一、不同浓度灯盏细辛对SD大鼠蛛网膜下腔出血后血管痉挛的防治作用（论文文献综述）
李中浩[1]（2021）在《痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响》文中研究说明背景:中风病与西方医学体系中的脑血管病相似,主要包括脑梗死和脑出血,具有高发病率、高致残率、高死亡率以及高复发率的特点,是临床中常见的神经科急危重症。静脉注射阿替普酶及近些年发展起来的机械取栓能够有效开通闭塞血管,改善患者临床预后。但部分患者由于存在禁忌症、就医不及时等原因未能接受到这些治疗。因此,需要寻找更多更有效的治疗方案。中医治疗中风病已有悠久的历史,改革开放以来形成了中风病诊断和辨证论治标准。随着对中风病认识的不断加深,王永炎院士强调在中风病中应注意毒邪的致病作用,建议在治疗时加入解毒类方药。痰热清注射液由金银花、黄芩、连翘、水牛角和熊胆粉组成,长于清热解毒,在临床上广泛的应用于呼吸系统疾病的治疗。研究人员发现,伴有肺部感染的中风病患者使用痰热清注射液后,不仅咳嗽、发热等症状得到改善,其神经功能的恢复也较快。痰热清注射液的组方思路与安宫牛黄丸、清开灵注射液、醒脑静注射液相似,因此,从毒邪致病的角度推测痰热清注射液解毒开窍的功效,可能对中风病也有一定的治疗作用。一些早期的临床研究也发现,痰热清注射液能够促进脑梗死和脑出血患者的神经功能恢复。目的:探索痰热清注射对中风病的疗效及其治疗机制。方法:1.在临床研究中,我们采用系统评价和荟萃分析的方法,对已发表的关于痰热清注射液治疗中风病的临床文献进行筛选和分析。检索万方、中国知网、中国生物医学文献数据库和PubMed等数据库中截止到2021年1月1日收录的关于痰热清注射液治疗中风病的随机对照临床试验。按照纳入和排除标准筛选出符合要求的文献,进行荟萃分析,同时对文献的偏倚风险进行评价。2.在实验研究中,我们首先采用网络药理学的方法,对痰热清注射液中有效成分治疗中风病的生物学机制进行探索。根据已发表的文献收集痰热清注射液中的已检测到的化合物成分,计算这些化合物的QED值,选择其中大于0.18的做为潜在有效成分。检索PubChem中这些有效成分的药物靶标。将这些靶标与数据库中检索到的已知治疗中风病的药物靶标做交集,得到痰热清注射液治疗中风病的药物靶标。分析这些药物靶标之间的蛋白-蛋白相互作用关系并进行生物学注释。然后,利用大鼠大脑中动脉栓塞法制作脑梗死动物模型,通过2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色评价不同剂量痰热清注射液对大鼠脑梗死体积的影响。用苏木素-伊红染色和尼氏染色评价梗死模型的病理学特征。最后,使用WB和免疫荧光的方法检测从网络药理学得出的apelin信号通路及其下游的细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达。结果:1.系统评价和荟萃分析中共纳入了 11篇文献,涉及955例患者。荟萃分析结果显示,痰热清注射液对降低中风病或伴肺部感染的患者美国国立卫生研究院卒中量表评分均有一定的帮助作用,与对照组相比具有显着的统计学差异（MD=-5.45,95%CI:-10.82～-0.09。MD=-2.37,95%CI:-3.49～-1.26,P<0.05）。对提高患者功能独立性评分（MD=14.90,95%CI:8.84～20.96,P<0.05）、肢体运动功能（MD=7.39,95%CI:2.74～12.04,P<0.05）有一定的帮助作用,且与对照组相比具有显着的统计学差异。虽然对患者日常生活能力评分的提高有一定的帮助作用,但与对照组相比无显着的统计学差异（MD=12.95,95%CI:-1.02～26.92,P<0.05）。纳入研究的存在较高的偏倚风险,且存在较大的异质性。2.在网络药理学研究中,痰热清注射液的81个有效成分共检索到663个药物靶标,在有效成分-药物靶标网络图中,度值最大的有效成分为绿原酸,度值最大的药物靶标为核因子E2相关因子2。其中有116个为治疗中风病的药物靶标。这116个药物靶标蛋白-蛋白相互作用中重要的靶点有白蛋白、细胞肿瘤抗原p53、白细胞介素-8等。生物学功能注释结果显示,这些靶点涉及胆汁分泌、药物代谢、化学致癌、肝病和apelin信号通路等227个通路;脂肪酸合成与代谢、外来化学物质代谢和细胞对药物反应等3258个生物过程;核受体活性、血红素结合反应、丝氨酸型肽酶活性等442个分子功能;排名靠前的有核苷酸活化蛋白激酶复合物、膜筏、突触后膜等222个细胞组分。在脑梗死大鼠模型中,可见梗死部位水肿,空泡形成,细胞死亡。而腹腔注射液低剂量痰热清注射液（2.5ml/kg,每6小时1次）能够明显减少大鼠脑梗死24小时后的梗死体积,与模型组相比具有显着的统计学差异（P<0.05）。WB结果显示,使用痰热清注射液后APJ/PI3K/AKT/mTOR信号通路的蛋白含量与模型组相比显着增加;凋亡相关蛋白BCL2/BAX 比例显着上升,caspase8蛋白含量显着减少;自噬相关蛋白LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ比例显着下降;NeuN蛋白含量显着增加,GFAP蛋白含量显着减少。蛋白改变具有显着的统计学差异（P<0.05）。结论:痰热清注射液对中风病特别是脑梗死有一定的治疗作用,其治疗脑梗死的机制可能与激活apelin信号通路,抑制细胞凋亡和自噬等有关。但这些研究较为粗浅,需要更高质量的临床和基础研究来明确痰热清注射液对中风病的临床疗效和药理机制。
向昱臻[2]（2020）在《清脑益元汤对局灶性脑缺血损伤大鼠NPY、CGRP表达水平的影响》文中指出目的:研究清脑益元汤对大鼠局灶性脑缺血损伤后神经肽NPY、CGRP表达的影响,探讨清脑益元汤防治局灶性脑缺血损伤的部分作用机制。方法:将240只SD大鼠按照体重大小分层,再分成A、B两大组,每大组120只大鼠,每大组用随机数字表法再将大鼠分为4组:空白组组、假手术组、模型组、清脑益元汤组。除空白组外,各组大鼠参照Longa线栓法,制作大鼠大脑中动脉栓塞模型。其中,假手术组在大鼠颈内动脉插入线栓8-10mm,此深度不足以阻断大脑中动脉血流,其余步骤与手术组相同。参考Longa的5分制法对大鼠进行神经功能缺损评分,并按照MCAO术后1d、3d、7d、14d、28d五个处死时间点分为5个亚组,每个亚组6只大鼠。空白组正常饲养,灌胃等体积蒸馏水。假手术组、模型组大鼠术后灌胃等体积蒸馏水、清脑益元汤组术后灌胃等体积清脑益元汤,持续至各个取材时间点。应用HE染色法检测大鼠神经细胞形态学变化;免疫组织化学法检测各组大鼠缺血侧脑组织切片NPY免疫阳性细胞的表达水平;Western blot法检测各组大鼠缺血侧脑组织CGRP蛋白含量,并用SPSS24.0统计软件包进行数据处理。结果:（1）神经功能缺损评分:（1）假手术组大鼠在各个时间点均无神经功能缺损表现。（2）与假手术组相比较,模型组及清脑益元组大鼠神经功能缺损评分显着增高,差异均有统计学意义（P<0.01）。（3）在相同取材时间点,清脑益元组大鼠神经功能缺损症状与模型组大鼠相比较,均有不同程度的改善,差异有统计学意义（P<0.01）。（2）HE染色:（1）空白组、假手术组:脑组织无水肿,细胞排列整齐,形态结构基本正常。（2）模型组:大鼠神经元皱缩变形,呈三角形松散排列,大范围散在坏死的红色神经元,大部分神经元变性、坏死,细胞周围间隙增大,细胞胞体变形缩小,细胞核固缩浓染,炎性细胞浸润、坏死,细胞溶解消失或见少量固核残留。