一、Forskolin体外诱导Balb/c小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化(论文文献综述)
王亦菁,徐莉,金岩,史俊南[1](2009)在《体外诱导牙髓干细胞、外胚间充质干细胞向神经分化的研究》文中认为目的:对牙髓干细胞(DPSC)、外胚间充质干细胞(EMSC)进行体外神经诱导,分析研究二者的体外多向分化能力。方法:利用含forskolin和IBMX的诱导液体外诱导DPSC、EMSC向神经细胞分化,通过形态学观察,细胞免疫组化检测神经元标志物(NSE)、星形胶质细胞标志物(GFAP),对诱导后的细胞进行鉴定。结果:诱导后的DPSC大多数细胞均转变为类似于神经元的形态,突起伸出,而EMSC胞质收缩,胞体隆起,胞体周围伸出较长的突起。免疫组化结果显示DPSC大多数细胞NSE染色阳性,EMSC无阳性表达;GFAP染色显示DPSC少量细胞阳性,EMSC阳性。结论:DPSC、EMSC在一定的体外诱导条件下都具有向神经细胞分化的潜能,但由于迁移过程中部分性状发生改变,其诱导形成的细胞有所不同。
聂鑫,杨茂进,柴鉴深,张勇杰,金岩[2](2009)在《外胚间充质细胞向神经胶质/雪旺细胞的诱导分化及在BAM生物材料的存活研究》文中指出目的探讨体外诱导外胚间充质细胞向神经胶质/雪旺细胞分化的潜能,观察细胞在不同材料上的生长状况,利用分化细胞观察在BAM生物材料的复合情况,为进一步构建组织工程神经提供理论依据。方法取妊娠10.5d胎鼠颌突外胚间充质细胞,纯化后分别用8.5mg/L牛脑垂体提取物BPE、50μmol/L弗司扣林(forskolin)及联合应用诱导细胞分化。相差显微镜下观察细胞的形态变化,免疫组化鉴定细胞性质,将诱导后的细胞种植于胶原膜及胶原凝胶,并于培养3、6d后分别进行光镜、HE染色及扫描电镜观察细胞的生长情况。结果培养3d后外胚间充质细胞形态发生变化,细胞形态为梭形,突起变长。而对照组细胞形态未见明显改变;免疫组化显示外胚间充质细胞表达S-100蛋白,但无GFAP的表达。而诱导分化后出现GFAP的表达,其中BPE及Forskolin联合应用后分化效果最好,约为79.2%。而在BAM凝胶和膜上细胞都可伸展并增殖。结论BPE和Forskolin可不同程度诱导外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化。在BAM膜上分化细胞生长状态良好,为该细胞与BAM生物材料构建组织工程神经导管提供了理论依据。
孙雅娟[3](2008)在《大鼠切牙Apical bud上皮诱导ADSCs成牙本质样分化的实验研究》文中进行了进一步梳理背景牙齿的发育是一个牙源性上皮与间充质相互诱导、相互作用的复杂的生物学过程。在牙源性上皮的诱导下,牙源性间充质进一步分化形成牙本质和牙髓,而牙源性上皮也在牙源性间充质的诱导下发育形成成釉器。所以,牙源性上皮在牙齿的形态发生和发育成熟中发挥着重要的作用。目前应用于组织工程的干细胞主要有两种即胚胎干细胞和成体干细胞。但由于胚胎干细胞的应用受伦理学方面影响,所以组织工程种子细胞只能从成体干细胞方面考虑。脂肪来源的干细胞是成体干细胞的一种,具有所有干细胞的特性,体外培养有多项分化的能力,可分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、血管内皮细胞、肌肉细胞、心肌细胞及神经细胞。与其它成体干细胞相比脂肪来源的干细胞具有取材容易,获得率高,对组织损伤小等特点,故在组织工程中有着重要的位置,是一种良好的种子细胞。目的本研究旨在通过体外及体内实验探讨大鼠切牙Apical bud上皮细胞诱导大鼠脂肪来源的干细胞向成牙本质细胞分化的能力。方法1.大鼠Apical bud上皮细胞的培养与鉴定取出生后4 d大鼠仔鼠切牙的Apical bud组织,采用酶消化法和差别消化法原代培养获得大鼠切牙的Apical bud上皮细胞,并通过免疫组织化学染色检测CK14、抗釉原蛋白、抗波形丝蛋白。2.大鼠脂肪来源干细胞的培养及多向分化能力探讨取出生后4 d的大鼠腹股沟处的脂肪组织,酶消化法原代培养获得脂肪来源的干细胞。油红O染色鉴定成脂诱导;茜素红染色鉴定成骨诱导;神经细胞分子标志神经元特异性烯醇化酶、S100蛋白免疫细胞化学染色鉴定成神经诱导。3.大鼠切牙Apical bud上皮诱导脂肪干细胞(ADSCs)成牙本质样分化实验3.1体外实验:生长良好的第三代大鼠脂肪来源干细胞,培养于Apical bud上皮细胞的条件培养液中,观察细胞的生长和形态变化。