一、急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作（论文文献综述）
赵新民[1]（2021）在《miR-139-5p通过靶向调控ROCK1改善脓毒症肺损伤的作用机制研究》文中提出背景与目的脓毒症是由宿主对感染反应失调而引起的多器官功能障碍,严重威胁人类健康。脓毒症发生多器官衰竭时肺脏极易受损伤,引起炎症反应和细胞的凋亡。脓毒症引起的肺损伤目前尚无确切治疗方法。本文在脓毒症肺损伤小鼠模型和脂多糖（LPS）诱导的人支气管上皮细胞（NHBE）损伤模型中探讨miR-139-5p改善脓毒症诱发的肺损伤中炎症反应的可能作用机制。方法1、苏木精-伊红染色观察盲肠结扎穿孔（CLP）诱导脓毒症致急性肺损伤（ALI）小鼠肺组织病理改变并测定肺含水量。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测脓毒症致ALI小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）和血清中TNF-α、IL-1β和IL-6促炎细胞因子的表达,使用商用试剂盒测定肺组织活性氧簇（ROS）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽还原酶（GSH-px）表达水平。原位末端转移酶标记实验（TUNEL）检测细胞凋亡水平。用实时荧光定量（qRT-PCR）和免疫印迹（western blotting）实验检测miR-139-5p和Rho激酶1（ROCK1）表达水平。2、通过查询生物信息预测ROCK1是miR-139-5p的直接靶点,使用双荧光素酶报告基因实验加以验证。3、NHBEs在脂多糖（LPS）刺激前,使用过表达ROCK1的慢病毒载体（或空载体）和miR-139-5p模拟物或对照模拟物共转染。检测半胱氨酸天冬氨酸酶3（caspase-3）的转录活性,并检测粘多糖5AC（Mucin 5AC）、粘多糖1（Mucin 1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）、Nod样受体蛋白3（NLRP3）、凋亡相关链状蛋白（ASC）和半胱氨酸天冬氨酸酶1（caspasel）水平。流式细胞术检测NHBE细胞细胞凋亡情况。结果1、与正常组相比,CLP后小鼠肺组织形态异常,TNF-α、IL-1β和IL-6生成增加,活性氧簇（ROS）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）表达水平显着升高,细胞凋亡率升高,ROCK1表达水平显着升高,肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GSH-px）的表达水平和miR-139-5p的表达水平显着降低。2、双荧光素酶基因报告实验证实ROCK1是miR-139-5p的直接调控靶点。3、在NHBEs中,与未经处理的细胞相比,LPS刺激导致细胞凋亡率显着升高,炎症细胞因子表达水平显着升高。过表达miR-139-5p能够抑制LPS诱导的NHBEs中的凋亡,抑制炎症因子表达。在NHBEs中过表达ROCK1能够逆转过表达miR-139-5p所抑制的ROS活性、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）表达水平和促炎细胞因子的产生。同时发现过表达ROCK1能够恢复过表达miR-139-5p所抑制的NLRP3、ASC、caspase1、caspase-3、Mucin 5AC和Mucin 1 的表达水平。结论miR-139-5p通过抑制下游靶基因ROCK 1的表达,抑制氧化应激和炎症反应,减轻脓毒症诱导的ALI,提示miR-139-5p可能是脓毒症ALI潜在的治疗靶点。
程璐[2]（2020）在《通腑泻肺方治疗脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的临床及实验研究》文中指出脓毒症是宿主对感染应答失调所致的威胁生命的器官功能障碍,严重威胁人类健康。由感染引起的全身炎症反应,贯穿脓毒症病程始终。由于肺组织对炎症介质的显着易感性,肺脏是脓毒症最早累及的靶器官,表现为急性呼吸窘迫综合征（ARDS）,临床以进行性加重的呼吸衰竭和顽固性低氧血症为特征。在引起ARDS的诸多病因中,脓毒症是最常见的肺外因素,占40%-60%。随着小潮气量通气、俯卧位通气、肺复张等机械通气方式的应用,ARDS的治疗取得了长足的进步,但重度ARDS的病死率仍然高达70%。中医古籍中并无“脓毒症”记载。根据感染、炎症等临床表现归为温热病范畴,肺为娇脏,为五脏之华盖,最易受外邪入侵。毒邪壅肺,肺脏宣发肃降功能失常,气不布津,大量病理产物内聚,加重全身炎症反应。通过meta分析评估通腑泻肺治疗对ARDS的综合疗效,并依据“六腑以通为用,以降为顺”、“热者寒之,温者清之”理论,自制通腑泻肺方（TFXF）,肺肠同治。通过临床试验观察通腑泻肺方对脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者氧合、肠黏膜屏障功能,炎症介质水平的影响。鉴于NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号轴是涉及固有免疫系统和脓毒症炎症进展的关键信号通路,进一步通过动物实验,借助ELISA、Westerm blot等分子生物学技术,观察通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠一般情况,72h生存率以及NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-8等炎症因子表达的影响,探索中医“釜底抽薪,急下存阴”治则治法的原理,为研究开发应用“通腑泻肺”法治疗脓毒症相关ARDS提供科学的理论依据。研究目的:[1]对通腑泻肺为主的中西医结合方法治疗ARDS的临床随机对照研究进行系统评价,为中医在ARDS中的应用提供理论依据。[2]自拟通腑泻肺方应用于临床,评估其临床疗效,探讨通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS患者氧合、肠黏膜屏障功能以及炎症介质水平的影响。[3]建立脓毒症相关ARDS动物实验模型,通过观察通腑泻肺方对NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号轴关键分子的影响,阐明通腑泻肺法治疗脓毒症相关ARDS的分子机制。研究方法:[1]搜索2001年1月1日至2019年6月30日通腑泻肺法治疗ARDS的随机对照研究,最终纳入27项研究,观察通腑泻肺法对病死率,ARDS并发症（腹胀、呼吸机相关性肺炎、气道水样分泌物、应激性溃疡）发生率、临床治疗有效率、机械通气时间、ICU住院时间、APACHEⅡ评分、Murray肺损伤评分、氧合指数、二氧化碳分压、炎性介质表达（C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-2、白细胞介素-8）、呼吸机参数（气道峰压、气道平台压、平均气道压、气道阻力、肺顺应性）等的影响。