（3）清脑益元汤组:给予药物后,脑组织梗死区可见少量神经元坏死、核固缩浓染等病理特征,较模型组有显着改善,皮质区域的神经元细胞排列紧密,呈类球形,细胞排列趋于正常,偶见部分细胞变形。表明清脑益元汤能够促使神经元细胞修复,或具有使神经细胞再生,修复神经损伤的作用。（3）免疫组化法检测NPY:（1）在各个取材时间点,空白组及假手术大鼠脑组织中观察到少量NPY免疫阳性细胞表达,同时间点两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）在同一时间点,与假手术组比较,模型组和清脑益元汤组大鼠NPY阳性细胞数明显增多,差异具有统计学意义（P<0.01）。（3）在同一时间点,与模型组相比,清脑益元汤组NPY免疫阳性细胞数明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）。（4）Western blot法检测CGRP:（1）CGRP在空白组和假手术组的脑组织中均有少量表达,两者比较,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）在同一时间点,与假手术组相比,模型组和清脑益元汤组CGRP蛋白表达均升高（P<0.01）,差异有统计学意义。（3）与模型组相比,清脑益元汤组大鼠脑组织内的CGRP蛋白相对表达量明显高于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论:清脑益元汤可改善大鼠脑缺血组织的损伤,其作用机制可能与其减少脑缺血损伤后NPY阳性细胞数、增加CGRP蛋白表达,进而调控脑血管的舒缩状态,改善缺血区域的脑血流有关。
史金新[3]（2020）在《灯盏细辛注射液中野黄芩苷的大鼠药代动力学研究》文中认为灯盏细辛注射液（DZXX）广泛用于脑血管疾病的治疗,野黄芩苷是其主要活性成分。然而,DZXX中其他化学成分对野黄芩苷药代动力学的影响尚未完全明晰。本研究的目的是揭示DZXX中其他化学成分对野黄芩苷药代动力学的影响及其作用机制。成功建立了一种同时测定大鼠血浆中野黄芩苷和灯盏甲素的LC-MS/MS方法,应用于大鼠药代动力学研究。注射DZXX后大鼠血浆中野黄芩苷的血药浓度升高,C0、AUC分别是注射野黄芩苷单体的4.2倍和2.8倍,CL降低了59.4%;尿、胆汁排泄量明显高于单独注射野黄芩苷,分别增加到42.5%±6.5%和31.4%±7.0%;而灯盏甲素药代动力学没有显着变化。此外,DZXX给药5、15、30 min后野黄芩苷在大鼠脑组织中含量分别增加6.50倍、9.34倍和4.07倍,小肠中组织含量分别降低9.66倍、1.80倍和1.41倍。最后,灯盏甲素和咖啡酰奎尼酸酯在体外显着抑制β-葡萄糖醛酸苷酶（GLU）和有机阴离子转运多肽2B1（OATP 2B1）,其中灯盏甲素抑制OATP 2B1的IC50为4.61±2.57μM。表明DZXX中其他成分可通过抑制GLU和OATP 2B1降低野黄芩苷的水解和转运,从而影响野黄芩苷的大鼠药代动力学。这些发现揭示了DZXX组分间相互作用的分子机制,为治疗脑血管疾病的中药组方规律研究提供了科学依据。
曹冰倩[4]（2020）在《电针对急性脑梗死NLRP3/caspase-1信号通路蛋白表达的研究》文中认为脑梗死已成为全球第二大死因,危害人类生命健康的主要致死、致残原因,严重危害人类生命健康。目前,药物、介入治疗急性脑梗死（Acute Cerebral Ischemia,ACI）受治疗时间窗及临床应用转化限制,所以迫切需要寻找有效的治疗策略,通过多靶点、多方位的综合治疗促进神经功能恢复,减轻社会和家庭的脑卒中负担。研究证实细胞因子介导的炎症反应是ACI患者神经功能缺损的重要原因之一,诱导细胞焦亡的经典炎症小体在激活后也会产生一系列的炎症反应,通过正负反馈的调节机制进一步释放出的大量炎症介质,加重ACI患者脑损伤,影响后期的神经功能修复。其中,依赖NLRP3/caspase-1信号通路诱导的细胞焦亡已证实与缺血性卒中患者脑损伤关系密切。我们的前期研究工作表明,电针能有效地干预炎症反应,减少ACI后遗症,促进神经功能修复。新近研究发现脑缺血局部梗死灶继发的海马、丘脑、延髓、脊髓等远隔部位的损伤会增加致死、致残率,阻碍神经功能康复。那么电针能否通过干预NLRP3/caspase-1信号传导通路相关蛋白表达,减轻脑梗死远隔部位损害,促进神经修复?因此本课题基于NLRP3/caspase-1信号通路诱导的小胶质细胞焦亡探讨电针对脑梗死远隔损害的干预作用。目的:1.基于细胞焦亡的炎症通路,观察电针对ACI患者NIHSS、FMA、MBI及血清caspase-1、IL-1 β等蛋白表达水平的影响,证实电针能抑制ACI后细胞焦亡介导的炎症反应。2.从小胶质细胞焦亡NLRP3/caspase-1的信号通路角度,探讨电针对MCAO大鼠远隔损害的作用,揭示电针治疗ACI远隔损害的分子机制,为电针的临床应用研究提供科学依据。方法:1.临床研究:选取2018年04月至2019年01月佛山市中医院神经内科住院部符合纳入标准的ACI患者66例,按随机数字表分为两组,治疗组33例（脱落3例）,对照组33例（脱落4例）。另选取健康体检中心的健康人30例作同期参考值测定。对照组予改善循环、抗血小板聚集、调脂稳斑、康复等常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用电针治疗,观察期为2周。观察并比较两组治疗前、后神经功能NIHSS、FMA、MBI评分变化,测定患者血清caspase-1、IL-1 β的表达。2.实验研究:取雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠81只,10～12周龄,体重220～250 g。随机分为3组:假手术组（Sham）、模型组（MCAO）和电针组（EA）,每组27只,每组再进一步分为1d、7d、14d共三个亚组。Sham组仅作颈部切开,暴露颈动脉后缝合,不作电针治疗。MCAO组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,1.5h后拔线栓再灌注,治疗时固定于实验木板上20 min,不作电针治疗。EA组同MCAO一样,但造模清醒后每天给予电针治疗20min。分别于造模后第1d、7d、14d进行神经功能评分,TTC染色检测脑梗塞面积、Western blot检测患侧与健侧部位海马NLRP3、IL-1β蛋白表达,免疫组织化学染色法检测患侧与健侧部位海马NLRP3、caspase-1表达。结果:1.临床部分本研究共纳入66例急性脑梗死患者病例,随机数字表分为治疗组与对照组,各33例,其中治疗组脱落3例,对照组脱落4例。两组在基线比较上无明显差异,具有可比性。另选择我院健康体检中心于同期就诊,且年龄性别基线无差异的健康体检者30例。（1）临床观察结果显示,治疗组与对照组在治疗前后NIHSS、FMA、MBI评分的组内比较中,差异具有统计学意义。对照组常规治疗能显着改善患者简单化测评的神经功能缺损、运动功能障碍及日常生活活动能力。干预后,治疗组在NIHSS、FMA评分的改善上优于对照组,电针治疗能有效改善ACI患者神经功能缺损、运动功能障碍。但是干预后的治疗组与对照组在MBI评分无显着性差异,电针对日常生活活动能力的改善效果在短期内不明显,电针可能需要长疗程的叠加累积效应。（2）实验室指标结果显示,脑梗死组血清caspase-1与IL-1 β浓度显着高于健康对照组,提示ACI患者血清中炎症介质caspase-1、IL-1 β浓度明显高于正常。