诱导7 d后,采用免疫组化法检测牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达,RT-PCR检测牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白(DMP-1)的表达。3.2体内实验:取生长良好的第三代脂肪来源的干细胞,加入5%胎牛血清的DMEM/F12培养液,制成细胞悬液,将分离好的Apical bud上皮放入悬液中,离心获得重组细胞团,加入20%胎牛血清的DMEM/F12培养液,在37℃,5% CO2饱和湿度条件下过夜培养。次日将重组细胞团植入大鼠肾被膜下。8周后肾被膜下取材,分别采用HE染色、Masson三色法和免疫组化方法对移植生成物进行组织学检测。结果1.大鼠Apical bud上皮细胞:酶消化法获得的原代上皮细胞为混杂细胞,呈长梭状的细胞为成纤维样细胞,呈多角形的是上皮样细胞,上皮样细胞被成纤维样细胞包绕,呈“岛”样分布。经过2至3次差别消化,成纤维样的细胞被完全去除,贴壁细胞全部为上皮样细胞。免疫组化检测CK14表达阳性;釉原蛋白表达阳性;抗波形丝蛋白表达阴性。2.大鼠脂肪来源干细胞:原代细胞呈小多角形或短梭形,单核,有时突起较多,并存在一些多脂滴细胞,经传代后多脂滴细胞减少,脂肪干细胞突起减少,呈小多角形或短梭形,生长较快,在传代过程中未见形成自发钙结节,也未见到向成熟脂肪细胞。成脂诱导后,油红O染色可见成红色的脂滴颗粒,证实ADSCs成脂分化。成骨诱导中,茜素红染色可见呈橘红色钙盐沉积,证实ADSCs成骨分化。脂肪来源的干细胞向成神经方向诱导的过程中,神经元特异性烯醇化酶、S100蛋白染色均为阳性结果,证实ADSCs成神经分化。3.体外诱导实验结果: Apical bud上皮细胞的条件培养液可诱导脂肪来源干细胞发生形态学变化,均可见细胞变长,并出现极性改变,细胞呈平行排列的趋势。免疫组化均可见DSPP呈阳性染色。RT-PCR检测显示DSPP和DMP-1表达。4.体内诱导实验结果:Apical bud上皮细胞和脂肪来源干细胞重组体肾被膜下生成物的HE染色可见管样牙本质和骨样牙本质样结构;Masson三色法可以观察到有绿色的牙本质样结构;免疫组化检测中CK14染色阳性,DSPP染色阳性。结论1.采用酶消化法和差别消化法能够原代培养获得大鼠切牙的Apical bud上皮细胞;2.采用酶消化法能够原代培养获得大鼠脂肪来源干细胞,并证实其具有多向分化能力;3. Apical bud上皮细胞在体外能够诱导脂肪来源的干细胞向成牙本质细胞分化;4. Apical bud上皮与脂肪来源的干细胞重组在体内可以构建出牙本质样结构。
姚远,聂鑫,金岩[4](2006)在《大鼠颌突外胚间充质细胞向骨骼肌细胞诱导分化和三维培养观察》文中提出目的:探讨体外诱导外胚间充质细胞向骨骼肌细胞分化的潜能,利用分化细胞构建组织工程骨骼肌模型。方法:取妊娠10.5 d胎鼠颌突外胚间充质细胞,纯化后分别在含1、5、10 mL/L体积浓度二甲基亚砜的DMEM/F12培养基中培养。相差显微镜下观察细胞的形态变化,成肌相关因子免疫组化鉴定细胞性质,将诱导后的细胞种植于胶原膜,并于培养3、6 d后用光镜、扫描电镜观察细胞的生长情况。结果:培养3 d后,外胚间充质细胞形态出现成肌样细胞变化,细胞变得大而扁平,培养5 d后细胞出现管样结构。免疫组化鉴定显示:添加二甲基亚砜后,大部分细胞出现成肌相关因子的表达,其中5 mL/L实验组效果最好,约75%的细胞转化为骨骼肌细胞。对照细胞形态未见明显改变,免疫组化鉴定未能诱导分化出骨骼肌细胞。种植于BAM膜后,细胞生长良好,并可形成复层结构。结论:二甲基亚砜可诱导外胚间充质细胞向骨骼肌细胞分化,最佳浓度为5 mL/L;在BAM膜上分化细胞生长状态良好,说明该生物可降解膜是构建组织工程骨骼肌的适合材料。
林云锋[5](2006)在《脂肪基质细胞多向分化能力及其在组织工程中应用的研究》文中研究表明在临床医学中,因创伤、感染、肿瘤术后及先天缺陷导致组织缺损的修复重建,一直是困扰各专业医生的棘手难题。当前临床上使用的各种组织修复与重建方法虽然各有优缺点,但总体来说不尽人意。组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,对病损组织结构、功能的修复与重建进行研究开发的一门新兴科学。种子细胞是组织工程的首要因素,脂肪基质细胞(Adipose tissue-derived stromal cells,ASCs)是近年来研究最热门的种子细胞,被认为是最有可能用于临床的种子细胞之一。