以风险比（RR）及相应的95%置信区间（CI）作为二分类变量效应值,以MD或SMD作为连续型变量的效应值。效应模型采用固定效应模型或随机效应模型。应用Cochrane Q和I2统计学评价异质性。应用“漏斗图法”评价发表偏倚。[2]纳入2016年3月至2018年3月南京中医药大学重症医学科收治的诊断为脓毒症相关ARDS、中医辨证符合痰热壅肺证的患者共计40例。随机分为对照组和试验组,试验组给予通腑泻肺方免煎颗粒:大黄12g、枳实12g、厚朴9g、葶苈子20g、桑白皮20g、青皮12g。100ml温水冲调,每日1剂,2次/天;对照组给予等量温开水鼻饲。两组疗程均为7天。比较两组治疗前（0天）、治疗4天及7天氧合指数、肠粘膜通透性指标（血清二胺氧化酶DAO、丙二醛MDA）浓度、以及炎症介质（血清肿瘤坏死因子-α、白介素-6）水平,并统计两组28天累积死亡率。[3]采用腹腔注射LPS法复制脓毒症模型,以氧合指数<200mmHg,作为评价脓毒症相关ARDS造模是否成功的标准。观察大鼠一般状况及生命体征,采用ELISA、Westerm Blot等方法检测NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号轴中关键分子及IL-8,HMGB1、IL-27等炎性介质的表达,初步探讨通腑泻肺中药对脓毒症相关ARDS的调控机制。研究结果:[1]荟萃分析发现使用通腑泻肺为主的中西医结合治疗ARDS较西医常规治疗能显着降低ARDS患者的住院死亡率,减少腹胀、应激性溃疡、呼吸机相关性肺炎、气道水样分泌物等并发症的发生率。对于ARDS的治疗,结合通腑泻肺策略的中西医结合治疗在降低APACHEⅡ评分、肺损伤评分,改善肺氧合状态、减少炎性介质表达、减少机械通气时间、改善呼吸力学指标等方面存在突出优势。[2]临床研究表明,通腑泻肺治疗组第4天、第7天患者的氧合指数均显着高于对照组（P<0.05）。通腑泻肺治疗组患者第4天血清MDA水平较对照组显着下降（P<0.05）,通腑泻肺治疗组患者第7天血清DAO和IL-6水平较对照组显着下降（P<0.05）。但两组间TNF-α及NO表达的变化差异不具有统计学意义。[3]动物实验研究表明,通腑泻肺方治疗组大鼠生存率较模型组明显改善（P<0.05）,ELISA联合免疫组化检测结果提示通腑泻肺方能有效抑制脓毒症相关ARDS大鼠外周血清和肺组织中炎性因子HMGB1、IL-1β、IL-8、IL-27的蛋白的表达（P<0.05）,且大剂量通腑泻肺组抑制作用更为明显（P<0.05）;Westem Blot结果显示模型组NLRP3蛋白的表达较对照组显着增高,大、小剂量TFXF组NLRP3表达均较模型组降低。模型组活化的Caspase-1 p20蛋白的表达较对照组显着增高,给予通腑泻肺中药干预后,大、小剂量TFXF组Caspase-1 p20表达均较模型组降低。模型组HMGB1蛋白的表达较对照组显着增高,给予通腑泻肺中药干预后,小剂量TFXF组HMGB1蛋白的表达量无明显减少,仅观察到大剂量TFXF组HMGB1蛋白的表达较模型组下降。模型组IL-1β、IL-8及IL-27蛋白的表达较对照组显着增高,大、小剂量TFXF组IL-1β、IL-8及IL-27蛋白的表达均较模型组显着降低,其中大剂量TFXF组对IL-1β表达具有显着抑制效应。研究结论:[1]Meta分析结果表明通腑泻肺治疗可有效抑制病原菌的生长,减少内毒素的吸收,缓解胃肠道功能障碍所致的腹胀,防止菌群移位,修复受损的胃肠粘膜屏障。可清除内毒素,降低肺毛细血管通透性,有效改善肺水肿症状,有利于ARDS的缓解,从而降低ARDS患者呼吸机支持参数,减少气道阻力,改善氧合状态。其机制可能与通腑泻肺治疗减少炎性介质在肺部的聚集,调控体内促炎介质和抗炎介质反应平衡有关。[2]临床研究提示通腑泻肺治疗一定程度上可以抑制脓毒症相关ARDS患者的炎症反应,通过减轻因炎症反应带来的肺损伤,改善氧合。通腑泻肺治疗可减轻脂质过氧化及机体的氧化应激水平,减少肠源性内毒素的释放,保护肠粘膜屏障功能的完整性,进而减轻肠功能障碍引起的肺损伤的发生。[3]动物实验研究表明通腑泻肺方能显着抑制脓毒症相关ARDS大鼠NLRP3炎症小体蛋白的表达水平,下调NLRP3炎症小体的合成;抑制Caspase-1活化,下调下游IL-1β、IL-8,IL-27及HMGB1等炎性介质蛋白表达。
杨杭燕[3]（2018）在《复苏合剂对内毒素诱导的脓毒症相关性ARDS模型大鼠的疗效相关研究》文中认为研究目的:通过观察复苏合剂干预脓毒症相关性急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）模型大鼠血清中TNF-α、HPA、IL-10水平的影响,以及肺组织形态学的改变,评价复苏合剂对脓毒症相关性ARDS大鼠的治疗作用。研究方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为空白组和造模组,造模组使用内毒素（3mg/kg,注射时间5min）经左侧股静脉注射诱导脓毒症ARDS动物模型,空白组大鼠按同样方法注射等体积生理盐水,将造模组分为复苏合剂高剂量组、复苏合剂中剂量组、复苏合剂低剂量组、模型组。内毒素作用持续2h后立即进行药物干预。空白组、模型组给予灌服等体积生理盐水,复苏合剂高、中、低剂量组分别给予不同浓度的等体积的复苏合剂溶液,间隔24h灌药一次,总共干预2次。分别在24h、48h的2个时间点对每组大鼠进行大鼠一般情况观察,2个时间点各随机抽取一半的大鼠,取肺组织进行HE染色法以及免疫组化法进行组织形态观察,酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中TNF-α、HPA、IL-10的水平。从以上几个方面综合评估中药复苏合剂治疗脓毒症ARDS的疗效。研究结果:（1）大鼠一般情况:复苏合剂治疗组大鼠的一般状态较模型组有改善。（2）免疫组化法观察肺组织微血管数目/视野:空白组大鼠平均微血管7-9条/视野。造模后24h,模型组肺组织微血管数量较空白组减少,复苏合剂高、中、低剂量组微血管数量较模型组增加。造模后48h,模型组血管破坏较重,未查见微血管,复苏合剂高、中、低剂量组微血管数量增加。（3）HE染色法观察肺组织肺损伤评分:造模后24h,模型组肺损伤评分均数由0.91增加为1.58。复苏合剂高中低剂量组肺损伤评分降低,低剂量组1.33,中剂量组0.916,高剂量组0.916。造模后48h,模型组肺损伤评分均数由0.91增加为1.83,复苏合剂高中低剂量组肺损伤评分降低,低剂量组1.25,中剂量组1.08,高剂量组0.83。（4）在24h时,与空白组比较,模型组大鼠血清HPA水平无明显升高（P>0.05）;与模型组比较,复苏合剂高剂量组、复苏合剂中剂量组、复苏合剂低剂量组血清HPA水平均无明显变化（P>0.05）。在48h时,与空白组比较,模型组血清HPA含量明显增多（P<0.01）;与模型组比较,复苏合剂高剂量组血清HPA水平未见明显下降（P>0.05）;与模型组比较,复苏合剂中剂量、低剂量组血清HPA水平明显降低（P<0.01）。（5）在24h时,与空白组比较,模型组大鼠血清IL-10、TNF-α水平均有明显升高（P<0.01）。在48h时,与模型组比较,复苏合剂高、中、低剂量组血清IL-10、TNF-α水平均明显降低（P<0.01）;复苏合剂高、中、低剂量组进行组间比较,血清IL-10、TNF-α水平无明显差异（P>0.05）。研究结论:（1）复苏合剂能够改善脓毒症相关性ARDS大鼠的一般情况,提高生存质量;（2）复苏合剂能减轻脓毒症相关性ARDS过程肺组织出血、炎症、渗出、断裂的发生,减少微血管损伤,以改善肺组织形态而起到治疗的作用;（3）2个时间点复苏合剂高、中、低剂量均明显降低血清中IL-10、TNF-α水平,在48h时间点复苏合剂中、低剂量明显降低血清中HPA水平。综合以上几方面得出复苏合剂对脓毒症相关性ARDS有一定的治疗作用。