治疗组与对照组均能显着下调炎症介质caspase-1与IL-1 β的表达。干预后,治疗组血清IL-1 β显着低于对照组,提示电针能降低ACI后炎症因子IL-1 β表达。电针能通过下调炎症介质的表达来促进神经功能的修复,改善神经功能缺损及运动功能障碍。2.实验部分（1）神经功能缺损评分EA组在7d、14d的神经功能评分低于MCAO组,差异有统计学意义。提示电针能改善7d、14d的MCAO大鼠神经功能缺损。（2）TTC染色MCAO组与EA组的梗死体积均在1d达高值,但两者间无明显差异。在7d、14d,EA组与MCAO组相比脑梗死体积明显减少,差异有统计学意义。提示电针能减轻大鼠7d、14d的脑梗死体积。（3）Western blot①缺血侧海马NLRP3、IL-1 β表达MCAO组和EA组大鼠缺血侧海马NLRP3、IL-1 β蛋白表达均在脑缺血后1d达高值,随后呈下降趋势。在14d,EA组缺血侧海马NLRP3蛋白表达与MCAO组相比显着降低。EA组缺血侧海马IL-1 β蛋白表达在7d、14d与MCAO组相比显着降低。提示电针能明显下调NLRP3、IL-1 β在14d缺血侧海马的表达。②健侧海马NLRP3、IL-1 β表达MCAO组和EA组大鼠健侧海马NLRP3、IL-1 β蛋白表达在脑缺血后1d开始升高,7d达高值,随后呈下降趋势。Sham组健侧海马NLRP3蛋白表达在1d较MCAO组、EA组减低,但差异无统计学意义。14d,EA组健侧海马NLRP3、IL-1 β蛋白表达与MCAO组相比显着降低。提示电针能明显下调NLRP3、IL-1 β在14d健侧海马的表达。（4）免疫组织化学染色①缺血侧海马NLRP3、caspase-1表达MCAO组和EA组大鼠缺血侧海马NLRP3、caspase-1蛋白表达在脑缺血后1d达高值,随后呈下降趋势。EA组缺血侧海马NLRP3、caspase-1蛋白表达在14d与MCAO组相比显着降低。提示电针能明显下调NLRP3、caspase-1在14d缺血侧海马的表达。②健侧海马NLRP3、caspase-1表达MCAO组和EA组大鼠健侧海马NLRP3、caspase-1蛋白表达在脑缺血后1d升高,7d达高值,随后呈下降趋势。在1d,三组大鼠健侧海马NLRP3、caspase-1蛋白表达差异无统计学意义。14d,EA组健侧海马NLRP3、caspase-1蛋白表达与MCAO组相比显着降低。提示电针能明显下调NLRP3、caspase-1在14d健侧海马的表达。结论:1.电针能显着促进ACI患者神经功能修复,改善运动功能,降低血清中炎症介质的表达。2.电针百会、大椎穴能改善MCAO大鼠神经功能缺损评分,减少脑梗死体积,下调梗死侧及健侧脑组织中NLRP3、caspase-1、IL-1 β的表达。3.电针促进神经功能修复的机制可能是通过干预NLRP3/caspase-1细胞焦亡通路,抑制信号通路中相关蛋白的表达,减轻远隔部位损害。
郭欣[5]（2019）在《灯盏细辛注射液化学成分及药代动力学研究》文中认为灯盏细辛注射液是由灯盏细辛提取制成的灭菌水溶液,具有活血祛瘀,通络止痛的功效。其适用于心脑血管及其它缺血性和伴有微循环障碍的疾病,临床上用于缺血性中风、冠心病心绞痛等的治疗。根据现有文献报道,咖啡酰奎宁酸类及黄酮类化合物为灯盏细辛药材的主要成分。但是,灯盏细辛注射液的化学成分尚不够清晰,而且其质量控制存在欠缺。另外,灯盏细辛注射液的体内药效物质基础及动态变化规律尚未完全阐明。因此,运用现代化的技术和方法对灯盏细辛注射液的药效物质基础进行全面的解析对于其作用机制和临床疗效的科学阐释具有非常重要的研究意义。本研究以灯盏细辛注射液为研究对象,从灯盏细辛注射液的主要化学成分、体内原型及代谢产物等方面阐明其化学物质基础;通过建立指纹图谱为灯盏细辛注射液的质量控制提供参考;研究多成分的体内动态变化规律为临床合理用药提供科学依据。研究内容如下:采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MSE）技术结合UNIFITM软件的多数据处理方法对灯盏细辛注射液的主要化学成分进行全面表征。通过查阅相关文献及检索数据库,共建立灯盏细辛药材及其制剂的化学成分数据库252个,然后将此数据库导入到UNIFITM平台与采集的灯盏细辛注射液的质谱数据进行匹配。基于保留时间、不同结构类型化合物的质谱裂解规律、对照品比对及参考相关文献,在负离子模式下对灯盏细辛注射液的化学成分进行鉴定。最终共鉴定出灯盏细辛注射液中包括黄酮类和酚酸类在内的40个化学成分。采用高效液相色谱串联二极管阵列检测器（HPLC-DAD）技术建立了20批灯盏细辛注射液的指纹图谱,并使用《中药指纹图谱相似度评价软件》计算其相似度大于0.98。其中,以野黄芩苷为参照物峰,共建立了28个共有色谱峰,并通过对照品对其中的13个共有色谱峰进行了指认。HPLC指纹图谱的建立为灯盏细辛注射液的质量控制提供参考。在灯盏细辛注射液化学成分和质量控制的基础上,本研究采用UPLC-Q-TOF-MSE结合MetasenseTM预测系统及UNIFITM数据处理平台,对灯盏细辛注射液进入大鼠体内的原型成分及代谢产物进行了定性分析。在大鼠血浆、尿液和粪便中共检测到灯盏细辛注射液原型成分25个。此外,首次对灯盏细辛注射液的代谢产物进行鉴定,共鉴定出45个代谢产物,其中包括18个黄酮类和27个酚酸类化合物。其代谢反应类型主要包括甲基化反应、葡萄糖醛酸化反应、加氢反应、乙酰化反应、水解反应和磺酸化反应等。在以上研究的基础上,本研究对灯盏细辛注射液多成分的药代动力学行为进行了比较研究。假手术组大鼠和大脑中动脉栓塞模型组大鼠分别经过尾静脉注射8.4m L/kg（大鼠体重）灯盏细辛注射液,于6 h内采集不同时间点大鼠血浆样品。分别定量血浆中黄酮类（野黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷）及酚酸类（3-O-咖啡酰奎宁酸、5-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花苷I）化合物。在负离子模式下,采用多反应离子监测方式测定10个化学成分的血药浓度,比较药动学参数的差异。通过对液相条件及质谱条件的优化,最终实现在15 min内对血浆中的10个化学成分进行同时监测。野黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、3-O-咖啡酰奎宁酸、5-O-咖啡酰奎宁酸、4-O-咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花苷I的最低定量限分别为0.25 ng/m L、0.25 ng/m L、0.25 ng/m L、0.20 ng/m L、0.25ng/m L、0.17 ng/m L、0.25 ng/m L、0.50 ng/m L、0.25 ng/m L和0.50 ng/m L。目标分析物的回收率范围为78.56%～94.87%,日内精密度和日间精密度范围为2.56%～13.17%。与假手术组相比,模型组大鼠血浆中咖啡酰奎宁酸类化学成分的药时曲线下面积显着增加,4-O-咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的平均滞留时间显着增加。
