分析Wip1和核转录因子κB（nuclear factor kappa-B,NF-κB）、Wip1和胶质细胞在PDR前膜中的定位关系,初步探讨其参与增生性糖尿病视网膜病变前膜形成的机制。方法:从玻璃体切割术中获取患者视网膜前膜组织,取增生性糖尿病视网膜病变患者的前膜作为实验组（PDR组）,取不合并其他眼病患者的特发性视网膜前膜（idiopathic epiretinal membrane,i ERM）作为对照组（iERM组）。利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测前膜组织中Wip1的mRNA表达。用免疫组化及免疫荧光法检测前膜中Wip1的蛋白表达。运用免疫荧光双染法观察Wip1和GFAP（视网膜胶质细胞的标记物）,以及Wip1和NF-κB的共定位关系。结果:共收集26例视网膜前膜组织,其中PDR组17例,iERM组9例。RT-PCR结果显示Wip1的mRNA在PDR组中呈高表达,而在iERM组中仅有微弱表达。免疫组化和免疫荧光结果均显示Wip1在PDR组的前膜中有较强的阳性信号。通过免疫荧光双染发现Wip1和GFAP、NF-κB在PDR组前膜中的表达有相关性。结论:本研究结果说明Wip1可能通过其与NF-κB的相互作用参与了增生性糖尿病视网膜病变中纤维血管膜的形成。
魏晓飞[6]（2016）在《NLRP3炎性小体及其下游因子IL-1β和IL-18在糖尿病视网膜病变中的表达及意义》文中指出糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）是由糖尿病引起的眼部常见的并发症,严重威胁患者的视力,是主要的致盲疾病之一,现已成为全球防盲治盲的研究热点。DR是全身及局部多因素作用的结果,如多种炎症因子及细胞因子的刺激均对其起重要调控作用。近年来在糖尿病大血管及其微血管病变研究中,炎症学说成为研究的重点和热点之一,许多炎症因子参与了DR的发生发展。NLRP3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors 3）炎性小体是近年来受到关注的一种胞浆内模式识别受体。研究提示,NLRP3炎性小体及下游因子白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和白介素-18（interleukin-18,IL-18）与糖尿病的发生发展相关。NLRP3炎性小体及下游因子在DR的发生发展中是否起着重要的调节作用,目前尚无定论,需进一步的研究。本研究通过测定NLRP3炎性小体及下游因子IL-1β和IL-18在DR患者视网膜前增殖膜（epiretinal membrane,ERM）及玻璃体中的表达,为进一步阐明DR的发病机制、寻找新的靶向治疗提供依据。目的通过对糖尿病视网膜病变患者ERM内NLRP3炎性小体及下游因子IL-1β和IL-18在玻璃体中的表达进行测定,探讨NLRP3炎性小体及下游因子IL-1β和IL-18在DR中的作用,以期为阐明DR的发病机制以及寻求新的药物治疗靶点提供理论依据和实验基础。方法选择2015年6月至2015年12月于郑州大学第一附属医院眼科行玻璃体切除手术的增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）患者20例（20眼）;选择同期内行玻璃体切除手术的特发性黄斑裂孔（idiopathic macular hole,IMH）患者16例（16眼）作为对照。行玻璃体切除时取其中的PDR患者ERM标本8例,对这些标本进行冷冻切片后,采用免疫组织化学染色的方法观察标本中NLRP3的表达情况;选择IMH患者黄斑前膜标本5例进行免疫组织化学染色方法作为对照。在玻璃体切除术中取PDR患者玻璃体标本20例,采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）技术测定玻璃体中IL-1β和IL-18的含量;选择IMH患者玻璃体标本16例进行ELISA方法作为对照。结果1.NLRP3蛋白在PDR组ERM内呈高表达,在IMH组的黄斑前膜内呈低表达。2.PDR组患者玻璃体中IL-1β含量为31.17±37.95,IMH组患者玻璃体中IL-1β含量为4.00±4.08。IL-1β在PDR组的表达量高于IMH组,差异有统计学意义（P<0.05）。3.PDR组患者玻璃体中IL-18含量为97.00±85.37,IMH组患者玻璃体中IL-18含量为55.00±52.32。IL-18在PDR组的表达量高于IMH组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论1.NLRP3蛋白在PDR组ERM内表达高于IMH组。2.NLRP3及其下游因子IL-1β在DR患者眼内高表达,提示NLRP3/IL-1β通路可能在DR的发生发展中起重要作用,干扰NLRP3炎性小体信号通路的传导可能成为治疗DR的新靶点。