刘薇,张慧,常诚,林书祥,赵津生,郑捷,黄敬孚[4]（2010）在《抗氧化剂对急性肺损伤大鼠细胞因子的影响研究》文中研究表明目的:探讨急性肺损伤（ALI）的发病机制及抗氧化剂对ALI大鼠细胞因子的影响。方法:健康、成熟Wistar大鼠60只随机平均分为模型组和治疗组,2组均以大肠杆菌腹腔注射,建立ALI动物模型。治疗组在注射大肠杆菌30min后,经大鼠尾静脉注射还原型谷胱甘肽。分别于注射大肠杆菌后3、6、12h测定2组血中IL-8、IL-10的变化。结果:模型组注射大肠杆菌后3h出现ALI症状,6h更为明显,12h口吐粉红色分泌物,解剖后肉眼所见双肺有明显水肿及出血点,氧合指数及肺湿/干重比均达到ALI诊断标准。治疗组3h无明显变化,6h呼吸稍促,12h肺组织仅轻度水肿。在使用还原型谷胱甘肽后,治疗组肺湿/干重比各时段检测值均低于模型组,其中6、12h差异有统计学意义（P<0.05）;IL-8检测值各时段均低于模型组,差异均有统计学意义（P<0.05）;IL-10检测值各时段均高于模型组,6、12h差异有统计学意义（P<0.05）。结论:ALI时存在炎性介质的失控与失衡,应用还原型谷胱甘肽后可有效调控炎性介质,从而降低ALI的发生概率。
刘明东[5]（2010）在《JNK通路在急性胰腺炎相关性肺损伤的作用机制及丹参酮ⅡA的干预作用研究》文中提出研究背景急性胰腺炎是以胰腺间质水肿、出血、腺泡细胞空泡变性、坏死及炎症细胞浸润为病理特征、病变程度不一、结局难以预料的急性炎症性疾病。急性胰腺炎常伴有全身炎症反应,约20%发展为重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis, SAP）,其病死率可高达30%-50%。随着国人生活习惯和饮食结构的变化,我国急性胰腺炎（包括重症胰腺炎）的发病呈现增高的趋势。因此,SAP是目前我国常见的、严重威胁人类健康的重大疾病。急性胰腺炎相关性肺损伤（acute pancreatitis-associated lung Injury, APALI）是急性重症胰腺炎最早出现、最常见、也是最为严重的全身并发症。急性胰腺炎相关性肺损伤发病机制复杂,近年来很多实验性研究集中在炎性细胞和炎性介质激活途径上,一般认为肺损伤是全身炎症反应在肺部的局部表现,而肺脏由于其组织特异性易于发生炎性损伤。积累的大量证据表明胰腺实质中活化的单核巨噬细胞、多核粒细胞释放的TNF-α、LI-1和IL-6等多种促炎细胞因子不仅有助于启动急性胰腺炎局部炎症的形成和发展,而且也是导致包括肺损伤在内全身炎症反应的重要细胞因子,促炎因子的过表达不仅加重了急性胰腺炎的损伤程度,同时也加重了胰腺炎相关性肺损伤的的严重程度。所以降低重症胰腺炎肺组织中炎症因子的水平一直是人们研究如何治疗急性胰腺炎相关性肺损伤的方向。大量的动物实验证明,降低全身或肺组织中炎性细胞因子的水平对急性胰腺炎相关性肺损伤具有治疗作用。但是在急性胰腺炎相关性肺损伤的发病过程中引起肺组织中炎性细胞因子水平增加的原因和机制目前尚不清楚,只有在发病机制上找到原因才能给我们对急性胰腺炎相关性肺损伤的治疗带来理论指导,从而大大降低急性重症胰腺炎的死亡率。最近,JNK信号通路在急性胰腺炎发病中所起的作用越来越受到人们的关注。研究显示,在急性胰腺炎的动物模型中,JNK信号通路被激活,JNK信号通路的激活与炎症因子密切相关,JNK信号通路被激活是胰腺损伤的早期事件,运用JNK通路特异性阻断剂SP600125,可以通过抑制JNK信号通路的激活来下调TNF-α、ICAM-1、IL-1β等促炎症因子的表达,明显减轻胰腺的病理损害,对急性胰腺炎具有治疗作用。由此可见JNK信号通路在急性胰腺炎的发病过程中起着重要的作用。同时人们发现JNK信号通路的激活在肺损伤的发病过程中起着重要的作用,体外动物实验表明,JNK信号通路的激活在镍、脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的急性肺损伤中起着重要的作用,而且应用特异性JNK信号通路阻断剂对肺损伤的治疗,特别是脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（一种被认为与急性胰腺炎相关性肺损伤有相同的发病途径）的治疗均取得了一定的效果。但到目前为止,JNK信号通路在急性胰腺炎相关性肺损伤中的作用机制尚不清楚。本实验分为两个部分：第一部分JNK通路在急性胰腺炎相关性肺损伤的作用及其机制；第二部分：丹参酮ⅡA对急症胰腺炎相关性肺损伤的干预作用。第一部分：JNK通路在急性胰腺炎相关性肺损伤的作用及其机制目的本研究旨在观察JNK信号通路在牛磺胆酸钠诱导的大鼠急性出血坏死性胰腺炎肺组织中的激活情况,并探讨JNK信号通路激活与肺组织损伤程度的相关性；同时应用特异性JNK通路阻断剂SP600125,进一步证实JNK信号通路激活在急性胰腺炎相关性肺损伤发病过程中所起的作用。方法SD大鼠72只,分为3组,每组24只。S组：假手术对照组,24只大鼠,开腹后翻动大鼠十二指肠并轻触胰腺数次,缝合腹部；SAP组：以1ml／kg的剂量逆行胰胆管注射灭菌5%牛磺胆酸钠,诱导大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型,这种模型类似于人类的重症胰腺炎；SP600125干预组：在急性出血坏死性胰腺炎大鼠模型诱导前30分钟,以15mg／kg的剂量通过腹腔注射SP600125；每组分3小时、6小时、12小时和24小时4个时间点,各时间点大鼠数目为6只。按计划于各时间点处死大鼠,收集血清及胰腺和肺组织。肺水肿严重程度以肺组织湿干重比表示；以碘一淀粉比色法测定血清淀粉酶,ELISA方法测定肺组织TNF-α水平和工L-1β水平,H.E染色用于胰腺和肺组织损伤的病理学评价,采用分光光度计测定肺组织中髓过氧化酶（MPO）、免疫组化方法测定肺组织中ICAM-1表达,用Westernblot方法对肺组织中JNK和PJNK进行蛋白定量。