毛冬雪[6]（2019）在《清脑益元汤对脑缺血损伤性大鼠GFAP、NeuN表达水平的影响》文中指出目的:观察清脑益元汤对脑缺血损伤大鼠GFAP、NeuN表达水平的影响,探讨清脑益元汤保护脑缺血损伤神经元的部分作用机制。方法:选取雄性健康SD大鼠112只,体重250±50g,用随机数字表法将大鼠分为4组:空白组（7只）、假手术组（35只）、模型组（35只）、清脑益元组汤（35只）。假手术组、模型组、清脑益元汤组分别按照术后取材时间点1d、3d、7d、14d、28d又分为5个亚组。空白组大鼠正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;假手术组大鼠颈动脉插入约8mm线栓,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;模型组术前灌胃等体积蒸馏水7d,大鼠麻醉后行MCAO术,制成大鼠急性脑缺血损伤模型,术后正常饲养,灌胃等体积蒸馏水;清脑益元组大鼠术前灌胃等体积清脑益元汤7d后行MCAO术,灌胃清脑益元汤。参考Longa 5级4分法对大鼠脑缺血损伤后神经功能缺损症状评分,按照各取材时间点进行标本采集。大鼠脑组织取材后,应用TTC染色法对大鼠脑梗死体积进行检测;TUNEL法检测脑组织神经细胞凋亡数量;免疫组织化学法检测脑缺血损伤大鼠梗死区GFAP、NeuN阳性细胞数的变化情况。结果:（1）神经功能缺损评分情况:与假手术组相比,模型组及清脑益元汤组大鼠神经功能缺损评分有显着性差异（P<0.01）;与模型组相比较,在同一时间点清脑益元汤组大鼠神经功能缺损症状均有不同程度的改善,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）TTC染色法检测脑梗死体积:空白组及假手术组未见白色梗死灶,模型组及清脑益元汤组大鼠均可见脑组织白色梗死灶;与模型组比较,清脑益元汤组大鼠脑梗死面积明显减小（P<0.05）。（3）TUNEL法检测细胞凋亡状况:与假手术组相比,模型组与清脑益元组凋亡细胞阳性表达在各取材时间点均明显上升（P<0.05）;与模型组比较,清脑益元组凋亡细胞在各个取材时间点的表达均明显减少,TUNEL阳性反应物光密度值显着降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）免疫组化法检测结果:空白组及假手术组大鼠脑组织中可观察到少量GFAP免疫阳性细胞的表达,大量NeuN阳性细胞表达;与假手术组比较,模型组与清脑益元组在相同时间点GFAP免疫阳性细胞的表达均明显增多,NeuN阳性细胞表达偏少,具有明显差异性（P<0.05）;GFAP表达于7d达到高峰后下降,与模型组同一取材时间点相比较,清脑益元汤组GFAP表达明显减少,NeuN阳性细胞数显着增多,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:清脑益元汤对脑缺血损伤大鼠神经元具有保护作用,其作用机制可能与下调GFAP的表达水平,上调NeuN的表达水平有关。
刘畅[7]（2019）在《灯盏花乙素对脑缺血神经元的保护作用及机制研究》文中研究指明[目 的]建立一种高效简便的原代神经元氧糖剥夺模型,在体外实验中,研究灯盏花乙素（Scutellarin,Scu）对神经元 OGD（oxygen/glucose-deprived）损伤后存活率的影响,确定其有效保护浓度的范围;检测相关凋亡信号通路研究灯盏花乙素对神经元OGD损伤后可能的保护机制;研究灯盏花乙素在神经元OGD损伤后对CX3CR1是否具有调节作用;在原代神经元OGD损伤模型上研究CX3CR1的表达情况,并进一步探讨CX3CR1对神经元OGD损伤过后的影响及其调节作用机制。[方 法]取24 h内出生的C57BL/6小鼠皮层,用剪碎、消化、吹打、过滤获得细胞悬液,接种在多聚赖氨酸包被的35mm培养皿里,4 h后换成神经元完全培养基,48 h后用阿糖胞苷进行纯化,72 h后换液,以后每3天半量换液,培养至第9天等神经元成熟后进行实验。用神经元特异性标记物MAP-2对神经元进行鉴定,从而获得纯度可靠的神经元。用MTT法检测Scu对OGD损伤后神经元的活性的影响,明确Scu对神经元的保护作用和最佳有效浓度。神经元氧糖剥夺法（OGD）模型的建立:原代神经元培养至第9天,在显微镜下观察神经元形态良好,将神经元分为4组:Con、OGD、OGD+辅料、OGD+Scu。用Scu和Scu辅料预处理30 min,然后需要进行OGD处理的组换为无糖Neurobasal-A,放入缺氧小室里面缺氧15 min,缺氧结束后收取细胞蛋白用于后续 Western Blotting 实验。PC-12细胞氧糖剥夺法（OGD）模型的建立:将PC-12细胞按合适密度接种在6孔板里,用高糖DMEM+10%FBS的培养基进行培养。待细胞成熟后将需要进行OGD处理的细胞换成无糖DMEM,然后放进缺氧小室里面缺氧15 min,缺氧结束后收集蛋白进行Western Blotting实验。Western Blotting:将神经元培养至成熟后随机分为Con、OGD、OGD+辅料、OGD+Scu四组,用Scu最佳有效浓度处理30min,然后建立OGD模型,收集蛋白,用 Western Blotting 检测 CX3CR1、cleaved-PARP、cleaved-Caspase3、ASK-1、P-P38、Bcl-2的表达情况,分析Scu对神经元的保护作用及机制;将PC-12细胞分为四组:Con、Con+CX3CR1siRNA、OGD、OGD+CX3CR1siRNA,用 lip2000将CX3CR1基因序列的siRNA转染进PC-12细胞,24h后建立OGD模型,收集细胞蛋白,用 Western Blotting 检测 CX3CR1、cleaved-PARP、cleaved-Caspase3、ASK-1、P-P38的表达情况,检测沉默掉CX3CR1基因对细胞凋亡的影响。[结果]原代神经元鉴定:神经元培养至第9天细胞形态良好,用DAPI和MAP-2双重染色法对神经元进行鉴定,结果显示,与未加阿糖胞苷组相比,加阿糖胞苷组神经元的纯度显着提高（p<0.05）。MTT检测:与Con相比OGD后神经元的存活率显着降低（p<0.05）。与OGD组相比,用浓度为80nmol.L-1-160 nmol.L-1 Scu预处理30min可以显着提高OGD后神经元的存活率（p<0.05）,Scu 40nmol.L-1对神经元的保护作用并不明显。形态学观察:OGD后神经元胞体膨胀、通透性降低,视野中细胞碎片增多。而经过Scu预处理后,神经元轴突较完整,视野中细胞碎片明显减少,崩解细胞不明显,这说明Scu可以对神经元起到保护作用。Western Blotting:在神经元OGD 模型上,与 Con 组相比,OGD 组 cleaved-caspase3、cleaved-PAR,ASK-1、P-P38 显着升高（*p<0.05）,Bcl-2 显着降低（*p<0.05）;与 OGD 组相比,OGD+Scu组 cleaved-caspase3、cleaved-PARP、ASK-1、P-P38 显着降低（*p<0.05）,Bcl-2显着升高（*p<0.05）。在PC-12细胞OGD模型上,用CX3CR1基因序列的siRNA转染PC-12细胞24 h后收集蛋白,结果显示,与Con组相比,Con+CX3CR1siRNA组CX3CR1的表达显着降低,差异具有统计学意义（p<0.05）。与Con组相比,OGD 后 CX3CR1、cleaved-caspase3、cleaved-PARP、ASK-1、P-P38 显着升高,差异具有统计学意义（*p<0.05）;与OGD组相比,OGD+CX3CR1siRNA组的CX3CR1、cleaved-PARP、ASK-1、P-P38显着降低,差异具有统计学意义。（*p<0.05）（**p<0.01）。[结 论]1:成功建立了一种高效简便的原代神经元氧糖剥夺模型2:灯盏花乙素在体外能明显抑制脑缺血后的神经元的凋亡。3:神经元上CX3CR1具有功能性表达,灯盏花乙素可以通过调节CX3CR1的表达对神经元起保护作用。4:灯盏花乙素可能是通过ASK-1/P-P38/Bcl-2信号通路来实现脑缺血后对神经元的保护作用。