ASCs具有向脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞和成肌细胞等多向分化的能力,加之脂肪贮备量大、取材方便的优势,使其更具实际的应用价值。 本课题采用酶消化法获取绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)转基因小鼠脂肪基质细胞,通过体外多向诱导的培养方法,研究内源性GFP对ASCs分化能力的影响;然后以腺病毒(Adenoviral vectors,Ad)为载体,转染外源性GFP基因到Balb/c小鼠ASCs中,比较内、外源性GFP对小鼠ASCs分化能力的影响;进而研究外源性GFP对人脂肪基质细胞分化能力的影响。在此基础上,结合组织工程的方法,研究ASCs体外成软骨分化能力,并使用经过成软骨诱导的ASCs复合藻酸盐支架材料,种植于裸鼠皮下,研究ASCs形成异位软骨组织的能力;再使用经过成骨诱导的ASCs复合纳米双相磷酸钙陶
杨锐,金岩,聂鑫,周泽渊[6](2006)在《外胚间充质干细胞对射线照射后大鼠造血系统的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨颌突外胚间充质干细胞对γ射线照射后大鼠造血系统的影响。方法取孕11.5dSD大鼠胚胎颌突,用消化法培养获得外胚间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和生长状况。雄性SD大鼠80只,体重220g,随机分为A、B、C、D4组,每组20只,A、B和C组给予60Coγ射线全身一次性照射,照射剂量为6.0Gy。A组:照射后6h,尾静脉移植第2代外胚间充质干细胞;B、C组尾静脉分别移植真皮成纤维细胞和生理盐水作为阴性对照;D组未照射,为正常对照组,注射生理盐水0.3ml/只。分别于1、2、3和4周动态观察大鼠外周血白细胞及血红蛋白的变化,并于第4周行骨髓有核细胞计数,测定大鼠骨髓粒细胞巨噬细胞集落形成单位(colonyformingunit-granulocytemacrophage,CFU-GM),采用内源性脾结节法测定脾集落形成单位(colonyformingunit-spleen,CFU-S),进行大鼠骨髓组织学检查。结果培养的原代外胚间充质干细胞呈单层生长,似成纤维样梭形,有2~4个突起。移植后第3、4周,A组白细胞数明显高于B、C组(P<0.05),A、D组大鼠外周血血红蛋白含量高于B、C组(P<0.05)。移植后第4周,A组大鼠骨髓有核细胞计数明显多于B、C组(P<0.01),CFU-S计数明显多于B、C组(P<0.01),A、D组CFU-GM数量均较B、C组多(P<0.01)。结论颌突外胚间充质干细胞具有干细胞的特征,能够促进辐射损伤后大鼠造血功能的修复与重建。
杨锐,金岩,聂鑫,周泽渊[7](2005)在《大鼠外胚间充质干细胞的体外生长特性及促进造血恢复的研究》文中研究表明目的:了解大鼠外胚间充质干细胞(EMSC)的生物学特性,探索体内输入EMSC能否促进照射动物造血功能的恢复。方法:取E11.5SD大鼠胚胎颌突,消化法培养获得外胚间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和生长状况,免疫组化鉴定细胞来源;雄性SD大鼠(180~220g)分为外胚间充质干细胞组(A组)、照射对照组(B组)、成纤维细胞组(C组)、正常对照组(D组),前三组给予60Coγ射线全身照射,剂量6.0cGy,动态观察大鼠外周血变化,并于第4周检测骨髓有核细胞数量;测定大鼠骨髓细胞粒—巨噬细胞(CFU-GM)形成能力;采用内源性脾结节法测定脾集落形成能力。结果:培养的细胞呈单层生长,成纤维状、长梭形、有2~4个突起,抗HNK1、Vi mentin、S-100、NSE染色阳性,抗GFAP、NF、MA染色阴性,证实为未分化外胚间充质细胞;体内植入EMSC能够明显促进大鼠放射后外周血白细胞和血红蛋白的恢复,增加骨髓有核细胞数,减少骨髓造血细胞的坏死、凋亡,促进骨髓细胞的CFU GM的形成率并能有效地支持造血细胞增殖、分化。结论:EMSC具有干细胞特征,能促进照射大鼠造血功能的恢复。
