降钙素基因相关肽对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

一、降钙素基因相关肽对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用（论文文献综述）

郭祥^[1]（2020）在《丁苯酞注射液对大鼠蛛网膜下腔出血后CGRP、神经元凋亡的影响研究》文中研究表明目的:在不同的时间点,通过免疫组化及酶联免疫吸附法检测大鼠蛛网膜下腔出血模型中CGRP的水平,通过HE染色观察基底动脉形态学的变化,通过电镜观察神经元凋亡。并予以丁苯酞注射液干预,初步探讨丁苯酞注射液对蛛网膜下腔出血后CGRP、神经元凋亡的影响。方法:选用体重在220-270g的SD雄性大鼠45只。随后采用随机数字法将大鼠随机分为3组:SAH（蛛网膜下腔出血）组（N=15）,SAH+NB P（蛛网膜下腔出血+丁苯酞注射液）组（N=15）,NS（生理盐水）组（N=15）。SAH组利用视交叉前池注血法建立蛛网膜下腔出血模型,SAH+NBP组为造模成功后30分钟开始腹腔注射丁苯酞注射液,总量为5mg/kg/d,分两次注射,NS组为视交叉前池注入等量的生理盐水。每组均随机分为3个亚组:1天组（N=5）、3天组（N=5）、5天组（N=5）,SAH+NBP组1天、3天、5天亚组为连续腹腔注射NBP 1天、3天、5天,每组均于造模后1天行神经功能评分及计算体重下降比。在预定的时间点用ELISA测定大鼠血清CGRP、断头取脑留取脑组织行H E染色观察基底动脉的的形态以及免疫组化测定基底动脉CGRP的表达情况,于SAH、SAH+NBP 1天亚组中各随机取1只大鼠的海马,在电镜下观察神经元凋亡。结果进行统计学分析。结果:1.神经功能评分、体重的下降比:SAH组术后神经功能评分明显高于SAH+NBP（P<0.05）。NS、SAH、SAH+NBP组体重下降比具有明显差异（P<0.05）,SAH组体重下降比高于SAH+NBP组（P<0.05）。2.血清CGRP:SAH、SAH+NBP、NS组的CGRP具有统计学意义（P<0.05）。NS组明显高于SAH组（P<0.05）。SAH+NBP组高于SAH组（P<0.05）,两组血清CGRP均在第三天达到最低值。3.HE染色:NS组可见基底动脉无血管痉挛,内皮细胞完整,管壁平滑;SAH组可见基底动脉内径缩小,内皮细胞肿胀,管壁增厚,以第3天改变最为明显;SAH+NBP组基底动脉内径缩小、内皮肿胀、管壁增厚均较SAH组有改善。4.免疫组织化学结果:NS、SAH、SAH+NBP组基底动脉管壁CGRP的表达差异具有统计学意义（P<0.05）,NS组与SAH、SAH+NBP组相比,基底动脉壁内CGRP的表达量明显增多（P<0.05）,SAH+NBP组基底动脉壁内CGRP的表达量较SAH组明显增多（P<0.05）。5.神经元凋亡:电镜下可观察到SAH组:呈现出典型的神经元凋亡的形态学特征,而SAH+NBP组未看到典型的神经元凋亡结构。结论:1.丁苯酞注射液在大鼠蛛网膜下腔出血后有重要的神经保护作用。2.丁苯酞注射液可能通过增加CGRP的表达、减少神经元凋亡改善蛛网膜下腔出血后的早期预后。