兰蕊[8]（2019）在《灯盏细辛注射液治疗缺血性中风阴阳类证疗效及预后关系的研究》文中进行了进一步梳理目的:中药注射剂因使用方便、质控好、有效成分高,在近代得到了广泛应用。但在临床使用的过程中医患双方往往多关注药物的功效（如活血化瘀）而忽略了药性（寒热温凉）,这种不合理使用可能导致疗效的降低、或不良反应的增加。为探索中药注射剂药性对疗效与安全性的影响,本研究通过对广东省中医院神经科应用灯盏细辛注射液的缺血性中风急性期的患者进行研究,探索灯盏细辛注射液辨“性”应用对缺血性中风阴阳类证患者预后情况的影响。方法:研究采用前瞻性队列研究的方法,纳入2018年4月至2018年11月期间在广东省中医院芳村分院和大德路总院脑病科使用灯盏细辛注射液治疗的急性缺血性中风住院患者,以灯盏细辛注射液用于阴类证患者作为药证相符的观察组,将纳入研究的病例分成两组,并对其进行发病后1个月、3个月两个时点的随访。使用Epidata3.1软件建立数据库收集数据,采用SPSS18.0软件进行统计分析,比较灯盏细辛注射液是否辨“性”应用对疗效的影响,并运用Logistic回归模型对影响缺血性中风预后的相关因素进行探讨。结果:本研究共纳入134例使用灯盏细辛注射液治疗的急性缺血性中风住院患者,其中阴类证（暴露组）81例,阳类证（非暴露组）53例。对两组的性别、年龄、住院天数、既往高血压、高脂血症、糖尿病、既往卒中病史、吸烟饮酒史、溶栓治疗、手术治疗及住院用药情况进行统计学检验,结果发现P值均大于0.05,说明两组间具有可比性。本研究纳入患者的基线分布情况:男性多于女性（83/51）;中老年发病人数最多,占纳入总人数的80.6%（108/134）;阴类证患者多于阳类证患者（81/53）;纳入患者病情均较轻,入院NIHSS评分≤6分的患者占纳入总人数的76.9%（103/134）。对暴露因素与缺血性中风预后之间的相关性进行单因素分析,以出院时及发病1月、3月时随访的mRS评分作为主要结局指标进行分析,结果显示两者之间的关系无统计学意义（P>0.05）。将其他相关因素作为单一因素与各时点mRS评分相关性进行分析,结果显示性别（P=0.006）、住院天数（P=0.003）、糖尿病病史（P=0.044）、卒中病史（P=0.021）、入院NIHSS评分（P=0.000）作为单一因素对出院时mRS评分的影响有统计学意义;影响发病1月时mRS评分的单一因素有住院天数（P=0.027）、糖尿病病史（P=0.010）、入院NIHSS评分（P=0.000）;对发病3月时mRS评分与其他相关因素进行单一因素分析,结果显示性别（P=0.013）、糖尿病病史（P=0.016）、卒中病史（P=0.021）、入院NIHSS评分（P=0.000）与发病3月时的mRS评分之间的相关性有统计学意义。将各时点的mRS评分分别作为因变量,将暴露因素、性别、年龄、住院天数、既往病史、吸烟饮酒史、入院是否溶栓、是否手术、住院时是否使用抗聚药、是否使用抗凝药、是否使用降脂药等作为自变量,进行多因素Logistic回归分析,纳入P<0.05的相关因素,结果显示对出院时神经功能缺损情况有独立影响的因素有性别、高血压病史、吸烟史,入院NIHSS评分、住院时是否使用抗聚药。对发病1月时神经功能缺损情况有独立影响的因素是入院时NIHSS评分。对发病3月时神经功能缺损情况有独立影响的因素有年龄、入院时NIHSS评分。结论:研究结果显示,灯盏细辛注射液的使用对缺血性中风阴阳类证患者的预后无影响,当前数据不支持灯盏细辛注射液辨“性”用药对疗效有提升作用。通过对影响预后的其他因素进行多因素分析可知入院NIHSS评分对缺血性中风各个时点的mRS评分的影响均有显着性意义,且入院NIHSS评分越高,各时点的mRS评分越高,即神经功能缺损程度更差。性别、高血压病史、吸烟史、住院时是否使用抗聚药对出院时的预后有独立影响,年龄可影响发病3个月神经功能缺损情况,随着年龄的增大,预后会越差。
马朝晖,钟经馨,李贵福,罗望池,石尧,陈发军,张佛明,薛道金,蔡业峰,黄燕,李铁林[9]（2014）在《脑脉解痉汤减少微血栓防治动脉瘤性蛛网膜下腔出血后迟发性脑缺血的临床研究》文中指出目的探讨专方脑脉解痉汤防治动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）围术期DCI的有效性、安全性及可能作用机制。方法采用前瞻性的随机对照试验设计,将60例患者分为治疗组及对照组,每组30例,两组均采用西医基础治疗。治疗组:术前予基础治疗+尼莫地平+脑脉解痉汤1号方;术后予基础治疗+尼莫地平+脑脉解痉汤2号方。对照组:基础治疗+尼莫地平。比较各组入院3d、7d、14d时DCI发生率及美国国立卫生院卒中量表（NIHSS）评分、经颅多普勒超声（TCD）检测微血栓数目、大脑中动脉平均血流速度及血浆血小板活化因子（PAF）、二磷酸腺苷（ADP）水平;出院时、90d后的改良Rankin量表（mRS）评分以及总体死亡率。结果 14d时评价56例,死亡4例,其中治疗组2例,对照组2例90d随访终点评价病例数为54例（治疗组28例,对照组26例）,失访1例,死亡1例,均为对照组患者。治疗组DCI发生率、NIHSS评分、微血栓数目在7d、14d时明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,大脑中动脉平均血流速度7d时低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,14d时差异无统计学意义（P>0.05）。血浆PAF水平在7d、14d时低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;血浆ADP水平在7d、14d时高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。总计死亡5例,其中治疗组2例,对照组3例,两组死亡率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论采用脑脉解痉汤结合常规西医治疗能够抑制PAF及ADP活性,减少微血栓的形成,降低aSAH患者DCI发生率,减少神经功能缺损,从而改善预后。
刘旭[10]（2012）在《中西医结合治疗慢性功能性脑血管痉挛观察》文中指出目的观察中西医结合治疗慢性功能性脑血管痉挛的临床疗效。方法回顾性分析本院2008年2月～2012年2月收治入院的慢性脑血管痉挛患者200例,根据治疗方法不同分为两组,各100例。两组病例均予阿司匹林（75mgqn）口服,对照组在其基础上予以氟桂利嗪胶囊治疗,治疗组在口服阿司匹林的同时予以中药煎剂随证加减治疗。30d为1个疗程,疗程结束后观察疗效。结果治疗组症状改善87例,总有效率为87%。对照组症状改善60例,总有效率为60%。两组治疗总有效率比较,差异有统计学意义（P<0.01）。结论中西医结合治疗慢性脑血管痉挛临床疗效显着。