庞全海[8](2005)在《山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及体外分化潜能的研究》文中研究说明骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)是来自于骨髓的两种干细胞之一,在人、小鼠、大鼠、兔、猪等许多物种的研究证明了该类干细胞具有体外分化为多种细胞表型的能力,有望成为未来细胞/基因治疗、组织工程的主要种子细胞之一。但是,迄今未见关于山羊,特别是成年山羊骨髓间充质干细胞分离、培养、分化等方面的系统研究报道。本研究目的在于阐明山羊骨髓间充质干细胞的生物学性能及其分化潜能,以便未来利用该类细胞作为疾病细胞/基因治疗的模型,以及利用该类细胞作为细胞生物反应器体外生产生物活性物质,进而建立山羊骨髓间充质干细胞细胞系。为此,本试验利用成年关中奶山羊为对象,较为系统全面地研究了其骨髓间充质干细胞的分离、培养、扩增、形态学、生长特性、细胞表面标志,以及体外诱导分化能力。结果如下: 1. 本试验应用贴壁分离法或密度梯度离心法成功分离获得关中奶山羊髂骨骨髓间充质干细胞,体外培养到第21 代,仍然保持其干细胞的特性,并已扩增到2.8×108细胞。2. 本试验所分离的关中奶山羊骨髓间充质干细胞呈多角形、三角形或长梭形,类似于人和其他物种的间充质干细胞。3. 扫描电镜下,山羊骨髓间充质干细胞表面较为粗糙,有多个突起,并有较多微棘和丝突,当多个细胞同时存在时,这些丝突相互搭接成网状。透射电镜下,山羊骨髓间充质干细胞的结构与其他物种基本相似,即表现为细胞内有大量扩张的粗面内质网、线粒体,分泌功能旺盛,具有该类细胞的典型特征:细胞核质比大、胞浆中细胞器少、核仁明显处于功能静息期。4. 免疫细胞化学分析表明,山羊骨髓间充质干细胞能够表达间充质干细胞的表面标志CD29、CD44、CD105、CD106 以及CD166(阳性),而不表达造血干细胞的标志CD14、CD34、CD45、c-kit (阴性),和其他物种的骨髓间充质干细胞相似。这些标志的检测有助于鉴定间充质干细胞。但本试验还发现,山羊骨髓间充质干细胞也表达TGF-α,其意义需要进一步阐明。5. 山羊骨髓间充质干细胞可以在体外用5-氮胞苷诱导分化为心肌细胞表型,能够表达α-actin 抗原,呈PAS 染色阳性,并分泌糖原,从而为未来利用这种细胞进行心脏疾病细胞/基因治疗的模型研究提供了科学依据。同时,这也是和骨髓造血干细胞的区别之一。6. 用HGF 和尼克酰胺向胰岛β-细胞诱导后,山羊骨髓间充质干细胞能够变为较典
杨锐[9](2005)在《外胚间充质干细胞在创伤愈合中的作用研究》文中提出干细胞(stem cell)拥有自我更新和增殖旺盛的特点,在特定的条件下,可以分化为不同的功能细胞,形成多种组织和器官。胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的分化和增殖构成个体发育的基础;而成体干细胞(adult stem cell,AS)的进一步分化则是成体组织、器官修复再生的基础。目前,骨髓间充质干细胞已证实可以横向从一种组织分化为另一种组织,这些研究充分证实了干细胞分化潜能的可行性,也为干细胞用于疾病治疗的潜在应用提供了理论基础。 胚胎发育的早期,神经管闭合前,颅神经嵴干细胞向腹外侧迁移到达颌突的中胚层,称为“外胚间充质干细胞”。起源于颅神经嵴的外胚间充质干细胞(ecto-mesenchymal stem cell,EMSC)是胚胎颌面发育过程中的暂时性结构,具有向多种细胞分化的潜能,可以分化为成骨细胞、成软骨细胞、牙乳头细胞、雪旺氏细胞、听神经节等,并将形成上下颌骨、颞下颌关节软骨、牙本质、牙骨质、牙周膜等组织器官,是具有高度自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,在颌面部发育和分化研究中占有重要的地位。本实验对外胚间充质干细胞的特性及分化潜能进行初步研究。以期为组织工程提供可靠的细胞来源,为临床应用奠定坚实的实验基础。 本课题目的在于证实外胚间充质干细胞的多向分化潜能,同时对外胚间充质干细胞在创伤愈合中的作用作一简单研究。实验共分两部分:
王亦菁[10](2005)在《牙髓干细胞与外胚间充质干细胞表型和分化能力的比较研究》文中提出原始干细胞亚群在胚胎发育成熟后逐渐丢失部分分化潜能,储存在某些组织器官形成成体干细胞(ASC)。在口腔颌面部发育中,颅神经嵴干细胞(CNCSC)迁移形成胚胎面突外胚间充质干细胞(EMSC),参与口腔颌面大部分组织结构的发育,机体发育成熟后,EMSC是否仍存在于口腔颌面部组织器官的相应部位并继续发挥干细胞的作用,其细胞表型和生物学行为是否有所变化尚不可知。胚胎期的牙髓组织由外胚间充质衍生而来,成体牙髓组织中存在有牙髓干细胞(DPSC),其与EMSC是否存在有延续性,二者的细胞表型及生物学行为有何异同也无明确认识。DPSC、EMSC来源于间充质,而骨髓间充质干细胞(BMSC)是目前研究较为深入的间充质干细胞(MSC),本研究以BMSC为参照,针对DPSC和EMSC的生长增殖特性,细胞表型,体内外分化能力和参与牙髓组织损伤修复能力等生物学行为进行了研究分析,主要研究结果如下: 1 DPSC、EMSC的分离培养及生长增殖特性的观察 利用酶解消化及克隆筛选成功建立了大鼠DPSC体外的培养方法。以BMSC为参照,对DPSC、EMSC的形态学特征和生长增殖活性进行观察分析,表明DPSC、EMSC的细胞学形态与BMSC相似,具有间充质来源的干细胞形态,DPSC的形态均一,呈典型的短梭性,而EMSC的形态多样,形成的克隆集落中含有多种形态差异显着的细胞,表明
二、Forskolin体外诱导Balb/c小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Forskolin体外诱导Balb/c小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化(论文提纲范文)
(1)体外诱导牙髓干细胞、外胚间充质干细胞向神经分化的研究(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.2.1 免疫磁珠筛选STRO-1+的大鼠DPSC、EMSC[1] |
1.2.2 神经诱导方法 |
1.2.3 形态学观察和诱导鉴定 |
2 结果 |
2.1 细胞形态学观察 |
2.2 免疫组化染色结果 |
3 讨论 |
(2)外胚间充质细胞向神经胶质/雪旺细胞的诱导分化及在BAM生物材料的存活研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 BAM材料的制备 |
1.2 EMSCs的培养 |
1.3 EMSCs向神经胶质/雪旺细胞的诱导分化 |
1.4 免疫组化检测 |
1.5 细胞与BAM组织工程膜复合及观察 |
1.6 细胞与BAM凝胶复合 |
2 结 果 |
2.1 免疫组化结果 |
2.2 BAM膜负载分化细胞的观察 |
2.3 分化细胞与BAM凝胶复合 |
3 讨 论 |
(3)大鼠切牙Apical bud上皮诱导ADSCs成牙本质样分化的实验研究(论文提纲范文)
英文缩写及中英文对照表 |
英文摘要 |
中文摘要 |
论文正文 大鼠切牙Apical bud 上皮诱导ADSCs 成牙本质样分化的实验研究 |
前言 |
第一部分 大鼠切牙Apical bud 上皮细胞的培养与鉴定 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
第二部分 大鼠脂肪来源的干细胞(ADSCs)分离、培养及多向分化 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
第三部分 大鼠切牙Apical bud 上皮诱导ADSCs 成牙本质样分化的实验研究 |
实验一 大鼠切牙Apical bud 上皮诱导ADSCs 成牙本质样分化的实验的体外研究 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
实验二 大鼠切牙Apical bud 上皮诱导ADSCs 成牙本质样分化的实验的体内研究 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
全文小结 |
致谢 |
照片 |
参考文献 |
文献综述一 牙的发育与再生 |
参考文献 |
文献综述二 脂肪干细胞的研究进展 |
参考文献 |
研究生期间发表文章 |
(4)大鼠颌突外胚间充质细胞向骨骼肌细胞诱导分化和三维培养观察(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.2.1 EMSCs的培养 |
1.2.2 EMSCs向骨骼肌细胞的诱导分化 |
1.2.3 免疫组化检测 |
1.2.4 组织工程骨骼肌的构建及观察 |
2 结果 |
2.1 EMSCs细胞及分化后的生长形态 |
2.2 免疫组化检测结果 |
2.3 BAM膜负载EMSCs细胞的观察 |
3 讨论 |
(5)脂肪基质细胞多向分化能力及其在组织工程中应用的研究(论文提纲范文)
缩略词 |
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