刘洋^[2]（2019）在《寒痉汤对寒凝型高血压大鼠CGRP、RLX及血管平滑肌细胞UCP2、RXFP2的影响》文中进行了进一步梳理第一部分寒痉汤对寒凝型高血压大鼠血清降钙素基因相关肽及松弛素的影响目的:研究中药复方寒痉汤对寒凝型高血压大鼠血清中降钙素基因相关肽和松弛素的影响,以探究寒痉汤降低高血压的相关机制。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、寒痉汤组,适应性饲养一周。一周后模型组、寒痉汤组给予含8%高盐饲料,自由饮水,并且每天置于（-15±2）℃冰箱中。对照组给予正常饲料,自由饮水,置于24℃26℃,饲养。测量大鼠尾动脉血压情况,每周三次。从第七周开始寒痉汤组给予中药灌胃治疗,模型组给予生理盐水灌胃,疗程为两周。用药两周后断头取血,采用放射免疫法对各组实验大鼠血清中降钙素基因相关肽进行检测,采用酶联免疫吸附法对各组实验大鼠血清中松弛素进行检测。结果:1.血清中降钙素基因相关肽CGRP（calcitonin generelated peptide）:与正常组比较,模型组血清中CGRP表达水平降低,差异有统计学意义（P（27）0.05）,与模型组比较,寒痉汤组血清中CGRP表达水平升高,差异有统计学意义（P（27）0.05）。2.血清中松弛素RLX（relaxin）:与正常组比较,模型组血清中RLX降低,差异有统计学意义（P（27）0.05）,与模型组比较,寒痉汤组血清中RLX表达水平升高,差异有统计学意义（P（27）0.05）。结论:1.寒痉汤降压效果可能与升高血清中降钙素基因相关肽水平有关。2.寒痉汤降压效果可能与升高血清中松弛素水平有关。第二部分寒痉汤含药血清对冷刺激大鼠血管平滑肌细胞UCP2、RXFP2的影响目的:通过体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞并且给予寒冷刺激,研究中药复方寒痉汤含药血清对冷刺激大鼠平滑肌细胞UCP2、RXFP2的影响,探讨寒痉汤对寒凝型高血压的防治机制,为临床上寒痉汤防治动脉粥样硬化、高血压等相关心血管疾病提供实验依据。方法:选用大鼠血管平滑肌细胞株（A7R5）,传代培养,取4-6代平滑肌细胞进行实验。以冷刺激温度20℃为实验条件分别选择2h、4h、6h、8h为冷刺激时间。采用台盼蓝染色法计数细胞存活率,采用MTT法对实验细胞组进行OD值检测,选择最佳冷刺激时间。选用雄性SD大鼠20只,随机分为五组,各组分别中药灌胃与生理盐水灌胃,制备大鼠中药含药血清,作用于不同组别的平滑肌细胞。将长满皿底的平滑肌细胞随机分为正常组、模型组、寒痉汤组、止痉组、麻辛附组,吸弃原培养基,PBS清洗一遍,加入含药血清:1.正常对照组:DMEM+10%正常大鼠血清;2.模型组:DMEM+10%模型大鼠含药血清3.寒痉汤组:DMEM+10%寒痉汤大鼠含药血清;4.止痉组:DMEM+10%止痉散大鼠含药血清;5.麻辛附组:DMEM+10%麻黄附子细辛汤大鼠含药血清。各组分别加入含10%含药血清细胞培养箱培养24小时。含药血清培养结束后,模型组、寒痉汤组、止痉组、麻辛附组放入20℃温度箱给予冷刺激,正常组置于37℃培养箱培养。采用荧光定量PCR、Western-blotting检测平滑肌细胞中解偶联蛋白2和松弛素受体2的表达。结果:1.细胞冷刺激的温度设定20℃,寒冷刺激的时间在4h存活率降低,4h组与6h组相比较差异有统计学意义,P（27）0.05。2.血管平滑肌细胞解偶联蛋白2蛋白表达,与正常组比较,模型组蛋白表达降低差异有统计学意义,P（27）0.05,与模型组比较,寒痉汤组与麻辛附组、止痉组比较蛋白表达升高,P（27）0.05或0.01。与寒痉汤组比较,止痉组蛋白表达降低,P（27）0.05。血管平滑肌细胞松弛素受体2蛋白表达,与正常组比较,模型组蛋白表达降低,P（27）0.01,与模型组比较,寒痉汤组、麻辛附组和止痉组蛋白表达升高,P（27）0.05或0,01,与寒痉汤组比较,麻辛附组蛋白表达降低,P（27）0.05。3.血管平滑肌细胞解偶联蛋白2基因表达,与正常组比较,模型组基因表达降低,P（27）0.05,与模型组比较,寒痉汤组、麻辛附组基因表达升高,P（27）0.05或0.01,与寒痉汤组比较,止痉组基因表达降低,P（27）0.05。血管平滑肌细胞松弛素受体2基因表达,与正常组比较,模型组基因表达降低,P（27）0.05,与模型组比较,寒痉汤组、麻辛附组和止痉组基因表达升高,P（27）0.05或0.01,与寒痉汤组比较,麻辛附组、止痉组基因表达降低,P（27）0.05。结论:1.寒冷刺激可降低血管平滑肌细胞解偶联蛋白2和松弛素受体2的表达。2.寒痉汤可升高寒冷刺激血管平滑肌细胞解偶联蛋白2和松弛素受体2的表达。3.寒痉汤较其拆方麻黄细辛附子汤、止痉散升高血管平滑肌细胞解偶联蛋白2和松弛素受体2的效果更好。