陆融,乔伟振[7]（2011）在《Vinculin和α-平滑肌肌动蛋白在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达》文中进行了进一步梳理目的分析vinculin和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达。方法手术中取得视网膜前膜共17例,选取倒置相差显微镜下易于展开和辨别细胞形态的组织5例,清洗展开固定后,以单克隆抗vin-于明胶涂层的盖玻片上培养,将迁出的细胞培养传代,免疫荧光染色后在荧光显微镜下观察。结果术中取得的视网膜前膜细胞抗vinculin和α-SMA抗体染色阳性。12例视网膜前膜组织中,7例培养24h后细胞从组织迁移至明胶涂层的盖玻片上并增殖,其中4例可培养至第2代,4例中2例可培养至第3代,这些细胞抗vinculin和抗α-SMA抗体染色均呈阳性。结论术中剥离的视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞均表达vinculin和α-SMA,提示这些细胞具有较强且较恒定的收缩能力。
张潇[8]（2010）在《富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）参与糖尿病视网膜病变发病的实验研究》文中指出目的1.研究CYR61 （cysteine-rich 61; CCN1）对脉络膜视网膜内皮细胞（RF／6A细胞系）增殖、迁移及形成管状结构的影响。2.研究CYR61在糖尿病小鼠和正常小鼠视网膜的表达和分布情况及其差异。3.研究增殖性糖尿病视网膜病变（PDR）患者玻璃体CYR61的表达水平,以及CYR61在视网膜增殖膜内的表达和分布。方法1.通过MTT比色实验观察CYR61对RF／6A细胞增殖能力的影响：应用Transwell小室观察CYR61作用下,RF／6A细胞迁移能力的变化；采用Matrigel基质胶,观察CYR61对RF／6A细胞形成管状结构的影响。2.腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病小鼠模型,通过免疫组织化学方法观察CYR61在糖尿病小鼠视网膜的表达和分布,利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法分析视网膜Cyr61 mRNA的表达情况。3.收集玻璃体切除手术患者的玻璃体液和视网膜前膜,利用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法测定PDR患者和非糖尿病患者玻璃体CYR61的浓度,利用免疫组织化学方法观察CYR61在PDR、增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）和特发性黄斑前膜患者的视网膜前膜中的表达和分布情况。结果1.用不同浓度的CYR61（0,5ng/mL, 10ng/mL,50ng/mL, 100ng/mL,500ng/mL）干预RF／6A细胞72h,随着CYR61浓度增加,MTT比色实验的吸光度A490nm值升高,其差异有统计学意义（p=0.000）；400ng/mL Cry61干预RF／6A细胞不同时间（0,12h,24h,48h,72h）,随着时间延长,A490nm值升高,其差异有统计学意义（Jp=0.000）。Transwell小室实验中,随着CYR61浓度增加,迁移的RF／6A细胞增加（p=0.000）,400ng/ml CYR61促进细胞迁移的能力与80ng/ml VEGF相当,而加入抗CYR61抗体则可以起到显着的抑制作用。Matrigel基质胶实验中,随着CYR61浓度增加,RF／6A细胞形成的管状结构增多（p=0.000）,400ng/ml CYR61与80ng/ml VEGF的作用相当,而加入抗CYR61抗体则可以起到显着的抑制作用。2.在正常小鼠的视网膜,CYR61在神经节细胞层、内丛状层、外从状层和光感受器层均有表达,其中外从状层表达较强,其余各层弱阳性染色；在糖尿病小鼠的视网膜,CYR61同样在以上各层表达,但神经节细胞层和内丛状层的表达较正常小鼠明显增强,神经节细胞胞浆内出现团块状的阳性染色。糖尿病小鼠视网膜Cyr61 mRNA的表达较正常对照组增加,差异具有统计学意义（p=0.009）。