结果假手术对照组3hr、6hr、12hr、24hr血清淀粉酶分别为501±85、512±91、518±94和532±86,胰腺病理损伤评分为0；肺脏病理损伤评分为0,肺湿干重比为2.29±0.10、2.22±0.23、2.17±0.11和2.31±0.13；肺脏MPO活性为1.33±0.56、1.56±0.43、1.51±0.23和1.47±0.48；肺组织IL-1β含量为80.3±21.2、92.3±23.5、87.3±19.4和89.7±22.1；肺组织TNF-α含量为70.6±21.2、67.6±19.8、68.4±19.5和74.5±22.6；肺组织ICAM-1免疫组化阳性积分S组0.11±0.01、0.17±0.02、0.14±0.02和0.16±0.09；PJNK相对光密度值为0.65±0.12。SAP组3hr、6hr、12hr、24hr血清淀粉酶分别为2506±215、3701±264、4101±411和3212±295；胰腺病理损伤评分8.24±0.63、10.65±1.02、14.00±0.96和14.09±0.75；肺脏病理损伤评分为3.0±0.4、4.7±0.7、7.5±0.3和6.5±0.7；肺湿干重比为3.52±0.42、3.96±0.15、4.53±0.08和4.26±0.12；肺脏MPO活性为5.64±0.76、6.44±0.77、7.19±0.83和7.36±0.71；肺组织IL-1β含量211.2±19.3、315.4±34.2、399.2±43.2和353.4±38.3；肺组织TNF-α含量为348.5±42.8、433.5±63.4、394.3±56.3和365.3±39.9；肺组织ICAM-1免疫组化阳性积分为0.8±0.09、104±0.11、1.44±0.12和1．22±0.13；PJNK相对光密度值为1.03±0.22、1.24±0.17、1.38±0.21、1.28±0.24。与假手术对照组相比,SAP组在各个时间点的血清淀粉酶、胰腺病理损伤评分和肺脏病理评分均显着增高（P<0.05）,我们成功的建立了重症胰腺炎相关性肺损伤的动物模型,SAP组个时间点的肺湿干重比、MPO活性、IL-1β含量、TNF-α含量、ICAM-1表达均明显增高,JNK蛋白总量无变化,但各时间点的PJNK蛋白均显着高于假手术对照组（P<0.05）。应用特异性JNK信号通路阻断剂SP600125后,检测肺组织3hr、6hr、12hr和24hr肺脏病理损伤评分为2.1±0.3、3.2±0.2、6.0±0.7和4.0±0.3；肺湿干重比为SP600125组3.08±0.09、3.54±0.22、3.35±0.16和3.01±0.38；肺脏MPO活性为3.36±0.36、4.27±0.52、5.16±0.26和5.46±0.61（单位：u／g）；肺组织IL-1β含量为154.3±11.2、221.4±21.5、289.4±23.4和267.7±15.1（单位：pg／mg）肺组织TNF-α含量为243.8±32.3、317.6±22.8、272.3±20.5和225.5±32.6（单位：pg／mg）；肺组织ICAM-1免疫组化阳性积分为0.59±0.18、0.77±0.20、0.84±0.23、0.93±0.31；PJNK相对光密度值为0.69±0.14、0.58±0.22、0.85±0.17、0.18±0.05。与SAP组相比,SP600125组各个时间点的肺湿干重比、MPO活性、IL-1β含量、TNF-α含量、ICAM-1表达均明显降低,JNK蛋白无明显变化,但PJNK蛋白显着降低,同时肺脏病理损伤评分明显改善（P<0.05）。通过相关性比较我们发现,肺组织PJNK表达与肺病理损伤评分存在显着相关性（P<0.05）。结论：1、利用5%牛磺胆酸钠逆行大鼠胰胆管注射可建立良好的APALI动物模型,为研究APALI的机制及探讨防治策略提供了试验平台。2、JNK通路激活是重症胰腺炎相关性肺损伤发病的早期事件,其激活可能参与了APALI的发生和发展。3、应用JNK通路阻断剂对急性胰腺炎相关性肺损伤有治疗作用,第二部分：丹参酮ⅡA对急症胰腺炎相关性肺损伤的治疗作用目的评价传统中药丹参酮的有效单体丹参酮ⅡA对大鼠急性胰腺炎相关性肺损伤是否具有治疗作用,并初步探讨其治疗机理。方法SD大鼠72分为3组,每组24只。S组：假手术对照组,24只大鼠,开腹后翻动大鼠十二指肠并轻触胰腺数次,缝合腹部；SAP组：以lml／kg的剂量逆行胰胆管注射灭菌5%牛磺胆酸钠,诱导大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型,这种模型类似于人类的重症胰腺炎；丹参酮ⅡA组：在急性出血坏死性胰腺炎大鼠模型诱导前30分钟,以20mg／kg的剂量通过腹腔注射丹参酮ⅡA。每组分3小时、6小时、12小时和24小时4个时间点,各时间点大鼠数目为6只。按计划于各时间点处死大鼠,收集血清及胰腺和肺组织。肺水肿严重程度以肺组织湿干重比表示；以碘一淀粉比色法测定血清淀粉酶,ELISA方法测定肺组织TNF-α水平和IL-1β水平,H.E染色用于胰腺和肺组织损伤的病理学评价,采用分光光度计测定肺组织中髓过氧化酶（MPO）、免疫组化方法测定肺组织中ICAM-1表达,用Westernblot方法对肺组织中JNK和PJNK进行蛋白定量。结果S组肺湿干重比为、2.12±0.23、2.15±0.11和2.33±0.23；肺脏MPO活性为1.23±0.26、1.66±0.33、1.54±0.21和1.42±0.28；肺组织IL-1β含量为82.3±11.2、95.3±21.5、82.3±18.4和92.7±21.1；肺组织TNF-α含量为72.6±11.2、69.6±13.8、69.4±12.5和77.5±21.6；肺组织ICAM-1免疫组化阳性积分S组0.11±0.01、0.17±0.02、0.14±0.02和0.16±0.09；SAP组肺脏病理损伤评分为3.1±0.3、4.6±0.6、7.6±0.3和6.6±0.7；肺湿干重比为3.62±0.43、3.98±0.35、4.54±0.28和4.27±0.12；肺脏MPO活性为5.66±0.66、6.47±0.73、7.21±0.84和7.41±0.72；肺组织IL-1β含量212.2±18.3、319.4±32.2、402.2±41.2和357.4±34.3；肺组织TNF-α含量为351.5±41.8、443.5±53.4、397.3±51.3和365.3±37.9；肺组织ICAM-I免疫组化阳性积分为0.81±0.09、1.14±0.11、1.45±0.12和1.26±0.13。应用丹参酮ⅡA干预后,我们检测肺组织中3hr、6hr、12hr和24hr时间点各项指标的结果分别为：肺湿干重比为3.17±0.29、3.24±0.22、3.49±0.26和3.21±0.38；肺组织MPO活性为4.03±0.39、4.75±0.55、5.66±1.26和5.45±0.719（单位：u／g）；肺组织IL-1β含量为174.3±15.2、211.4±17.5、297.7±21.4和277.9±15.6（单位：pg/mg）;肺组织TNF-α含量为253.8±27.3、337.6±22.3、312.3±22.5和311.5±32.6（单位：pg／mg）；肺组织ICAM-1免疫组化阳性积分为0.63±0.15、0.82±0.19、1.01±0.23和0.96±0.31；肺脏病理损伤评分为2.2±0.3、3.6±0.2、6.3±0.7和5.1±0.3；PJNK相对光密度值为1.15±0.08、1.05±0.23、1.34±0.18、0.74±0.16。与SAP组相比,PJNK蛋白显着减少（P<0.05）,肺组织湿干重比、肺组织中MPO活性、细胞因子IL-1β和TNF-α的含量、肺组织中ICAM-1的表达均显着性减少（P<0.05）,同时肺脏病理损伤评分显着改善（P<0.05）。结论1、丹参酮ⅡA对实验动物的APALI具有治疗作用2、抑制JNK信号通路可能是丹参酮ⅡA治疗作用的重要机制