叶挺宇,卢涌涌,潘悦,黄锡玺,杨宇,蔡健^[3]（2018）在《降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响》文中认为目的探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对高血压性勃起功能障碍（ED）大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSM）增殖及表型转化的影响。方法选取20只自发性高血压Wistar大鼠（SHR）及10只同系正常血压健康大鼠（WKY）,测量大鼠尾部动脉收缩压,通过颈部皮下注射阿朴吗啡后观察大鼠阴茎勃起情况,SHR大鼠中无阴茎勃起的归为高血压勃起功能障碍（HBP-ED）组,出现阴茎勃起的归为高血压（HBP）组,WKY大鼠归为对照组。取各组大鼠阴茎海绵体平滑肌组织行细胞原代培养。不同浓度（1、10和100nmol/L）CGRP作用于培养的细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞碱性调宁蛋白（Cnn1）和骨桥蛋白（OPN）mRNA表达水平。结果不同浓度CGRP均可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,且抑制程度随CGRP浓度增加而加剧。当CGRP作用的终浓度为100nmol/L时,HBP组和HBP-ED组Cnnl m RNA表达水平较组内0nmol/L浓度均上调（均P<0.05）,OPN mRNA表达水平较组内0nmol/L浓度均下调（均P<0.05）。结论 CGRP可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,可使高血压性ED大鼠CCSM表型发生逆转化,即由合成型向收缩型转化。

涂芳芳^[4]（2018）在《降钙素基因相关肽改性丝素蛋白材料的制备及表征》文中进行了进一步梳理心血管疾病严重威胁着人类健康,为了解决心血管疾病,有关研究者们对血管移植物开展了大量的研究,但小直径（内径<6mm）血管移植物不能实现理想的通畅性,这主要是由于移植后血栓形成、内膜增生。丝素蛋白（SF）具有优良的生物相容性和良好的物理化学性能,而降钙素基因相关肽可以促进内皮细胞生长并抑制平滑肌细胞增殖,因此,降钙素基因相关肽改性的丝素蛋白材料用于小直径人工血管研究,将有利于促进内皮化和抑制内膜增生,阻止血栓形成,有望实现小直径人工血管的临床应用。本文通过己二酸与丝素蛋白共混并使用乙醇固化处理和1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺（EDC）交联两种方法来制备丝素蛋白膜,然后利用静电吸附作用加载降钙素基因相关肽。探究了己二酸（AA）修饰的丝素蛋白（SF）材料对加载降钙素基因相关肽的影响,希望不采用化学反应的原理将降钙素基因相关肽较稳定的加载于丝素蛋白材料中。乙醇固化的SF/AA共混膜具有良好的热水稳定性。质量比SF:AA=100:1.5时,样品的蛋白溶失率达到最小并稳定。随着SF:AA比例的增加,共混膜材料表面的Zeta电位逐渐减小,从SF:AA=100:0～100:2.5,表面Zeta电位由-19.5mV下降至-27.7mV,表明共混后材料表面带有更多的负电荷。采用傅里叶红外光谱（FTIR）、X射线衍射（XRD）、X射线光电子能谱（XPS）对乙醇固化的SF/AA共混膜进行了组成和结构分析,FTIR和XRD结果表明己二酸可诱导丝素蛋白分子形成了β折叠结构,XPS结果显示共混后的丝素蛋白材料中引入了新的C=O基团,形成了新的酰胺键。使用EDC对己二酸与丝素蛋白进行交联,材料制备的丝素蛋白共混膜也具有良好的热水稳定性,SF:AA=100:1.5时,丝素蛋白分子达到充分反应。己二酸交联反应后的丝素蛋白水溶液Zeta电位逐渐减小,从SF:AA=100:0～100:2.5,Zeta电位由-2..7mV变为-5.4mV;丝素蛋白共混膜表面的Zeta电位明显也逐渐减小,SF:AA=100:0～100:2.5,表面Zeta电位从-14.3mV下降至-32.6mV,表明己二酸交联改性后丝素蛋白共混膜表面带有更多的负电荷。FTIR和XRD结果说明EDC交联己二酸交联改性丝素蛋白材料同样诱导丝素蛋白分子形成了更稳定的二级结构,主要是明显增加了丝素蛋白的β折叠结构,同时也伴随着少量的α螺旋和β转角。XPS结果显示改性后的丝素蛋白材料引入了新的C=O,-（CH2）4-基团,形成了新的酰胺键。综合热水溶失率、Zeta电位、FTIR、XRD和XPS结果,选择了 EDC交联己二酸交联改性的丝素蛋白样品SF:AA=100:0、SF:AA=100:1和SF:AA=100:2.5加载降钙素基因相关肽。己二酸交联改性丝素蛋白膜上加载降钙素基因相关肽,随着己二酸含量的增多而增多,在SF:AA=100:2.5的改性丝素蛋白膜上加载的降钙素基因相关肽的最大量为500ng/cm2,与己二酸交联改性丝素材料表面Zeta电位结果一致。己二酸交联改性丝素膜（SF:AA=100:2.5）上加载浓度为500ng/cm2的降钙素基因相关肽在三种pH（pH=5,7.4和9）下的释放情况,pH为5时降钙素基因相关肽释放一直较缓慢,而pH为7.4和9,降钙素基因相关肽在12h内释放较缓慢,在12h之后快速且大量释放。不同己二酸比例（SF:AA=100:0、100:1和100:2.5）的己二酸交联改性丝素膜上加载浓度为500ng/cm2的降钙素基因相关肽在pH=7.4的释放情况,SF:AA=100:0的材料在12h内快速释放,SF:AA=100:1和100:2.5的两种材料释放一直较缓慢。