3.PDR组玻璃体CYR61浓度为97.53±34.13 （41.21～154.74） ng/mL,对照组玻璃体CYR61浓度为33.92±18.68 （6.24～70.04） ng/mL,两组有显着性差异（p=0.000）；视网膜和增殖膜新生血管丰富者玻璃体CYR61明显高于无明显新生血管者（p＝0.001）；未发现玻璃体CYR61与患者年龄、糖尿病病程及术前空腹血糖有关（p>0.05）。CYR61分布于视网膜前膜的细胞胞浆中,在PDR视网膜前增殖膜中管腔样结构的管壁细胞高度表达,在其它细胞也可见散在的阳性染色；PVR视网膜前增殖膜及特发性黄斑前膜中,有散在的阳性染色细胞。结论CYR61在体外可以促进脉络膜视网膜内皮细胞增殖、迁移及形成管状结构；糖尿病小鼠视网膜Cyr61 mRNA和蛋白的表达均较正常小鼠升高：PDR患者玻璃体CYR61含量明显高于非糖尿病患者,CYR61表达于PDR视网膜前增殖膜,尤其在管腔样结构的管壁细胞高度表达。CYR61很可能参与糖尿病视网膜病变的发病,在PDR新生血管的形成过程中起一定的作用。
姜浩[9]（2010）在《青藤碱对大鼠DR中NF-κB及部分促炎因子mRNA表达影响的实验研究》文中指出目的观察大鼠早期糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy, DR）中核因子-κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）活化和部分促炎因子mRNA表达的情况,以及盐酸青藤碱（Sinomenine）对它们的影响。方法1.选取成年健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠100只,随机分为正常对照组（N组）30只,其余70只采用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）化学诱导的方法建立大鼠糖尿病模型,其中1只眼球脱出,2只死亡,3只血糖未达标,将建模成功的64只大鼠随机分组：糖尿病模型对照组（DM组）32只；盐酸青藤碱治疗组（SN组）32只。SN组给予2%盐酸青藤碱100mg/（kg·d）腹腔注射治疗。N组和DM组给予等容积0.9%灭菌氯化钠腹腔注射。每4周监测大鼠血糖和体重。2.各组分别于4周、12周各处死4只（8眼）大鼠,制作视网膜冰冻切片,用免疫组化方法检测NF-κB在大鼠视网膜内的表达情况,对NF-κB活化水平进行相对定量分析。在40倍光镜下,每张切片随机选择5个不重叠的视野,进行NF-κB活化的阳性细胞计数,每眼计数3张切片,每组8只眼,计算均数±标准差,进行组间比较。3.各组分别于4周、12周各处死8只（16眼）大鼠,剥取每只大鼠双眼视网膜,随机取1只眼的视网膜,用实时荧光定量PCR方法检测白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1）和环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2） mRNA表达情况。根据Livak的2-ΔΔCT方法计算目的基因的相对量,并进行组间比较。结果1.DR大鼠模型建模成功率为91.43%。各组间大鼠意外死亡率无显着差异（P>0.05）。成模4周、12周时,DM组、SN组体重低于N组（P<0.01）, DM组与SN组之间无显着差异（P>0.05）; DM组、SN组血糖高于N组（P<0.01）,DM组与SN组之间无显着差异（P>0.05）。2.4周和12周时,DM组和SN组NF-κB除了见于神经节细胞的细胞核外,表达空间还扩大到内核层和外核层；NF-κB活化水平高于N组（P<0.01）；与4周时比较,12周时NF-κB活化水平略增高,差异显着（DM组P<0.05、SN组P<0.01）；4周和12周时,SN组NF-κB活化水平低于DM组,差异显着（P<0.01）。3.4周和12周时,DM组和SN组视网膜内IL-1β、TNF-α、MCP-1及COX-2 mRNA水平均比N组增高（P<0.01）；与4周相比,12周时DM组和SN组TNF-α及MCP-1 mRNA水平增高,差异显着（P<0.01或P<0.05）, IL-1β和COX-2 mRNA水平略增高,但差异不显着（P>0.05）；4周和12周时,SN组IL-1β（P <0.05）、TNF-α和MCP-1 mRNA （P<0.01）水平低于DM组,差异显着,COX-2 mRNA差异不显着（P>0.05）。结论1.STZ诱导的DR大鼠模型成模率高,应用此模型可对DR的病理学、发病机制和药物治疗等多方面进行研究。100mg/（kg-d）剂量盐酸青藤碱腹腔注射对糖尿病大鼠是安全的,在12周观察期内对其体重、血糖变化无明显影响。2.