梁艳[6]（2007）在《TLR-4在急性重症胆管炎大鼠肺组织中的表达及意义》文中认为急性重症胆管炎（ACST）是我国的常见病和多发病。尽管现已采用手术、抗生素和多种支持疗法综合治疗,但因其多引起肺部损伤发生ARDS导致病死率很高,目前该病成为外科感染的重点和难点。研究表明细菌和内毒素诱发的细胞因子和炎症介质（TNF-α）过度释放、促炎介质/抗炎介质失衡,是引起ARDS的关键。近年研究发现TLR-4是介导炎症反应的重要分子之一。本研究通过对急性重症胆管炎大鼠模型6h、24h肺组织TLR-4的表达与外周血中细胞因子TNF-α的表达及大鼠肺功能障碍和病理改变的关系作一探讨,以明确TLR-4在急性重症胆管炎大鼠肺组织中的表达规律。研究发现急性重症胆管炎大鼠出现了肺脏功能障碍及病理损伤;急性重症胆管炎大鼠外周血TNF-α随时间的变化而增高,与肺脏损伤成正相关;TLR-4在肺脏组织中表达显着上调,与TNF-α的释放呈正相关。因此认为TLR-4在急性重症胆管炎大鼠肺脏组织中表达显着上调是引起机体出现ARDS的重要原因之一。
于宏[7]（2008）在《胆道感染细菌与机体相互作用机制的实验研究》文中提出前言原发性肝胆管色素结石引起的胆道感染在我国是常见病和多发病。在胆管色素结石存在的情况下,病人通常呈无症状胆汁带菌状态;当发生急性胆道梗阻、胆道高压时则出现急性胆管炎的表现。研究表明,胆管色素结石引起的胆道感染通常为G-杆菌、G+球菌和厌氧菌引起的混合感染,其中大肠杆菌是引起胆道感染的代表菌株。目前对于胆道感染的细菌学方面研究仅限于对胆汁、胆石的细菌培养及细菌的药物敏感性及某些酶学方面的研究。对于能够引起胆道感染的细菌的全部特点及细菌与宿主之间相互作用机制方面的研究很少。这两个方面的研究对于理解细菌的来源、细菌的侵入途径、细菌的作用位点以及机体对细菌的先天和后天免疫防御反应等方面具有重要意义,对于理解肝胆管色素结石的成因具有重要意义,对于寻找预防和治疗胆道感染及肝胆管色素结石的新方法和新途径具有重要意义。本文通过对引起胆道感染的大肠杆菌P菌毛的表达及papG粘附素基因的检测,来明确胆道感染大肠杆菌的另一个特点—粘附特性;通过对急性重症胆管炎大鼠模型多器官NF-kB、TLR-4、TLR-2的表达,来明确机体对病原微生物的先天和后天免疫防御反应,探讨急性重症胆管炎时多器官功能不全的机理,并对从感染的始动环节进行干预,减轻全身炎症反应综合症和多器官功能不全提供理论依据。实验方法一、实验对象1.收集中国医科大学附属盛京医院临床微生物室保留的从胆道感染病人胆汁内培养出的大肠杆菌菌株34例及从健康志愿者粪便中分离出的大肠杆菌菌株8例,分别进行甘露醇抗性血凝试验（MRHA）,并应用PCR法扩增所有菌株3型papG粘附素基因并进行分析比较。2.Wistar大鼠,160-220g,雌雄不限。制成急性重症胆管炎大鼠模型（胆道梗阻+E.coli）作为实验组（36例）,单纯胆道梗阻模型（胆道梗阻+Saline）作为对照组（18例）。二、标本采集1.采集实验组和对照组不同时点（1h、6h和24h）大鼠血标本、肝脏组织标本、肺脏组织标本和小肠组织标本。2.一部分组织标本立即置入-80℃保存,待行RT-PCR和Western-Blot检测;另一部分立即置入5%多聚甲醛溶液中固定,待行组织病理和免疫组织化学检测。三、检测指标1.P菌毛表达检测:应用甘露糖抗性血凝试验（MRHA）对42株大肠杆菌进行检测,凡凝集当时或4℃过夜,观察凝集反应呈≥“++”者,判定为阳性。2.papG粘附素基因检测:应用PCR扩增,检测42株大肠杆菌粘附素等位基因papGⅠ、papGⅡ、papGⅢ的表达情况。3.血清炎症介质和细胞因子检测:应用ELISA方法检测实验组和对照组不同时点血中TNF-α、IL-10、IL-4浓度,表明全身炎症反应强度。4.肝脏、肺脏、回肠组织病理学检测:检测实验组和对照组不同时点肝脏、肺脏、回肠组织病理学改变,表明组织病理学改变程度。5.NF-kB蛋白表达检测:应用免疫组织化学方法检测在肝脏、肺脏及小肠组织中的定位表达情况,应用Western-Blot方法检测NF-kB在肝脏组织中的定量表达情况。6.NF-kB mRNA表达检测:应用RT-PCR方法检测NF-kB mRNA在肝脏、肺脏及小肠组织中的定量表达情况。7.TLR-4、TLR-2蛋白表达检测:应用免疫组织化学方法检测在肝脏、肺脏及小肠组织中的定位表达情况,应用Western-Blot方法检测TLR-4、TLR-2在肝脏组织中的定量表达情况。8.TLR-4、TLR-2 mRNA表达检测:应用RT-PCR方法检测TLR-4、TLR-2mRNA在肝脏、肺脏及小肠组织中的定量表达情况。实验结果1.P菌毛表达检测:胆道内大肠杆菌P菌毛表达阳性率为47.06%（16/34）,显着高于肠道内大肠杆菌P菌毛表达阳性率0%（0/8）（p＜0.05）。2.papG粘附素基因检测:胆道内大肠杆菌粘附素等位基因papGⅠ、papGⅡ、papGⅢ的表达阳性率分别为67.65%,44.12%,82.35%,其中papGⅢ显着高于肠道内大肠杆菌的表达阳性率37.5%（p＜0.05）。3.血清炎症介质和细胞因子检测:实验组外周血中TNF-α、IL-4水平术后1h即显着升高,6h达到峰值,均显着高于对照组,24h有所下降。IL-10浓度在术后1h即达到峰值,并显着高于对照组,此后随时间变化逐渐下降。4.肝脏、肺脏、回肠组织病理学检测:肝脏实验组1h组可见肝细胞浊肿,肝窦、肝细胞周围及汇管区有少量炎细胞浸润。6h组可见肝细胞浊肿明显,排列疏松紊乱,明显脂肪变性,有散在的点状坏死灶,坏死灶内较大量炎细胞浸润;12h组病理改变同6h组,程度更严重,坏死灶较多,呈大片状,脓肿形成,内有大量炎细胞浸润。肺脏实验组1h组肺泡壁增厚,间质渗出,少量炎细胞浸润。6h组可见肺内出血,肺间质渗出增多,肺实变加重,较大量炎细胞浸润;12h组病理改变同6h组,程度更严重,可见有肺出血及脓肿、坏死灶形成。回肠病理形态学改变不大,实验组24h组可见小肠粘膜少量炎细胞浸润。5.NF-kB蛋白表达检测:免疫组化发现重症胆管炎大鼠术后1h、6h、24h可见肝细胞、肺上皮细胞、肠粘膜上皮细胞内有棕色颗粒均匀分布于细胞浆,部分位于细胞核内,其中以肝细胞6h组最为明显。对照组大鼠相应组织则为阴性或仅有少量阳性染色细胞。Western-Blot方法检测到重症胆管炎和对照组大鼠术后肝组织NF-kB蛋白的表达,与相应mRNA表达规律一致;重症胆管炎大鼠NF-kB在术后6h显着高于对照组（11805.67±2410.69 vs9888.67±244.85.p=0.026）。