曾泗宇,洪陈亮,兰树敏,卢慧勤,陈燕,严秋江,秦旭平^[5]（2017）在《ADAM17调控CGRP对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制效应》文中进行了进一步梳理目的阐明肿瘤坏死因子α转化酶（ADAM17）调控降钙素基因相关肽（CGRP）的抗血管平滑肌细胞（VSMC）增殖效应。方法以大鼠源性胸主动脉平滑肌细胞株（A10VSMC）为研究对象,采用RNA干扰抑制ADAM17表达;采用蛋白质免疫印迹和实时定量PCR检测蛋白和mRNA表达水平;采用噻唑蓝比色法评估细胞活性。结果 CGRP显着抑制血管紧张素Ⅱ介导的VSMC增殖。血管紧张素Ⅱ刺激24 h后,VSMC中ADAM17表达显着增加。CGRP预处理30 min能显着降低VSMC中ADAM17表达,而CGRP受体拮抗剂CGRP8-37可抑制或逆转上述效应。ADAM17 RNA干扰可显着抑制血管紧张素Ⅱ介导的VSMC增殖。结论降低ADAM17表达可能是CGRP抑制血管紧张素Ⅱ介导的VSMC增殖效应的机制。

方立^[6]（2010）在《内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用及其机制研究》文中研究表明第一章内皮祖细胞与血管平滑肌细胞共培养条件下内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖的影响研究背景：近年来大量研究提示内皮祖细胞（endothelial progenitor cell, EPCs）能够延缓高血压、冠心病、血管成形术后再狭窄等血管增殖性疾病血管重塑的进程。鉴于血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）的增殖是形成高血压、冠心病、血管成形术后再狭窄等心血管疾病的共同细胞病理基础之一,本实验拟从细胞水平探讨共培养体系下EPCs对大鼠VSMCs增殖的影响。方法：采用3%明胶沉降红细胞及密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,利用内皮生长培养基（Endothelial growth medium-2,EGM-2,含EPCs分化所需各种生长因子）进行培养,诱导单个核细胞贴壁并向EPCs分化；Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1荧光双染色鉴定正在分化的EPCs;流式细胞仪和间接免疫荧光法检测EPCs干细胞分子标志CD34／CD133以及内皮细胞分子标志FLK-1/VWF/CD31/ VE-cadherin/CD 105/CD 146;采用Transwell培养板建立早期EPCs和VSMCs共培养模式,20%FBS诱导VSMCs增殖,利用BrdU标记和蛋白定量法检测血管平滑肌细胞DNA和蛋白合成能力,观察共培养条件下EPCs对VSMCs增殖的影响。结果：从人脐血单个核细胞成功分离培养EPCs,早期EPCs和VSMCs共培养12,24,48和72h时,血管平滑肌细胞DNA和蛋白合成能力均较对照组明显降低（P<0.05）；与此类似,流式细胞术结果显示共培养组VSMCs细胞周期中S期细胞所占百分率较对照组显着降低（P<0.05）,而细胞周期中G1期细胞所占百分率均相应高于对照组（P<0.05）,其中均以48h抑制效果最明显。结论：共培养条件下早期EPCs能够抑制血管平滑肌细胞DNA和总蛋白的合成,其机制可能与早期EPCs通过阻滞细胞周期进程抑制VSMCs的增殖有关。第二章内皮祖细胞对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用研究背景：VSMCs表型转化是高血压、冠心病和血管成形术后再狭窄等心血管疾病VSMCs增殖和迁移的关键性起始步骤。病理条件下VSMCs的增殖和表型转化受到多种血管活性物质和细胞因子的调控,其中AngⅡ诱导的VSMCs增殖和表型转化在心血管疾病的发生、发展中起着非常重要的作用。为了进一步阐明EPCs对VSMCs病理性增殖和表型转化的抑制作用及其机制,本研究拟采用AngⅡ刺激VSMCs后,观察内皮祖细胞条件培养基对VSMCs增殖、表型转化及其信号转导通路的影响。