二、不同浓度灯盏细辛对SD大鼠蛛网膜下腔出血后血管痉挛的防治作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、不同浓度灯盏细辛对SD大鼠蛛网膜下腔出血后血管痉挛的防治作用（论文提纲范文）
（1）痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从毒论治中风病的研究进展 |
| 一、中风病中西医论治现状 |
| 二、从毒论治中风病的理论基础 |
| 三、解毒法治疗中风病的当代实践 |
| 四、常用解毒类方药治疗中风病的现代研宄 |
| 五、总结和展望 |
| 六、参考文献 |
| 综述二 痰热清注射液成分、治疗机制及临床应用的研究进展 |
| 一、痰热清注射液出自名家，历经考验，疗效确切 |
| 二、痰热清注射液含有多种化学成分 |
| 三、痰热清注射液的药理作用及安全性研究进展 |
| 四、痰热清注射液的临床应用进展 |
| 五、痰热清注射液从解毒切入治疗中风的研宄现状和展望 |
| 六、参考文献 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 痰热清注射液治疗中风病的系统评价和荟萃分析 |
| 1 引言 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4. 讨论 |
| 实验研究 |
| 研究一 利用网络药理学探讨痰热清注射液治疗中风病的生物学机制 |
| 1 引言 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究二 不同剂量痰热清注射液对大鼠脑梗死体积的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 研究三 痰热清注射液对apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 存在的问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（2）清脑益元汤对局灶性脑缺血损伤大鼠NPY、CGRP表达水平的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物及饲养条件 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 实验动物饲养条件 |
| 1.2 实验动物药物及给药方法 |
| 1.3 实验主要试剂、仪器及器材 |
| 1.3.1 主要试剂 |
| 1.3.2 主要液体及配制方法 |
| 1.3.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组及处理 |
| 2.2 实验模型建立 |
| 2.2.1 麻醉固定 |
| 2.2.2 分离血管 |
| 2.2.3 线栓的制备 |
| 2.2.4 插线与结扎 |
| 2.2.5 缝合与消毒 |
| 2.3 实验模型成功评定标准 |
| 2.4 实验动物取材 |
| 2.5 指标检测 |
| 2.5.1 制备脑组织石蜡切片 |
| 2.5.2 HE染色法检测神经细胞形态学变化 |
| 2.5.3 免疫组化法检测脑组织NPY蛋白含量 |
| 2.5.4 Western blot检测脑组织的CGRP蛋白含量 |
| 2.5.5 统计处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 实验动物脑缺血损伤后的表现 |
| 3.2 神经功能缺损评分结果 |
| 3.3 HE染色评估脑组织形态学改变 |
| 3.4 免疫组化法测脑组织NPY蛋白阳性细胞表达 |
| 3.5 Western blot法测脑组织的CGRP蛋白含量 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中医学对中风的认识 |
| 4.1.1 中风病名之源流 |
| 4.1.2 中风病因病机之探究 |
| 4.2 现代医学对缺血性脑卒中的阐释概要 |
| 4.2.1 缺血性脑卒中的发病机制 |
| 4.2.2 缺血性脑卒中的治疗进展 |
| 4.3 清脑益元汤防治缺血性脑卒中的机理及策略 |
| 4.3.1 探究痰瘀交阻,热毒内生,肾虚髓亏病机理论 |
| 4.3.2 谨守病机,清补兼施 |
| 4.3.3 清脑益元汤组方析义 |
| 4.4 局灶性脑缺血大鼠脑组织中NPY、CGRP肽类的表达 |
| 4.4.1 NPY与局灶性脑缺血的关系 |
| 4.4.2 CGRP与局灶性脑缺血的关联 |
| 4.4.3 NPY与 CGRP间的相互联系 |
| 4.5 清脑益元汤对NPY、CGRP肽类的影响 |
| 4.5.1 清脑益元汤对NPY表达的影响 |
| 4.5.2 清脑益元汤对CGRP蛋白表达的影响 |
| 4.5.3 清脑益元汤对NPY和 CGRP的综合调节效应 |
| 4.6 实验方法分析 |
| 4.6.1 动物的选择 |
| 4.6.2 造模方案的选择 |
| 5 存在的问题和展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 主要缩略词表 |
| 综述 基于内质网应激-自噬途径探究脑缺血再灌注损伤及中医药防治进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（3）灯盏细辛注射液中野黄芩苷的大鼠药代动力学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略语说明 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 中药的药代动力学及相互作用 |
| 1.2 转运体和代谢酶介导药动学DDIs |
| 1.2.1 药物代谢酶介导的药动学DDIs |
| 1.2.2 药物转运体介导的药动学DDIs |
| 1.3 DZXX和野黄芩苷的研究进展 |
| 1.3.1 DZXX的药理作用及临床应用 |
| 1.3.2 DZXX的 DDIs |
| 1.3.3 野黄芩苷的药理作用及临床应用 |
| 1.3.4 野黄芩苷的DDIs |
| 1.4 课题的研究内容及创新点 |
| 第2章 同时测定大鼠血浆中野黄芩苷和灯盏甲素的LC-MS/MS方法的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与动物 |
| 2.2.1 仪器 |
| 2.2.2 药品与试剂 |
| 2.2.3 实验动物 |
| 2.3 分析方法的建立 |
| 2.3.1 色谱条件 |
| 2.3.2 质谱条件 |
| 2.3.3 样品处理方法的筛选 |
| 2.3.4 内标物的选择 |
| 2.3.5 储备液和工作液 |
| 2.3.6 标准曲线和质控样品 |
| 2.4 方法学验证 |
| 2.4.1 专属性 |
| 2.4.2 线性和灵敏度 |
| 2.4.3 精密度和准确度 |
| 2.4.4 提取回收率和基质效应 |
| 2.4.5 稳定性 |
| 2.5 本章小结 |
| 第3章 DZXX中野黄芩苷和灯盏甲素的大鼠药代动力学研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与动物 |
| 3.2.1 仪器 |
| 3.2.2 试剂 |
| 3.2.3 研究对象 |