早期糖尿病大鼠视网膜NF-κB的活化水平增高,在节细胞层、内、外核层有NF-κB的活化。随病程延长,NF-κB持续活化并且呈进行性增高的趋势。盐酸青藤碱在一定程度上抑制了糖尿病大鼠视网膜NF-κB的活化。3.早期糖尿病大鼠视网膜内IL-1β、TNF-α、MCP-1和COX-2 mRNA水平增高,这些促炎症因子可能在早期DR发病机制中发挥重要作用。盐酸青藤碱可能通过抑制糖尿病大鼠视网膜NF-κB的活化,在转录水平部分地抑制了视网膜内IL-1β、TNF-α、MCP-1 mRNA的表达,但对COX-2 mRNA水平没有明显影响。4.本研究进一步证实了炎症机制可能在早期DR的发生、发展中发挥重要作用。通过抗炎治疗干预早期DR的炎症过程,可能是一种有前途的治疗方法。
闵祥荣[10]（2008）在《硅油填充眼病理改变与相关炎性因素的研究》文中研究指明目的:观察硅油填充术后眼组织病理学改变以及硅油物质、炎性细胞在眼组织中的分布情况,探讨硅油相关的炎症反应特点及硅油填充眼病理学改变的影响因素。研究硅油填充眼视网膜前膜（epiretinal membrane,ERM）中白细胞介素—8（interleukin 8,IL-8）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）、CD68（巨噬细胞标记物）的表达情况,及其与硅油眼内存留时间的关系。方法:1.收集天津眼科医院病理科有复杂性视网膜脱离硅油填充术史的眼球摘除标本12例,用苏木素—伊红染色（hematoxylin and eosin staining,HE）及免疫组织化学方法观察眼球中硅油的分布及CD68、CD45RO（T-淋巴细胞）、CD20（B-淋巴细胞）的表达情况。2.收集硅油填充术后不同时期获得的增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreous retinopathy,PVR）ERM标本23例,根据硅油眼内存留时间分为3组:≤3个月组、3～6个月组和＞6个月组;无硅油填充术史的PVR增生膜20例作为对照。免疫组织化学方法（immunohistochemistry,IHC）检测两组ERM中IL-8、MCP-1及CD68的表达。结果:1.硅油可浸润到角膜、前房角、虹膜、睫状体、晶状体囊膜、视网膜及ERM等组织内,视网膜表面及ERM中尤其明显,表现为组织内大小不一、边界光滑的圆形空泡,周围伴有巨噬细胞浸润及少量色素颗粒。内界膜完整的标本中,硅油浸润通常局限于视网膜表面。所有标本视神经内均未见硅油存在。2.硅油组ERM中MCP-1及CD68表达水平明显高于对照组（P＜0.05）,IL-8的表达状态两组间差别无统计学意义。IL-8表达情况与硅油眼内存在时间呈负相关（P＜0.05）,但是在≤3个月组、3～6个月组和＞6个月组间IL-8表达水平无明显差异。MCP-1的阳性表达与硅油存在时间呈负相关,在≤3个月组表达水平明显高于后两组（P＜0.05）,3～6个月组和＞6个月组间差别无统计学意义。CD68的表达水平与硅油眼内存留时间的关系均无统计学意义。结论:本研究认为硅油可在眼内多个部位存在,并伴随趋化因子IL-8、MCP-1的产生以及巨噬细胞浸润为主的炎症反应。硅油取出术后残存的乳化硅油可使炎症反应持续存在。在结构相对完整的眼球标本,组织内硅油浸润不明显。硅油相关的病理学改变可能更大程度上取决于眼内结构的完整程度,与眼部病史、眼外伤程度、手术次数及操作等因素密切相关。硅油填充眼视网膜前膜中有IL-8、MCP-1的阳性表达,且硅油填充术后早期IL-8和MCP-1表达水平较高。在超过3个月标本中,硅油相关炎症反应与眼内存在时间无明显关联。IL-8和MCP-1可能共同参与了硅油填充眼视网膜前膜的形成,在硅油填充术后早期的病理改变中共同发挥着重要的作用。
二、视网膜前膜内相关炎性细胞因子的免疫组化研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、视网膜前膜内相关炎性细胞因子的免疫组化研究（论文提纲范文）
（1）角膜损伤诱发视网膜炎症中巨噬/小胶质细胞的作用机制及拮抗炎性因子疗效的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 小鼠角膜碱烧伤诱导视网膜炎性反应及其表现 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 角膜碱烧伤相关的视网膜炎性反应 |
| 1.1.2 小胶质细胞在视网膜病理改变中的表现 |
| 1.1.3 炎性因子在角膜碱烧伤相关视网膜炎性反应中的作用 |
| 1.2 实验设计 |
| 1.3 材料和方法 |
| 1.3.1 动物饲养及福利保护 |