方法：分别制备早期EPCs条件培养基（E-EPC-CM）、晚期EPCs条件培养基（L-EPC-CM）以及人脐静脉内皮细胞条件培养基（HUVEC-CM）后,采用BrdU标记法、蛋白定量、MTT以及流式细胞术分析E-EPC-CM、L-EPC-CM、HUVEC-CM对AngⅡ诱导的VSMCsDNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率、细胞周期进程以及VSMCs收缩表型标志基因平滑肌α-肌动蛋白（α-smootn musle actin,α-SM-actin）和合成表型标志基因骨桥蛋白（osteopontin, OPN）表达变化的影响；进一步采用RT-PCR和Western-blot观察E-EPC-CM、L-EPC-CM、HUVEC-CM对AngⅡ诱导的VSMCs MAPK （P38、JNK、ERK活化）和NF-κB（P65活化）信号通路以及原癌基因c-myc、c-fos表达的影响。结果：AngⅡ（10-6mmol/L）诱导VSMCs增殖48h后,血管平滑肌细胞DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率均较对照组明显增加（P<0.05）；细胞周期中S期细胞所占百分率较对照组显着增加,G1期细胞所占百分率均相应较对照组减少（P<0.05）;α-SM-actin mRNA和蛋白表达明显减少,而OPN mRNA和蛋白表达明显增加（P<0.05）,提示VSMCs从收缩表型向合成表型转化；P38、JNK. ERK、P65活化以及原癌基因c-myc、c-fos的表达均较对照组显着增加（P<0.05）。E-EPC-CM、L-EPC-CM、HUVEC-CM预处理后能够显着抑制AngⅡ诱导的VSMCs DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率的增加以及阻滞VSMCs从Gl期向S期的转化；并且抑制VSMCs从收缩表型向合成表型转化,其中均以E-EPC-CM的抑制效果最明显（P<0.05）。同样E-EPC-CM也抑制了AngⅡ诱导的P38、JNK、ERK.P65的活化以及c-myc、c-fos的表达（P<0.05）。结论：EPCs能够抑制AngⅡ诱导的VSMCs病理性增殖和表型转化,其机制可能与其抑制MAPK和NF-κB信号通路的活化以及原癌基因c-myc、c-fos的表达有关。第三章降钙素基因相关肽介导内皮祖细胞抑制血管平滑肌细胞的增殖与表型转化研究背景：EPCs许多生物学功能主要都是通过其旁分泌功能而实现的,研究表明降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide, CGRP）能够显着抑制AngⅡ等诱导的VSMCs增殖和表型转化,已有研究证实EPCs（主要是早期EPCs）能够合成并分泌CGRP。前一章研究已证实EPCs可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与表型转化,那么EPCs通过旁分泌释放的CGRP是否参与这一过程值得进一步探讨。因此,本研究拟初步探讨CGRP在EPCs抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与表型转化过程中的作用和可能的分子机制。方法：采用ELISA和RT-PCR检测EPCs和脐静脉内皮细胞CGRP的表达情况,对E-EPC-CM采取CGRP抗体封闭和CGRP受体阻断策略后,观察E-EPC-CM对AngⅡ诱导的VSMCs的增殖、表型转化及其MAPK、NF-κB信号转导通路和原癌基因c-myc、c-fos表达的影响。结果：早期EPCs能够表达并分泌高浓度的CGRP,并且显着高于晚期EPCs和HUVEC; CGRP阻断后,E-EPC-CM对AngⅡ诱导的VSMCs DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率、细胞周期进程以及表型转化的的抑制作用均较对照组明显降低（P<0.05）；并且对MAPK（P38. JNK、ERK）、NF-κB（P65）信号转导通路的活化以及原癌基因c-myc、c-fos表达的抑制能力也较对照组明显降低（P<0.05）。结论：EPCs通过旁分泌CGRP抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与表型转化。