6.NF-kB mRNA表达检测:重症胆管炎大鼠术后1h肝组织NF-kB mRNA即升高,6h达到高峰并显着高于对照组（1.95±1.67 vs 0.75±0.22,p=0.001）,24h下降。肺组织NF-kB mRNA表达与肝一致。术后1h NF-kB mRNA即升高,6h达到高峰并显着高于对照组（1.69±0.36 vs 0.58±0.19,p=0.033）,24h下降。重症胆管炎大鼠术后1h肠组织NF-kB mRNA即升高（0.38±0.16 vs 0.25±0.04,p=0.001）,6h达到高峰（0.86±0.34 vs 0.57±0.05,p=0.003）,24h下降（0.63±0.24 vs 0.25±0.05,p=0.011）,均显着高于对照组。7.TLR-4、TLR-2蛋白表达检测:应用免疫组织化学方法发现对照组1h、6h、24h组肝脏、肺脏及小肠未见或仅有少量TLR-4和TLR-2表达。急性重症胆管炎大鼠1h即可在肝脏、肺脏中表达,6h组表达最强,24h表达减弱。TLR-4和TLR-2表达均位于胞浆内。Western-Blot方法检测到重症胆管炎和对照组大鼠术后肝组织TLR-2的表达随时间的延长,表达逐渐增强,6h达到高峰（11278.50±1066.73 vs 8434±470.57,p=0.03）,24h略有下降但显着高于对照组（10964.67±883.33 vs 8288.83±212.53,p=0.008）。重症胆管炎和对照组大鼠术后肝组织TLR-4的表达与TLR-2一致,1h增高（8613.33±1999.22vs 6406.50±224.98,p=0.05）,6h达到峰值（11209.33±1271.09 vs 7287.33±240.78 p=0.12）,24h略有下降。8.TLR-4、TLR-2 mRNA表达检测:应用RT-PCR方法检测到重症胆管炎大鼠术后肝组织TLR-4mRNA术后1h即开始升高,6h达峰并显着高于对照组（14.80±2.58 vs 9.30±1.08 p=0.002）,24h开始下降。肺组织TLR-4mRNA术后1h即开始升高,6h达峰,24h后轻度下降（8.02±1.32 vs 4.67±0.53p=0.037）。肠组织TLR-4mRNA表达与肝、肺组织相似,即术后11h即开始升高（8.25±2.14vs5.01±0.68 p=0.05）,6h达峰,24h开始下降,但显着高于对照组（7.89±3.14 vs 6.96±1.07 p=0.001）。重症胆管炎大鼠术后肝组织TLR-2mRNA术后1h即开始升高（1.51±0.83 vs 1.18±0.25 p=0.002）,6h达峰,24h下降。肺组织TLR-2mRNA术后1h即开始升高,（10.13±5.20 vs5.54±1.12 p=0.001）,6h达峰（11.59±5.11 vs6.89±1.07 p=0.001）,24h后下降。肠组织TLR-2mRNA表达术后1h小时即开始升高,6h达峰（4.78±1.83vs2.05±1.40 p=0.002）,24h开始下降,但仍显着高于对照组（4.52±1.30 vs 2.59±1.36 p=0.004）。结论1.致胆道感染大肠杆菌P菌毛表达阳性率显着高于正常肠道内大肠杆菌;2.致胆道感染大肠杆菌papG粘附素基因表达阳性率显着高于正常肠道内大肠杆菌,且以papGⅢ为主;3.重症胆管炎大鼠肝脏、肺脏及小肠组织NF-kB活化,与血中促炎介质和细胞因子呈正相关;随时间变化,促炎及抗炎介质出现失衡;4.重症胆管炎大鼠肝脏、肺脏及小肠组织TLR-4、TLR-2表达明显增强,并与相应组织中NF-kB及血中促炎介质和细胞因子呈正相关。
冀强[8]（2006）在《巨噬细胞迁徙抑制因子（MIF）和Toll样受体在急性重症胆管炎所致多器官损伤中的作用》文中指出目的：急性胆管炎是细菌感染引起的胆道系统急性炎症，进一步发展，可造成多器官损伤。本实验通过研究急性重症胆管炎大鼠模型肝脏、肺脏和心脏巨噬细胞移动抑制因子和Toll样受体4表达量的改变，并对其与肿瘤坏死因子的相关性探讨，为急性重症胆管炎致多器官损伤的发病机制提供新研究思路和参考数据。 方法：应用荧光定量PCR测定大鼠急性重症胆管炎组和对照组在2，6，12，24，36小时不同时段的MIF基因及Toll样受体在损伤的肝脏、心脏、肺脏中表达变化。应用放射免疫法测定急性重症胆管炎组大鼠血液中肿瘤坏死因子（TNF）的含量，并制作其在不同时间变化曲线。通过HE染色，观察损伤的肝脏、心脏和肺脏在不同时间病理形态的变化。 结果：1．通过HE染色发现急性重症胆管炎组的肝脏组织受伤程度随时间变化加重。肺脏、心脏组织病理变化不明显。 2．本实验通过PCR测定发现：急性重症胆管炎组中肝脏，心脏，肺脏组织的MIF和TLR4在2，6，12，24，36小时表达规律具有一致性，且高于对照组。差异均有显着性（P＜0.05）
汪良芝[9]（2005）在《重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的实验研究》文中研究指明第一部分 重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的动物模型制作 目的 建立简便、易复制、重复性好的重症急性胰腺炎（SAP）并发急性肺损伤（ALI）动物模型。方法30只雄性SD大鼠随机分为五组:假手术组（SO组）、SAP组后1h、4h、8h、12h组。以0.1ml/min匀速逆行胰胆管注入5%牛磺胆酸钠（0.1ml/kg）建立SAP并发ALI大鼠模型。牛磺胆酸钠注射后1h、4h、8h、12h检测大鼠腹水量、血淀粉酶、血气分析、肺湿干重比以及胰腺和肺组织病理学改变。结果随着时间的延长,SAP组腹水量逐渐增加,血淀粉酶逐渐升高。各时相点所有动物的胰腺组织均存在不同程度的间质水肿、炎细胞浸润、胰腺组织灶性或片状出血坏死,胰腺及周围组织出现脂肪坏死及皂化斑,并伴血性腹水,呈典型的SAP病理改变。同时肺组织在各时相点形态上出现了不同程度的炎细胞浸润及肺间质、肺泡水肿、出血、灶性或大片肺不张等典型的ALI病理改变;在功能方面,随着肺损伤的加重,PaO2进行性下降,PaCO2则有逐渐升高,符合临床ALI血气特征。随着胰腺损伤的逐渐加重,肺损伤程度也逐渐加重。结论 牛磺胆酸钠诱导SAP并发ALI的大鼠模型是成功的,本模型操作方法简单,重复性好。 第二部分 重症急性胰腺炎并发急性肺损伤机制的实验研究 目的 探讨牛磺胆酸钠诱导的大鼠SAP并发ALI的发病机制。方法30只雄性SD大鼠随机分为五组:SO组、SAP组后1h、4h、8h、12h组。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立SAP并发ALI大鼠模型。牛磺胆酸钠注射后1h、4h、8h、12h电泳迁移率改变法（EMSA）检测肺组织匀浆细胞核提取物中NF-кB的表达;Western blot法检测ICAM-1的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清TNF-α、IL-1β的浓度;RT-PCR检测肺组织匀浆中TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达;检测肺组织匀浆中MPO水平;观察肺组织病理学改变。结果SAP组术后1h肺组织匀浆NF-кB活性开始升高,血清中TNF-α在1h