| 3.3 大鼠给药剂量的确定 |
| 3.4 生物样品处理方法 |
| 3.5 药代动力学试验 |
| 3.6 组织分布试验 |
| 3.7 本章小结 |
| 第4章 GLU和 OATP2B1介导的野黄芩苷的代谢和转运研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 仪器 |
| 4.2.2 材料 |
| 4.3 主要溶液的制备 |
| 4.3.1 DMEM培养液 |
| 4.3.2 0.25%胰蛋白酶 |
| 4.3.3 磷酸缓冲液 |
| 4.3.4 青霉素-链霉素溶液双抗 |
| 4.3.5 转运缓冲液 |
| 4.4 野黄芩素分析方法的建立 |
| 4.4.1 色谱条件 |
| 4.4.2 质谱条件 |
| 4.5 GLU介导野黄芩苷的水解研究 |
| 4.5.1 反应时间和酶浓度的确定 |
| 4.5.2 DZXX中其他组分对野黄芩苷代谢的影响 |
| 4.6 OATP2B1-HEK293 细胞对野黄芩苷的转运研究 |
| 4.6.1 DZXX中其他组分对野黄芩苷转运的影响 |
| 4.6.2 DZXX中灯盏甲素对野黄芩苷转运的IC50 |
| 4.7 本章小结 |
| 第5章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）电针对急性脑梗死NLRP3/caspase-1信号通路蛋白表达的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 缺血性中风的研究概述 |
| 一、病名溯源 |
| 二、病因病机 |
| 第二节 急性脑梗死的研究概述 |
| 一、流行病学研究 |
| 二、病理损伤机制 |
| 三、细胞焦亡 |
| 四、远隔损害 |
| 第三节 电针治疗急性脑梗死的研究近况 |
| 一、电针治疗急性脑梗死的机制 |
| 二、电针干预脑梗死细胞焦亡的研究 |
| 三、电针干预脑梗死远隔损害的研究 |
| 第二章 临床研究 |
| 第一节 研究资料 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究内容 |
| 三、研究对象 |
| 第二节 研究方法 |
| 一、研究类型 |
| 二、样本量估算 |
| 三、随机分组方法 |
| 四、盲法 |
| 五、分组及干预措施 |
| 六、不良事件及处理 |
| 七、观察内容 |
| 九、统计学处理 |
| 第三节 研究结果 |
| 一、一般资料 |
| 二、基线资料比较 |
| 三、疗效比较 |
| 第四节 讨论与分析 |
| 一、一般资料分析 |
| 二、疗效分析 |
| 三、讨论 |
| 第三章 实验研究 |
| 第一节 实验材料 |
| 一、实验动物 |
| 二、主要试剂及耗材 |
| 三、主要实验仪器 |
| 四、主要溶液配制 |
| 第二节 实验方法 |
| 一、实验设计 |
| 二、实验分组 |
| 三、MCAO造模 |
| 四、干预措施 |
| 五、神经功能缺损评分 |
| 六、TTC染色 |
| 七、Western blot |
| 八、免疫组织化学染色 |
| 九、统计学处理 |
| 第三节 实验结果 |
| 一、神经功能缺损评分 |
| 二、TTC染色 |
| 三、Western blot |
| 四、免疫组织化学染色 |
| 第四节 讨论与分析 |
| 一、结果分析 |
| 二、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 统计学审核证明 |
（5）灯盏细辛注射液化学成分及药代动力学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词对照表 |
| 引言 |
| 第一章 灯盏细辛注射液主要化学成分研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与设备 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 灯盏细辛注射液供试品溶液的制备 |
| 2.2 对照品溶液的配制 |
| 2.3 色谱条件 |
| 2.4 质谱条件 |
| 2.5 灯盏细辛注射液化学成分数据库的建立 |
| 2.6 数据处理和分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 色谱条件优化 |
| 3.2 质谱条件优化 |
| 3.3 灯盏细辛注射液各类型化学成分解析 |
| 4 分析与讨论 |
| 第二章 灯盏细辛注射液HPLC指纹图谱研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与设备 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 灯盏细辛注射液供试品溶液的制备 |
| 2.2 对照品溶液的配制 |
| 2.3 色谱条件 |
| 2.4 方法学考察 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 色谱条件优化 |
| 3.2 方法学考察结果 |
| 3.3 指纹图谱的建立 |
| 3.4 共有色谱峰的确立及指认 |
| 3.5 相似度评价 |
| 4 分析与讨论 |
| 第三章 灯盏细辛注射液体内原型成分及代谢产物研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与设备 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 对照品溶液的配制 |
| 2.2 血浆、尿液和粪便样品的制备 |
| 2.3 色谱条件和质谱条件 |
| 2.4 数据处理和分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 血浆、尿液和粪便样品采集时间点优化 |
| 3.2 给药剂量优化 |
| 3.3 样品前处理方法优化 |
| 3.4 灯盏细辛注射液原型成分鉴定 |
| 3.5 灯盏细辛注射液代谢产物鉴定 |
| 4 分析与讨论 |
| 第四章 灯盏细辛注射液在假手术组和MCAO模型组大鼠体内的多成分药代动力学研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 仪器与设备 |
| 1.2 药品与试剂 |
| 1.3 实验动物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 对照品溶液的配制 |
| 2.2 标准曲线血浆样品及质控样品的配制 |
| 2.3 MCAO模型大鼠的制备 |
| 2.4 色谱条件 |
| 2.5 质谱条件 |
| 2.6 样品前处理 |
| 2.7 方法学考察 |
| 2.8 大鼠体内药代动力学研究 |
| 2.9 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 色谱条件优化 |
| 3.2 质谱条件优化 |
| 3.3 样品前处理方法优化 |
| 3.4 方法学考察结果 |
| 3.5 样品分析和药代动力学研究 |
| 4 分析与讨论 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一 文献综述 灯盏细辛化学成分及药理作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录二 在校期间发表论文情况 |