宁改君,龙艳,苏珂^[7]（2009）在《降钙素基因相关肽与糖尿病微血管病变》文中认为降钙素基因相关肽（CGRP）是目前已知体内最强的舒血管多肽,参与许多重要功能的调节。糖尿病微血管病变是糖尿病常见的慢性并发症,主要累及肾脏和眼,CGRP强大的扩张血管、抑制血管平滑肌细胞增殖、保护内皮细胞、抑制内皮素收缩血管的作用参与了糖尿病肾病的发展过程及糖尿病视网膜病变新生血管的发生并在两者的发生、发展中起了重要作用。通过研究CGRP在微血管病变中的变化趋势,可以为糖尿病微血管病变的早期诊治提供依据。

秦旭平,任俊芳,邓水秀,吴峻,谌赟,陈临溪,肖瑞平^[8]（2008）在《降钙素基因相关肽抑制血管平滑肌细胞能量代谢的AMP激活蛋白激酶信号通路》文中研究指明目的观察降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖过程中能量代谢的影响及机制,探索细胞外信号调节激酶和AMP激活蛋白激酶相关信号蛋白在该作用中的地位。方法组织贴块法体外培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,取第3～10代用于实验。分别用降钙素基因相关肽或/和血管紧张素Ⅱ处理细胞。MTT法及细胞计数法观察降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响;詹纳斯绿B染色观察细胞线粒体形态及体积;ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平;Western Blotting检测细胞磷酸化AMP激活蛋白激酶的表达。结果降钙素基因相关肽预处理能降低血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞的增殖（P<0.05）,同时拮抗血管紧张素Ⅱ引起细胞内线粒体肿胀、ATP水平升高,在此过程中伴随细胞内磷酸化AMP激活蛋白激酶表达下调（P<0.05）;降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8-37能拮抗降钙素基因相关肽对血管紧张素Ⅱ促增殖和促代谢的抑制作用（P<0.05）;细胞外信号调节激酶抑制剂PD98059能部分拮抗降钙素基因相关肽对磷酸化AMP激活蛋白激酶的抑制作用（P<0.05）。结论降钙素基因相关肽能显着抑制血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖过程中的能量代谢,其细胞内信号通路可能涉及到降钙素基因相关肽/降钙素基因相关肽1型受体-丝裂原细胞外激酶/细胞外信号调节激酶-磷酸化AMP激活蛋白激酶信息传递链。

邓水秀,曾泗宇,任俊芳,郑元斌,廖端芳,秦旭平^[9]（2007）在《降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞增殖及小凹蛋白1表达的影响》文中研究指明目的观察降钙素基因相关肽在抑制血管平滑肌细胞增殖或肥大过程中是否伴有诱导其凋亡的作用,并探讨其作用机制是否涉及到血管平滑肌细胞内小凹蛋白1和caspase-3的变化。方法采用贴块法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,增殖或肥大型血管平滑肌细胞通过血管紧张素Ⅱ刺激静止期血管平滑肌细胞24 h建立。用噻唑蓝比色法和流式细胞仪分析血管平滑肌细胞增殖、凋亡及细胞周期变化,吖啶橙/溴化乙啶染色观察细胞及细胞核形态改变,Western blotting法测定不同状态下血管平滑肌细胞内小凹蛋白1和caspase-3的表达。结果降钙素基因相关肽能降低血管紧张素Ⅱ诱导的增殖型血管平滑肌细胞的代谢活性、细胞周期增殖指数（P<0.05）;形态学及流式细胞仪分析表明降钙素基因相关肽对增殖型血管平滑肌细胞无明显的诱导凋亡作用。同时发现降钙素基因相关肽使血管平滑肌细胞内小凹蛋白1的表达增加,而对caspase-3的表达无明显影响。结论降钙素基因相关肽能显着抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖,但诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用较小;其抑制增殖的细胞内信号传导途径可能与增强小凹蛋白1表达有关。