第一部分 GFP转基因小鼠脂肪基质细胞多向分化能力的实验研究 |
第二部分 小鼠脂肪基质细胞在分化过程中内外源性GFP表达的比较研究 |
第三部分 外源性GFP对人脂肪基质细胞多向分化能力的影响 |
第四部分 基于人脂肪基质细胞的组织工程化软骨的构建 |
第五部分 大鼠脂肪基质细胞修复自体颅骨缺损的研究. |
第六部分 第一腮弓外胚层间充质干细胞增殖分化能力的研究 |
参考文献 |
全文总结 |
综述 |
个人简历 |
致谢 |
(6)外胚间充质干细胞对射线照射后大鼠造血系统的影响(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 外胚间充质干细胞的分离与培养 |
1.2 大鼠全身放射性损伤模型制备和体内移植 |
1.3 检测指标 |
1.3.1 大鼠外周血白细胞及血红蛋白的变化 |
1.3.2 制备大鼠骨髓单细胞悬液及骨髓有核细胞计数 |
1.3.3 脾集落形成单位 (colony forming unit-spleen, CFU-S) 计数及骨髓粒细胞巨噬细胞形成单位 (colony forming unit-granulocyte macrophage, CFU-GM) 测定 |
1.3.4 组织学观察 |
1.4 统计学方法 |
2 结果 |
2.1 外胚间充质干细胞的观察 |
2.2 大鼠外周血白细胞检测 |
2.3 大鼠外周血血红蛋白检测 |
2.4 大鼠骨髓有核细胞数和CFU-S及CFU-GM检测 |
2.5 组织学观察 |
3 讨论 |
(7)大鼠外胚间充质干细胞的体外生长特性及促进造血恢复的研究(论文提纲范文)
材料和方法 |
1. 外胚间充质干细胞的分离与培养 |
2. 形态学观察 |
3. 生长曲线及群体倍增时间 |
4. 免疫细胞化学法鉴定细胞来源 |
5. 大鼠全身放射性损伤疾病模型的制备和体内移植 |
6. 大鼠外周血白细胞及血红蛋白变化 |
7. 制备大鼠骨髓单细胞悬液及骨髓有核细胞计数 |
8. 脾集落形成单位 (CFU-S) 计数及骨髓细胞-巨噬细胞 (CFU-GM) 形成能力测定 |
9. 统计学处理 |
结 果 |
讨 论 |
(8)山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及体外分化潜能的研究(论文提纲范文)
文献综述 |
第一章 间充质干细胞概述 |
1.1 间充质干细胞在体内的分布 |
1.1.1 骨髓源间充质干细胞 |
1.1.2 脂肪源间充质干细胞 |
1.1.3 脐带血间充质干细胞 |
1.1.4 其他组织中的间充质干细胞 |
1.2 间充质干细胞及其微环境 |
1.2.1 间充质干细胞体外生长需要的基本条件 |
1.2.2 间充质干细胞生长有关的细胞因子 |
1.2.3 间充质干细胞与造血干细胞的关系 |
1.3 骨髓间充质干细胞分化的调控 |
1.3.1 骨髓间充质干细胞成骨分化的调控 |
1.3.2 骨髓间充质干细胞成软骨分化的调控 |
1.3.3 骨髓间充质干细胞增殖分化调控的研究 |
第二章 间充质干细胞的分离培养及鉴定方法 |
2.1 样品的采集及间充质干细胞的分离 |
2.1.1 骨髓样品的采集及其MSCs 的分离 |
2.1.2 脂肪样品的采集及其MSCs 的分离方法 |
2.1.3 脐血样品的采集及其MSCs 的分离方法 |
2.2 骨髓间充质干细胞的培养方法 |
2.2.1 材料 |
2.2.2 操作方法 |
2.3 间充质干细胞的体外扩增 |
2.3.1 培养基 |
2.3.2 影响骨髓MSCs 的体外培养扩增的因素 |
2.4 间充质干细胞的鉴定 |
2.4.1 间充质干细胞的形态学 |
2.4.2 MSCs 的表面标志 |
2.4.3 间充质干细胞的鉴定方法 |
2.5 间充质干细胞的冷冻保存及解冻复苏 |
2.5.1 间充质干细胞的冷冻保存 |
2.5.2 冻存间充质干细胞的解冻与复苏 |
2.5.3 冷冻前和解冻后间充质干细胞细胞活力及性能的检测 |
第三章 间充质干细胞的分化潜能 |
3.1 向中胚层细胞分化 |
3.1.1 MSCs 向成骨细胞分化 |
3.1.2 MSCs 向成软骨细胞分化 |
3.1.3 MSCs 向成脂肪细胞分化 |
3.1.4 MSCs 向心肌细胞分化 |
3.1.5 MSCs 向肌腱及骨骼肌细胞分化 |
3.2 向外胚层细胞分化 |
3.2.1 MSCs 向神经细胞分化 |
3.2.2 向表皮细胞分化 |
3.3 向内胚层细胞分化 |
3.3.1 MSCs 向肝系细胞分化 |