（6）清脑益元汤对脑缺血损伤性大鼠GFAP、NeuN表达水平的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物选择及饲养条件 |
| 1.1.1 实验动物的选择 |
| 1.1.2 实验动物饲养条件 |
| 1.2 实验药物与给药方法 |
| 1.3 实验动物分组 |
| 1.4 主要试剂与药品 |
| 1.5 主要仪器及设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验模型制备 |
| 2.2 实验模型成功标准评分 |
| 2.3 实验动物取材 |
| 2.3.1 麻醉与灌注 |
| 2.3.2 断头与取脑 |
| 2.4 指标检测方法 |
| 2.4.1 TTC染色法检测脑梗死体积 |
| 2.4.2 TUNEL法检测与免疫组化法检测 |
| 2.4.3 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 实验大鼠大脑中动脉缺血损伤后的表现 |
| 3.2 实验大鼠造模结果 |
| 3.3 实验大鼠神经功能缺损评分 |
| 3.4 TTC染色法检测大鼠脑梗死体积 |
| 3.5 TUNEL法检测神经细胞凋亡 |
| 3.6 免疫组化法检测GFAP、NeuN阳性细胞的表达 |
| 3.6.1 GFAP在大鼠脑缺血损伤后的表达 |
| 3.6.2 NeuN在大鼠脑缺血损伤后的表达 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中医学对缺血性中风的认识 |
| 4.1.1 中风病的病名的由来 |
| 4.1.2 中风病的病因总论 |
| 4.1.3 中风病的病因探究 |
| 4.1.4 中风病的病机阐释 |
| 4.2 现代医学对缺血性中风病的认识 |
| 4.2.1 缺血性中风的研究概况 |
| 4.2.2 缺血性中风与GFAP的关系 |
| 4.2.3 缺血性中风与NeuN的关系 |
| 4.2.4 GFAP与 NeuN联合检测在缺血性中风研究中的应用价值 |
| 4.3 清脑益元汤对缺血性脑中风防治的研究 |
| 4.3.1 审察病机,辨证论治 |
| 4.3.2 肾脑同治,益精生髓 |
| 4.3.3 随法遣方,扶正祛邪 |
| 4.3.4 清脑益元汤组方及分析 |
| 4.4 脑缺血中风动物实验分析 |
| 4.4.1 实验动物及模型的建立 |
| 4.4.2 实验指标检测的方法 |
| 4.5 清脑益元汤对缺血性脑损伤的保护作用 |
| 5 存在的问题和展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 主要缩略词表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（7）灯盏花乙素对脑缺血神经元的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表(以字母顺序排列) |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（8）灯盏细辛注射液治疗缺血性中风阴阳类证疗效及预后关系的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1.1 缺血性中风现代医学研究进展 |
| 1.1.1 概念及现状 |
| 1.1.2 发病机制及治疗 |
| 1.2 中医对缺血性中风认识 |
| 1.2.1 历代医家的认识 |
| 1.2.2 近现代中医的认识 |
| 1.3 中药四气的概述 |
| 1.4 辨证论治的发展 |
| 1.5 灯盏细辛注射液的药理研究 |
| 1.5.1 药理作用 |
| 1.5.2 毒理作用及不良反应 |
| 第二章 临床研究 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究对象 |
| 2.2.1 病例来源 |
| 2.2.2 诊断标准 |
| 2.2.3 纳入标准 |
| 2.2.4 排除标准 |
| 2.3 研究设计 |
| 2.3.1 研究方法 |
| 2.3.2 病例分组 |
| 2.3.3 观察内容及随访时点 |
| 2.3.4 统计学方法 |
| 2.3.5 研究流程图 |
| 2.4 伦理审查 |
| 2.5 结果 |
| 2.5.1 病例观察情况 |
| 2.5.2 病人基线情况 |
| 2.5.3 病人基线情况比较结果 |
| 2.5.4 单因素分析相关因素对预后可能的影响 |
| 2.5.5 多因素分析可能影响预后结果的相关因素 |
| 2.6 讨论 |
| 2.6.1 基线情况分析 |
| 2.6.2 灯盏细辛注射液对缺血性中风阴阳类证辨证应用的影响 |
| 2.6.3 影响缺血性中风预后的相关因素分析 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（9）脑脉解痉汤减少微血栓防治动脉瘤性蛛网膜下腔出血后迟发性脑缺血的临床研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 治疗方法 |
| 1.6 观察指标 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（10）中西医结合治疗慢性功能性脑血管痉挛观察（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 观察方法 |
| 1.4 疗效评定 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 临床疗效 |
| 2.2 不良反应 |
| 3 讨论 |
四、不同浓度灯盏细辛对SD大鼠蛛网膜下腔出血后血管痉挛的防治作用（论文参考文献）
- [1]痰热清注射液对脑梗死后apelin信号通路及细胞凋亡和自噬的影响[D]. 李中浩. 北京中医药大学, 2021(01)
- [2]清脑益元汤对局灶性脑缺血损伤大鼠NPY、CGRP表达水平的影响[D]. 向昱臻. 广西中医药大学, 2020(02)
- [3]灯盏细辛注射液中野黄芩苷的大鼠药代动力学研究[D]. 史金新. 上海应用技术大学, 2020(02)
- [4]电针对急性脑梗死NLRP3/caspase-1信号通路蛋白表达的研究[D]. 曹冰倩. 广州中医药大学, 2020(06)
- [5]灯盏细辛注射液化学成分及药代动力学研究[D]. 郭欣. 上海中医药大学, 2019
- [6]清脑益元汤对脑缺血损伤性大鼠GFAP、NeuN表达水平的影响[D]. 毛冬雪. 广西中医药大学, 2019(03)
- [7]灯盏花乙素对脑缺血神经元的保护作用及机制研究[D]. 刘畅. 昆明医科大学, 2019(06)
- [8]灯盏细辛注射液治疗缺血性中风阴阳类证疗效及预后关系的研究[D]. 兰蕊. 广州中医药大学, 2019(04)
- [9]脑脉解痉汤减少微血栓防治动脉瘤性蛛网膜下腔出血后迟发性脑缺血的临床研究[J]. 马朝晖,钟经馨,李贵福,罗望池,石尧,陈发军,张佛明,薛道金,蔡业峰,黄燕,李铁林. 中西医结合心脑血管病杂志, 2014(08)
- [10]中西医结合治疗慢性功能性脑血管痉挛观察[J]. 刘旭. 中国当代医药, 2012(23)