崔华雷,秦明放,鲁焕章,卢奕,姚智,曹玉梅,刘敬[10]（2000）在《急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作》文中研究表明目的 :复制急性重症胆管炎（ACST）引发的急性肺损伤 （ALI）的动物模型。方法 :通过胆总管远端结扎 ,近端注入菌液并封闭的方法 ,造成大鼠ACST后观察肺功能及病理形态改变。结果 :实验组PaO2/FiO2 下降 ;肺系数升高 ,肺含水量增加 ;光镜可见充血、水肿、粒细胞浸润和透明膜。结论 :此模型符合ALI诊断标准及动物模型的考察指标 ,说明本模型是成功可靠的
二、急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作（论文提纲范文）
（1）miR-139-5p通过靶向调控ROCK1改善脓毒症肺损伤的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 miR-139-5p在盲肠结扎穿孔(CLP)诱导脓毒症肺损伤小鼠模型中的研究 |
| 1 前言 |
| 2 实验方法与材料 |
| 3 统计方法 |
| 4 结果 |
| 5 小结 |
| 6 讨论 |
| 第二章 miR-139-5p在LPS诱导体外正常人支气管上皮细胞(NHBE)损伤模型中的研究 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料与方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 结果 |
| 5 小结 |
| 6 讨论 |
| 第三章 综述microRNAs与ROCK1在脓毒症中的研究进展 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（2）通腑泻肺方治疗脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 脓毒症相关ARDS的概念及认识的变迁 |
| 1.2 ARDS异质性研究 |
| 1.3 脓毒症相关ARDS的主要发病机制 |
| 1.3.1 促炎反应与抗炎反应的平衡失调 |
| 1.3.2 血管内皮损伤和肺泡表面活性物质减少 |
| 1.3.3 凝血功能紊乱 |
| 1.3.4 肠道细菌/细菌内毒素移位 |
| 1.4 中医对脓毒症相关ARDS的理论认知 |
| 1.5 中西医结合治疗脓毒症相关ARDS进展 |
| 1.5.1 脓毒症病因治疗 |
| 1.5.2 机械通气治疗 |
| 1.5.3 新型治疗策略的选择 |
| 1.5.4 中医药及针灸治疗 |
| 第二章 通腑泻肺法对急性呼吸窘迫综合征疗效的系统评价 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 搜索方案和研究选择 |
| 2.2.2 确定研究的特点 |
| 2.2.3 偏倚风险 |
| 2.2.4 统计学分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 通腑泻肺方对脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征患者肺肠功能的影响 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 资料与方法 |
| 3.2.1 研究设计 |
| 3.2.2 病例选择 |
| 3.2.3 研究方法 |
| 3.2.4 观察指标 |
| 3.2.5 统计学方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 一般情况 |
| 3.3.2 动脉血气分析及氧合指数 |
| 3.3.3 肠屏障功能及炎症因子指标 |
| 3.3.4 28d累积死亡率 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠NLRP3炎症小体及细胞因子影响的实验研究 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.1.1 失控的炎症反应继发的肺损伤是脓毒症相关ARDS核心发病机制 |
| 4.1.2 NLRP3炎症小体介导的炎症反应可能与脓毒症炎症风暴相关,进一步加重继发靶器官损伤 |
| 4.1.3 通腑泻肺(TFXF)治疗脓毒症相关ARDS临床疗效显着,可能通过抑制NLRP3的激活,抑制过度的炎症反应,减轻脓毒症相关肺损伤 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 通腑泻肺方对脓毒症大鼠72h生存率的影响 |
| 4.3.2 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠肺组织炎性因子蛋白表达的影响 |
| 4.3.3 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠血清炎性因子蛋白表达的影响 |
| 4.3.4 通腑泻肺方对脓毒症相关ARDS大鼠肺组织炎症小体及炎性因子蛋白表达的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录: 中英文缩略语 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）复苏合剂对内毒素诱导的脓毒症相关性ARDS模型大鼠的疗效相关研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词对照表 |
| 引言 |
| 理论研究 |
| 一、ARDS的定义及诊断的发展 |
| 二、ARDS病因及病理生理机制研究 |
| 三、ARDS的治疗概述 |
| 动物实验研究 |
| 一、实验材料与仪器 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)大鼠一般情况 |
| (二)大鼠肺组织免疫组化法形态学分析 |
| (三)大鼠肺组织HE染色形态学比较 |
| (三)大鼠血清HPA水平比较 |
| (四)大鼠血清IL-10水平 |
| (五)大鼠血清TNF-α水平 |
| (六)结论 |
| 四、讨论及分析 |
| (一)ARDS模型大鼠的建立 |
| (二)本实验治疗药物的选择 |
| (三)复苏合剂对ARDS大鼠肺组织形态的影响 |
| (四)复苏合剂对ARDS大鼠血清TNF-α、IL-10的影响 |
| (五)复苏合剂对ARDS大鼠血清HPA的影响 |
| 问题与展望 |
| 结语 |
| 参考文献1 |
| 综述 |
| 参考文献2 |
| 致谢 |
| 在读期间发表论文 |
（4）抗氧化剂对急性肺损伤大鼠细胞因子的影响研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况比较 |