| 1.3.2 小鼠单侧角膜碱烧伤模型的制备 |
| 1.3.3 流式细胞术分析角膜及视网膜组织中的炎性细胞浸润情况 |
| 1.3.4 qPCR检测相关炎性因子的表达 |
| 1.3.5 冰冻切片的制备以及TUNEL实验 |
| 1.3.6 小鼠骨髓移植模型的建立 |
| 1.3.7 视网膜组织激光共聚焦显微镜切片的制备 |
| 1.3.8 统计学分析 |
| 1.4 实验结果 |
| 1.4.1 小鼠角膜碱烧伤急性损伤期角膜及视网膜的炎性因子的表达差异 |
| 1.4.2 角膜碱烧伤急性损伤期的角膜组织中CD45~+CD11b~+细胞及CX3CR1~+CD45~+CD11b~+细胞所占比例变化 |
| 1.4.3 角膜碱烧伤急性损伤期的视网膜组织中CD45~+CD11b~+细胞所占比例的变化及其分群分析 |
| 1.4.4 角膜碱烧伤急性期相关视网膜细胞的凋亡 |
| 1.4.5 角膜碱烧伤急性损伤期视网膜组织中CX3CR1~+CD45~+CD11b~+巨噬/小胶质细胞激活状态及所占比例的变化 |
| 1.4.6 小鼠骨髓移植模型初步鉴定角膜碱烧伤继发视网膜炎性反应的免疫细胞来源 |
| 1.5 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 小鼠角膜手术损伤诱导视网膜炎性反应中巨噬/小胶质细胞的作用 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.1.1 穿透性角膜移植术与波士顿人工角膜移植术概述 |
| 2.1.2 角膜移植手术与继发正常IOP条件下的类青光眼临床表现 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 动物饲养及福利保护 |
| 2.2.2 小鼠单侧角膜PK模型的制备及术后处理 |
| 2.2.3 流式细胞术分析角膜及视网膜组织中的炎性细胞浸润情况 |
| 2.2.4 qPCR检测相关炎性因子的表达 |
| 2.2.5 冰冻切片的制备以及TUNEL实验 |
| 2.2.6 小鼠骨髓移植模型的建立 |
| 2.2.7 视网膜组织激光共聚焦显微镜切片的制备 |
| 2.2.8 统计学分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 小鼠PK术后24小时角膜CD45~+CD11b~+细胞浸润情况及其与碱烧伤的对比 |
| 2.3.2 PK术后24小时视网膜CD45~+CD11b~+细胞比例变化及分群分析 |
| 2.3.3 PK术后24小时视网膜CX3CR1~+CD45~+CD11b~+巨噬/小胶质细胞激活状态及所占比例的变化 |
| 2.3.4 PK术后24小时视网膜炎性因子的表达情况 |
| 2.3.5 PK术后24小时视网膜细胞的凋亡情况及术后一周神经细胞的存活状态 |
| 2.3.6 小鼠骨髓移植模型初步鉴定小鼠PK手术诱发视网膜炎性反应的免疫细胞来源 |
| 2.4 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 TNF-α单克隆抗体以及IL-1β拮抗剂在角膜手术损伤相关视网膜炎症中的治疗作用 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.1.1 建立三种角膜手术损伤模型的原理 |
| 3.1.2 炎性细胞因子及其阻断/拮抗剂的应用 |
| 3.2 实验设计 |
| 3.3 材料与方法 |
| 3.3.1 动物饲养及福利保护 |
| 3.3.2 三种小鼠手术模型的制备 |
| 3.3.3 术后药物治疗及处理 |
| 3.3.4 qPCR检测相关炎性因子的表达 |
| 3.3.5 流式细胞术定量分析视网膜组织荧光信号阳性细胞 |
| 3.3.6 BMT模型的建立及激光共聚焦显微镜切片的制备 |
| 3.3.7 冰冻切片的制备以及TUNEL实验 |
| 3.3.8 统计学分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 三种角膜手术模型的形态学观察 |
| 3.4.2 三种手术损伤模型诱发视网膜组织TNF-α,IL-1β,IL-6及TNFR表达上调的对比 |
| 3.4.3 四种免疫抑制方案对角膜单根缝线术后诱发视网膜炎性反应的治疗作用 |
| 3.4.4 四种免疫抑制方案对PK术后诱发视网膜炎性反应的治疗作用 |
| 3.4.5 四种免疫抑制方案对PK联合LR术后诱发视网膜炎性反应的治疗作用 |
| 3.4.6 四种免疫抑制方案减少PK术后急性期视网膜细胞凋亡的作用对比 |
| 3.4.7 免疫抑制剂显着减少PK术后急性期视网膜组织外周单核-巨噬细胞的浸润 |