徐红涛,杨芹,王彩英,焦磊,王旻晨,吴开云^[10]（2007）在《降钙素基因相关肽对血管平滑肌表型转化和增殖的影响》文中提出目的探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）表型转化和增殖的影响以及它们之间的关系。方法取大鼠主动脉先体外培养8d后再贴块培养（VSMCs）;对照组直接用贴块法培养细胞。实验分为CGRP作用组和无CGRP作用组。用5-BrdU标记平滑肌细胞增殖变化;RT-PCR检测HRG-1和SM22α表达变化。结果血管经体外培养8d后再贴壁培养的平滑肌细胞可见大量棕黄色标记增殖的细胞核,HRG-1和SM22αmRNA表达明显减少;而CGRP作用组标记的血管平滑肌增殖细胞明显减少,HRG-1和SM22αmRNA表达明显上调。结论CGRP对VSMCs增殖有抑制作用并同时可使VSMCs从合成型向收缩型转化。

二、降钙素基因相关肽对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、降钙素基因相关肽对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用（论文提纲范文）

（1）丁苯酞注射液对大鼠蛛网膜下腔出血后CGRP、神经元凋亡的影响研究（论文提纲范文）

（2）寒痉汤对寒凝型高血压大鼠CGRP、RLX及血管平滑肌细胞UCP2、RXFP2的影响（论文提纲范文）

（3）降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响（论文提纲范文）

（4）降钙素基因相关肽改性丝素蛋白材料的制备及表征（论文提纲范文）

（5）ADAM17调控CGRP对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制效应（论文提纲范文）

（6）内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用及其机制研究（论文提纲范文）

（7）降钙素基因相关肽与糖尿病微血管病变（论文提纲范文）

（8）降钙素基因相关肽抑制血管平滑肌细胞能量代谢的AMP激活蛋白激酶信号通路（论文提纲范文）

（9）降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞增殖及小凹蛋白1表达的影响（论文提纲范文）

（10）降钙素基因相关肽对血管平滑肌表型转化和增殖的影响（论文提纲范文）

四、降钙素基因相关肽对人血管平滑肌细胞增殖的抑制作用（论文参考文献）

• [1]丁苯酞注射液对大鼠蛛网膜下腔出血后CGRP、神经元凋亡的影响研究[D]. 郭祥. 湖南师范大学, 2020(01)
• [2]寒痉汤对寒凝型高血压大鼠CGRP、RLX及血管平滑肌细胞UCP2、RXFP2的影响[D]. 刘洋. 河北中医学院, 2019(01)
• [3]降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响[J]. 叶挺宇,卢涌涌,潘悦,黄锡玺,杨宇,蔡健. 浙江医学, 2018(22)
• [4]降钙素基因相关肽改性丝素蛋白材料的制备及表征[D]. 涂芳芳. 苏州大学, 2018(12)
• [5]ADAM17调控CGRP对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制效应[J]. 曾泗宇,洪陈亮,兰树敏,卢慧勤,陈燕,严秋江,秦旭平. 中国动脉硬化杂志, 2017(08)
• [6]内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用及其机制研究[D]. 方立. 中南大学, 2010(11)
• [7]降钙素基因相关肽与糖尿病微血管病变[J]. 宁改君,龙艳,苏珂. 中国临床新医学, 2009(05)
• [8]降钙素基因相关肽抑制血管平滑肌细胞能量代谢的AMP激活蛋白激酶信号通路[J]. 秦旭平,任俊芳,邓水秀,吴峻,谌赟,陈临溪,肖瑞平. 中国动脉硬化杂志, 2008(10)
• [9]降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞增殖及小凹蛋白1表达的影响[J]. 邓水秀,曾泗宇,任俊芳,郑元斌,廖端芳,秦旭平. 中国动脉硬化杂志, 2007(09)
• [10]降钙素基因相关肽对血管平滑肌表型转化和增殖的影响[J]. 徐红涛,杨芹,王彩英,焦磊,王旻晨,吴开云. 解剖学报, 2007(04)

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