| 2.2 肺湿/干重比检测结果 |
| 2.3 IL-8、IL-10检测结果 |
| 2.4 病理观察 |
| 3 论讨 |
（5）JNK通路在急性胰腺炎相关性肺损伤的作用机制及丹参酮ⅡA的干预作用研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 JNK通路在急性胰腺炎相关性肺损伤的作用及其机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 丹参酮ⅡA对急性胰腺炎相关性肺损伤的治疗作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 缩略语与英汉对照 |
| 综述 |
| 攻读博士学位期间所发表的论文 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）TLR-4在急性重症胆管炎大鼠肺组织中的表达及意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 第一章 引言 |
| 第二章 材料和方法 |
| 一、实验动物 |
| 二、实验药品及试剂 |
| 三、实验仪器 |
| 四、实验方法 |
| （一） 菌悬液制备 |
| （二） 动物模型的制备 |
| （三） 标本采集 |
| （四） 大鼠肝脏、肺脏病理形态学观察 |
| （五） 血常规检测、血气分析、肝脏功能分析 |
| （六） 肺湿/干检测 |
| （七） ELISA 法检测外周血 TNF-α含量 |
| （八） 免疫组化法检测肺组织 TLR-4 表达 |
| （九） RT-PCR 法检测肺组织中 TLR-4mRNA 的含量 |
| 五、统计方法 |
| 第三章 结果与讨论 |
| 一、动物模型的建立及肝脏形态学改变 |
| 二、生化指标及血气分析检测 |
| 三、肺脏组织的病理改变 |
| 四、外周血 TNF-α检测 |
| 五、肺脏TLR-4 表达的免疫组化检测 |
| 六、肺脏 TLR-4 m RNA 表达 |
| 七、讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写词 |
| 致谢 |
（7）胆道感染细菌与机体相互作用机制的实验研究（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| 1.中文论着摘要 |
| 2.英文论着摘要 |
| 二、英文缩略语 |
| 三、论文 |
| 论文一 胆道感染大肠杆菌P菌毛的表达及papG粘附素基因检测 |
| 1.前言 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.本研究创新性的自我评价 |
| 论文二 NF-κB在急性重症胆管炎大鼠多器官中的表达及意义 |
| 1.前言 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.本研究创新性的自我评价 |
| 论文三 TLR-4、TLR-2在急性重症胆管炎大鼠多器官中的表达及意义 |
| 1.前言 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.本研究创新性的自我评价 |
| 四、参考文献 |
| 五、附录 |
| 1.综述 |
| 2.在学期间科研成绩 |
| 3.致谢 |
| 4.个人简介 |
（8）巨噬细胞迁徙抑制因子（MIF）和Toll样受体在急性重症胆管炎所致多器官损伤中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 苏州大学博士学位论文详细摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 重症急性胰腺炎并发急性肺损伤动物模型的制作 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 重症急性胰腺炎并发急性肺损伤机制的实验研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 早期应用地塞米松对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的治疗作用研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 |
| 英文缩略词表 |
| 学习期间发表的论文题录 |
| 致谢 |
（10）急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物与分组 |
| 1.1.1 对照组 (n=12) : |
| 1.1.2 实验组 (胆道感染组, n=18) : |
| 1.1.3 OA组 (油酸组, n=15) : |
| 1.2 实验细菌 |
| 1.3 观测指标 |
| 1.3.1 对照组和实验组: |
| 1.3.2 OA组: |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组动物的PaO2/FiO2测定结果 |
| 2.2 肺系数 |
| 2.3 形态学改变 |
| 3 讨论 |
四、急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作（论文参考文献）
- [1]miR-139-5p通过靶向调控ROCK1改善脓毒症肺损伤的作用机制研究[D]. 赵新民. 南方医科大学, 2021(02)
- [2]通腑泻肺方治疗脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的临床及实验研究[D]. 程璐. 南京中医药大学, 2020(08)
- [3]复苏合剂对内毒素诱导的脓毒症相关性ARDS模型大鼠的疗效相关研究[D]. 杨杭燕. 成都中医药大学, 2018(01)
- [4]抗氧化剂对急性肺损伤大鼠细胞因子的影响研究[J]. 刘薇,张慧,常诚,林书祥,赵津生,郑捷,黄敬孚. 天津医药, 2010(11)
- [5]JNK通路在急性胰腺炎相关性肺损伤的作用机制及丹参酮ⅡA的干预作用研究[D]. 刘明东. 南京中医药大学, 2010(12)
- [6]TLR-4在急性重症胆管炎大鼠肺组织中的表达及意义[D]. 梁艳. 吉林大学, 2007(05)
- [7]胆道感染细菌与机体相互作用机制的实验研究[D]. 于宏. 中国医科大学, 2008(09)
- [8]巨噬细胞迁徙抑制因子（MIF）和Toll样受体在急性重症胆管炎所致多器官损伤中的作用[D]. 冀强. 四川大学, 2006(03)
- [9]重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的实验研究[D]. 汪良芝. 苏州大学, 2005(05)
- [10]急性重症胆管炎致急性肺损伤动物模型的制作[J]. 崔华雷,秦明放,鲁焕章,卢奕,姚智,曹玉梅,刘敬. 天津医科大学学报, 2000(04)