| 3.4.8 免疫治疗显着提高PK术后7天视网膜神经细胞的生存率 |
| 3.5 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 单细胞测序对角膜损伤诱发视网膜炎性反应激活的免疫细胞动态的初步研究 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.2 实验设计 |
| 4.3 材料与方法 |
| 4.3.1 动物饲养及嵌合体小鼠碱烧伤模型的制备 |
| 4.3.2 单细胞悬液制备 |
| 4.3.4 微流控芯片体系进行单细胞分离和cDNA的合成 |
| 4.3.5 数据分析与统计 |
| 4.3.6 实验试剂及仪器 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 流式分选CX3CR1阳性的巨噬/小胶质细胞后应用微流控芯片分离单细胞 |
| 4.4.2 各组细胞的主要成分解析 |
| 4.4.3 角膜碱烧伤2年后的视网膜小胶质细胞与正常小胶质细胞的初级mRNA测序数据比较 |
| 4.4.4 角膜碱烧伤2年后的视网膜小胶质细胞与正常小胶质细胞的基因聚类分析 |
| 4.5 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 文献综述 |
| 5.1 非感染性葡萄膜炎的发病机制及常见类型 |
| 5.1.1 葡萄膜炎概述 |
| 5.1.2 常见非感染性葡萄膜炎的免疫机制 |
| 5.1.3 交感性眼炎 |
| 5.2 免疫抑制药物的应用 |
| 5.2.1 皮质类固醇激素 |
| 5.2.2 环孢素A |
| 5.2.3 甲氨蝶呤 |
| 5.2.4 硫唑嘌呤 |
| 5.2.5 TNF-α单克隆抗体 |
| 5.3 小结 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 附件 |
| 致谢 |
（2）玻璃体手术联合瘤体切除治疗视网膜血管增生性肿瘤的有效性、安全性和可行性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号 |
| 引言 |
| 第1部分 RVPT两种玻璃体手术治疗效果的比较研究 |
| 1.1 研究对象与方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 第2部分 RVPT的病理学研究 |
| 2.1 研究对象与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第3部分 RVPT相关玻璃体手术设计 |
| 3.1 研究对象与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 病例4 |
| 病例6~1 |
| 病例6~2 |
| 病例7~1 |
| 病例7~2 |
| 病例8 |
| 病例9 |
| 病例10 |
| 病例12 |
| 病例13 |
| 病例14 |
| 病例15 |
| 病例16 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
（3）HMGB1在颞下颌关节骨关节炎血管化中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 文献综述 HMGB1及其在血管生成中的作用 |
| 第一部分: HMGB1在人TMJOA穿孔关节盘和滑膜中的表达 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 附图 |
| 第二部分: HMGB1诱导人颞下颌关节穿孔关节盘细胞血管化的作用机制研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 附图 |
| 第三部分: HMGB1对人颞下颌关节滑膜细胞炎症反应和血管化的作用机制研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 结论 |
| 附图 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表文章 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（4）胶质细胞及其相关细胞因子在视网膜前膜形成中的作用（论文提纲范文）
| 1 视网膜前膜形成之概述 |
| 1.1 类型和组成 |
| 1.2 继发性ERM与糖尿病 |
| 1.3 PDR与PVR的病理机制 |