3.3.2 MSCs 向胰岛细胞分化 |
3.3.3 向血管内皮细胞分化 |
3.4 MSCs 向其他细胞分化 |
3.4.1 MSCs 分化为肾细胞 |
3.4.2 MSCs 分化为其他细胞类型 |
3-1 骨髓间充质干细胞体外诱导分化潜能 |
第四章 间充质干细胞的研究现状及应用前景 |
4.1 干细胞的永生化问题 |
4.1.1 端粒、端粒酶及端粒酶逆转录酶 |
4.1.2 细胞永生化应用研究的现状 |
4.1.3 体外培养干细胞永生化的条件 |
4.1.4 间充质干细胞永生化的意义 |
4.2 临床细胞/基因治疗 |
4.2.1 治疗骨骼及关节疾病 |
4.2.2 治疗心血管系统疾病 |
4.2.3 治疗血液及造血系统疾病 |
4.2.4 治疗糖尿病 |
4.2.5 治疗肝脏疾病 |
4.2.6 治疗肿瘤或中风 |
4.2.7 治疗神经系统疾病 |
4.2.8 生产嵌合体动物和转基因动物 |
4.2.9 先天性疾病的治疗 |
实验研究 |
前言 |
第五章 山羊骨髓MSCs 的分离及其基本特性研究 |
5.1 材料和方法 |
5.1.1 试验材料 |
5.1.2 试验仪器 |
5.1.3 方法 |
5.2 结果 |
5.2.1 不同方法分离所得山羊骨髓MSCs 的情况 |
5.2.2 山羊MSCs 的基本结构 |
5.2.3 山羊MSCs 的生长曲线和群体倍增时间 |
5.2.4 山羊MSCs 的细胞表面标志 |
5.3 讨论与分析 |
5.3.1 不同分离方法对山羊MSCs 数量及活力的影响 |
5.3.2 培养传代及冷冻和解冻对山羊MSCs 的影响 |
5.3.3 山羊骨髓MSCs 样细胞的形态学特点 |
5.3.4 山羊骨髓MSCs 的细胞表面标志的探讨 |
5.4 小结 |
第六章 山羊骨髓MSCs 诱导分化为心肌样细胞 |
6.1 材料与方法 |
6.1.1 试验材料 |
6.1.2 试验方法 |
6.2 结果 |
6.2.1 山羊MSCs 向心肌细胞诱导后的形态学 |
6.2.2 山羊MSCs 向心肌细胞诱导后的染色检测 |
6.3 讨论与分析 |
6.3.1 诱导培养基对细胞形态结构的影响 |
6.3.2 MSCs 向心肌样细胞诱导分化的机制及诱导后细胞的检测 |
6.3.3 MSCs 诱导分化为心肌样细胞的临床及实践意义 |
6.4 小结 |
第七章 山羊骨髓MSCs 诱导分化为神经样细胞 |
7.1 材料与方法 |
7.1.1 试验材料 |
7.1.2 试验仪器 |
7.1.3 试验方法 |
7.2 结果 |
7.2.1 山羊骨髓MSCs 向神经细胞诱导分化后细胞的形态 |
7.2.2 山羊骨髓MSCs 向神经细胞诱导分化后的免疫细胞化学染色 |
7.3 讨论与分析 |
7.3.1 不同浓度β-巯基乙醇对山羊MSCs 向神经细胞诱导分化的影响 |
7.3.2 不同诱导时间对山羊MSCs 向神经细胞诱导分化的影响 |
7.3.3 山羊MSCs 向神经细胞诱导分化后细胞表面标志的变化 |
7.4 小结 |
第八章 山羊骨髓MSCs 诱导分化为胰岛β-样细胞 |
8.1 材料与方法 |
8.1.1 试验材料 |
8.1.2 试验仪器 |
8.1.3 方法 |
8.2 结果 |
8.2.1 山羊骨髓MSCs 向胰腺诱导后细胞的形态学观察 |
8.2.2 山羊骨髓MSCs 诱导生成β-样细胞的检测 |
8.3 讨论与分析 |
8.3.1 诱导成分对山羊骨髓MSCs 向胰腺β-细胞分化的影响 |
8.3.2 诱导剂及刺激剂对山羊骨髓MSCs 形态和功能的影响 |
8.4 小结 |
第九章 山羊骨髓源MSCs 诱导分化为成骨细胞 |
9.1 材料与方法 |
9.1.1 试验材料 |
9.1.2 试验仪器 |
9.1.3 试验方法 |
9.2 结果 |
9.2.1 山羊骨髓MSCs 向成骨细胞诱导后的形态学观察 |
9.2.2 山羊骨髓MSCs 向成骨细胞诱导后的ALP 染色 |
9.2.3 山羊骨髓MSCs 向成骨细胞诱导后的茜素红染色 |
9.3 讨论与分析 |
9.3.1 山羊骨髓MSCs 诱导分化为成骨细胞的意义 |
9.3.2 诱导剂对山羊骨髓MSCs 形态改变及其成骨分化的影响 |
9.4 小结 |
结论 |
本研究的创新点 |
进一步研究的课题 |
致谢 |
参考文献 |
作者简介 |
(9)外胚间充质干细胞在创伤愈合中的作用研究(论文提纲范文)
缩略语表 |
中文摘要 |
英文摘要 |
前言和文献回顾 |
正文 |
1.外胚间充质干细胞的体外生长特性及定向诱导分化 |
1.1 外胚间充质干细胞体外生长特性 |
1.2 不同生长因子对外胚间充质干细胞增殖活性的影响 |
1.3 诱导外胚间充质干细胞向骨骼肌细胞分化 |
1.4 诱导外胚间充质干细胞向软骨样细胞分化 |
2.外胚间充质干细胞在组织损伤修复中的作用 |
2.1 外胚间充质干细胞在放射损伤造血系统修复中的作用 |
2.2 外胚间充质干细胞向骨骼肌诱导分化后在肌肉损伤再生中的作用 |
小结 |
参考文献 |
附录 |
个人简历和研究成果 |
致谢 |
(10)牙髓干细胞与外胚间充质干细胞表型和分化能力的比较研究(论文提纲范文)
缩略语表 |
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
文献回顾 |
文献回顾一 颅神经嵴谱系细胞在口腔颌面部发育中的迁移演变 |
文献回顾二 间充质来源成体干细胞生物学特性的研究进展 |
参考文献 |
第一部分 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞分离培养和生长增殖特性观察 |
第二部分 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞细胞表型的相关研究 |
实验一 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞细胞表型的鉴定 |
实验二 免疫磁珠筛选牙髓干细胞、外胚间充质干细胞的表型研究 |
实验三 牙髓干细胞在牙髓组织中分布的研究 |
第三部分 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞分化能力的实验研究 |
实验一 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞的体外分化与矿化能力研究 |
实验二 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞裸鼠体内分化的实验研究 |
实验三 体外成牙环境对牙髓干细胞、外胚间充质干细胞分化的影响 |
实验四 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞体外多向诱导分化研究 |
第四部分 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞参与牙髓损伤修复能力研究 |
实验一 牙髓干细胞、外胚间充质干细胞体外三维培养模型的建立 |
实验二 三维培养的牙髓干细胞、外胚间充质干细胞参与牙髓损伤修复能力的实验研究 |
参考文献 |
全文总结 |
附图和图注 |
个人简历和发表论文 |
致谢 |
四、Forskolin体外诱导Balb/c小鼠下颌外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化(论文参考文献)
- [1]体外诱导牙髓干细胞、外胚间充质干细胞向神经分化的研究[J]. 王亦菁,徐莉,金岩,史俊南. 牙体牙髓牙周病学杂志, 2009(11)
- [2]外胚间充质细胞向神经胶质/雪旺细胞的诱导分化及在BAM生物材料的存活研究[J]. 聂鑫,杨茂进,柴鉴深,张勇杰,金岩. 重庆医学, 2009(14)
- [3]大鼠切牙Apical bud上皮诱导ADSCs成牙本质样分化的实验研究[D]. 孙雅娟. 第三军医大学, 2008(03)
- [4]大鼠颌突外胚间充质细胞向骨骼肌细胞诱导分化和三维培养观察[J]. 姚远,聂鑫,金岩. 牙体牙髓牙周病学杂志, 2006(06)
- [5]脂肪基质细胞多向分化能力及其在组织工程中应用的研究[D]. 林云锋. 四川大学, 2006(03)
- [6]外胚间充质干细胞对射线照射后大鼠造血系统的影响[J]. 杨锐,金岩,聂鑫,周泽渊. 中国修复重建外科杂志, 2006(03)
- [7]大鼠外胚间充质干细胞的体外生长特性及促进造血恢复的研究[J]. 杨锐,金岩,聂鑫,周泽渊. 临床口腔医学杂志, 2005(05)
- [8]山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及体外分化潜能的研究[D]. 庞全海. 西北农林科技大学, 2005(02)
- [9]外胚间充质干细胞在创伤愈合中的作用研究[D]. 杨锐. 第四军医大学, 2005(06)
- [10]牙髓干细胞与外胚间充质干细胞表型和分化能力的比较研究[D]. 王亦菁. 第四军医大学, 2005(06)