| 2 碱性成纤维细胞生长因子在视网膜前膜形成中的作用 |
| 3 肝细胞生长因子在视网膜前膜形成中的作用 |
| 4 神经营养因子在视网膜前膜形成中的作用 |
| 5 核因子-κB在视网膜前膜形成中的作用 |
| 6 激活蛋白-1在视网膜前膜形成中的作用 |
（5）Wip1在糖尿病视网膜病变前膜中的表达（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 中英文缩略语对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前 言 |
| 材料与方法 |
| 1 样本来源和收集 |
| 2 RT-PCR分析 |
| 3 免疫组化分析 |
| 4 免疫荧光分析 |
| 5 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 患者信息 |
| 2 Wip1 mRNA在PDR组中表达水平较高 |
| 3 Wip1蛋白在PDR组中表达水平较高 |
| 4 在PDR组前膜中观察到Wip1和GFAP的共定位现象 |
| 5 在PDR组前膜中观察到Wip1和NF-κ B的共定位现象 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 胶质细胞及其相关细胞因子在视网膜前膜形成中的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（6）NLRP3炎性小体及其下游因子IL-1β和IL-18在糖尿病视网膜病变中的表达及意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 玻璃体切除硅油填充术后并发症研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历和发表论文情况 |
| 致谢 |
（8）富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）参与糖尿病视网膜病变发病的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 :CYR61促进脉络膜视网膜内皮细胞增殖、迁移及管状结构形成的实验研究 |
| Ⅰ. 非洲绿猴脉络膜视网膜内皮细胞(RF/6A细胞系)的培养 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| Ⅱ. CYR61对RF/6A细胞增殖的影响 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| Ⅲ. CYR61对RF/6A细胞迁移的影响 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| Ⅳ. CYR61对RF/6A细胞管状结构形成的影响 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 第二部分 :CYR61在糖尿病小鼠视网膜的表达的实验研究 |
| Ⅰ. 建立糖尿病小鼠模型 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| Ⅱ. CYR61在糖尿病小鼠视网膜的表达 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| Ⅲ. Cyr61 mRNA在糖尿病小鼠视网膜的表达 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 第三部分 :CYR61在增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体和视网膜增殖膜的表达的实验研究 |
| Ⅰ. CYR61在增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体内的表达 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| Ⅱ. CYR61在增殖性糖尿病视网膜病变患者视网膜增殖膜的表达 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:CYR61的研究进展 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 在读期间发表论文情况 |
（9）青藤碱对大鼠DR中NF-κB及部分促炎因子mRNA表达影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、大鼠DR模型的建立及盐酸青藤碱应用的一般情况 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 对象 |
| 1.1.2 方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 成模情况 |
| 1.2.2 各组动物死亡情况 |
| 1.2.3 一般状态比较 |
| 1.2.4 血糖变化情况 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 关于DR模型制作 |
| 1.3.2 青藤碱的应用 |
| 1.4 小结 |
| 二、NF-κB在DR中的表达及盐酸青藤碱的影响 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 对象 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 免疫组化结果 |
| 2.2.2 不同时段各组NF-κB表达水平的变化 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 NF-κB的结构及生物学特点 |
| 2.3.2 NF-κB与DR |
| 2.3.3 NF-κB抑制剂与DR |
| 2.4 小结 |
| 三、盐酸青藤碱对大鼠DR中部分促炎因子mRNA表达的影响 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 对象 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 大鼠视网膜总RNA提取 |
| 3.2.2 定量扩增产物的质控:熔解曲线 |
| 3.2.3 各组不同时段、不同基因相对表达量的变化 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 IL-1β |
| 3.3.2 TNF-α |
| 3.3.3 MCP-1 |
| 3.3.4 COX-2 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 炎症在早期糖尿病视网膜病变中的作用 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
（10）硅油填充眼病理改变与相关炎性因素的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、硅油填充眼病理改变及影响因素 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 二、硅油填充眼视网膜前膜中IL-8和MCP-1表达的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 综述正文 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
四、视网膜前膜内相关炎性细胞因子的免疫组化研究（论文参考文献）
- [1]角膜损伤诱发视网膜炎症中巨噬/小胶质细胞的作用机制及拮抗炎性因子疗效的研究[D]. 陈小鸟. 中国人民解放军医学院, 2019(02)
- [2]玻璃体手术联合瘤体切除治疗视网膜血管增生性肿瘤的有效性、安全性和可行性研究[D]. 郑斌. 郑州大学, 2019(07)
- [3]HMGB1在颞下颌关节骨关节炎血管化中的作用机制研究[D]. 冯亚平. 武汉大学, 2018(06)
- [4]胶质细胞及其相关细胞因子在视网膜前膜形成中的作用[J]. 钟海彬,许吉萍. 微创医学, 2017(04)
- [5]Wip1在糖尿病视网膜病变前膜中的表达[D]. 许吉萍. 广西医科大学, 2017(01)
- [6]NLRP3炎性小体及其下游因子IL-1β和IL-18在糖尿病视网膜病变中的表达及意义[D]. 魏晓飞. 郑州大学, 2016(03)
- [7]Vinculin和α-平滑肌肌动蛋白在视网膜前膜细胞及其迁出传代细胞中的表达[J]. 陆融,乔伟振. 眼科新进展, 2011(12)
- [8]富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）参与糖尿病视网膜病变发病的实验研究[D]. 张潇. 中国协和医科大学, 2010(09)
- [9]青藤碱对大鼠DR中NF-κB及部分促炎因子mRNA表达影响的实验研究[D]. 姜浩. 天津医科大学, 2010(12)
- [10]硅油填充眼病理改变与相关炎性因素的研究[D]. 闵祥荣. 天津医科大学, 2008(01)