一、HBV DNA检测方法研究进展（论文文献综述）
邹铭南,蔡大川,任红[1]（2021）在《慢性乙肝抗病毒治疗过程中低病毒血症对病毒学与肝脏获益的影响》文中研究指明目前各大指南已将恩替卡韦、替诺福韦作为乙肝抗病毒治疗一线药物,大部分患者经治疗后可以获得持续性病毒学应答,但随着检测技术提升,发现仍有部分患者经乙肝一线抗病毒方案正规治疗1年后其HBV DNA水平低于2 000 IU/mL,但间歇或持续高于最低检测下限,即处于低病毒血症状态。已有研究表明在慢性乙型肝炎的治疗中,病毒的抑制情况与疾病的进展密切相关,病毒载量越低,进展为肝硬化、肝细胞癌的风险也越低。目前研究已证实低病毒血症可导致慢性HBV感染患者出现肝纤维化程度加重、肝功能失代偿发生率增加、肝癌发生率增加等后果。但同样有研究表明,大部分低病毒血症患者实际上HBV DNA水平在20～200 IU/mL之间,如此低病毒血症的概念是否足以涵盖极低病毒血症在临床上的影响呢?本文将对低病毒血症对乙肝病毒学及肝脏病理生理等的影响做一综述,以引起临床医师对低病毒血症患者的重视以及对极低病毒血症的思索,为临床医生更合理治疗及随访乙肝患者提供依据。
鲁凤民,封波,郑素军,蒋素贞,杨瑞锋,福军亮,纪冬,党双锁,鲁晓擘,陈红松,陈新月,任红,高志良,南月敏,徐小元,俊奇,张文宏,庄辉[2]（2021）在《核苷(酸)类似物经治的慢性乙型肝炎患者低病毒血症的研究现状》文中研究指明临床上广泛使用的一线抗HBV药物核苷（酸）类似物（NAs）可有效地抑制HBV DNA复制,显着减缓慢性乙型肝炎（CHB）患者的疾病进展,减少包括肝衰竭和肝癌在内的终末期肝病的发生。然而,临床上有一部分CHB患者在接受一线NAs治疗48周或更长时间后,其血清HBV DNA仍持续或间歇性地高于灵敏核酸试剂的检测下限。本文作者经讨论对低病毒血症（LLV）形成如下定义:持续性LLV,指对接受恩替卡韦、富马酸替诺福韦酯或富马酸丙酚替诺福韦治疗48周及以上的CHB患者,用灵敏的定量PCR方法至少连续检测2次,每次间隔3～6个月,HBV DNA均阳性,但<2000 IU/ml;间歇性LLV是指用灵敏的q PCR法至少连续检测3次,每次间隔3～6个月,HBV DNA为间歇性阳性,但<2000 IU/ml。诊断LLV应注意排除患者存在用药依从性和耐药突变的问题。LLV可能与NAs治疗下肝纤维化进展及肝硬化患者肝细胞癌风险增加有关,但目前对LLV发生后原治疗方案是否需要调整仍存在争议。综述了NAs治疗下LLV的发生率及其对临床预后的影响,并分析了LLV发生的可能机制,以期为今后NAs经治LLV患者的管理提供参考。
湛梦茹[3]（2021）在《激活免疫检查点OX40对HBV复制的影响及相关机制研究》文中指出背景与目的:慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）引起的一种慢性传染性疾病,全球疾病负担重,其中大部分慢性乙肝病毒携带者均在5岁之前被感染。目前没有能够彻底清除HBV的治疗方法。免疫治疗能够实现CHB患者的功能性治愈,是具有前景的乙肝治疗策略之一。慢性HBV感染时免疫系统往往是免疫耐受或衰竭状态。免疫检查点是表达在免疫细胞表面对免疫反应起活化或抑制作用的分子,通过对他们的调节能够打破这种耐受状态。共刺激分子OX40/OX40L、4-1BB是肿瘤坏死因子（受体）超家族（tumor necrosis factor（receptor）superfamily,TNF（R）SF）的成员,在免疫反应的活化尤其是T细胞的活化中起到了重要作用。而程序性死亡受体-1（programmed cell death 1,PD-1）是免疫球蛋白受体CD28亚家族的成员,作为抑制性的信号分子与免疫系统的耐受或衰竭有关。然而目前为止,这些免疫检查点能否作为免疫调节的靶点治疗CHB尚不能明确。相对于婴幼儿,成人对HBV可以产生更强的更有效的免疫反应从而清除病毒,其中发挥年龄依赖性作用的免疫分子尚不清楚。本研究立足于慢性乙型肝炎感染的背景下,通过对OX40/OX40L、PD-1、4-1BB在CHB患者中的表达特点的研究,从而明确其临床意义,及其与年龄的关系。接着我们在rAAV8/1.3HBV小鼠模型中激活免疫检查点OX40,研究其对HBV复制的影响及相关机制,以期为以OX40为靶点治疗CHB的策略提供更多的理论依据。材料与方法:本研究首先收集人的样本用以检测免疫检查点OX40/OX40L、PD-1、4-1BB的表达情况。外周血样本来自我们从2018年9月到2019年6月在吉林大学白求恩第一医院纳入的64名慢性乙肝患者和另外招募的37名健康志愿者。其中慢性乙肝患者包括52名未进行抗病毒治疗的患者和12名应用恩替卡韦（entecavir,ETV）抗病毒治疗的患者,健康志愿者包括24名成人和13名儿童。从外周血中分离出血浆和外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）。肝脏组织病理标本来自18名进行肝脏穿刺的患者和6名进行肝脏血管瘤手术的成人患者。其中18名慢性乙肝患者包括9名慢性乙型肝炎发作的患者和9名慢性乙型病毒感染未发作的患者。在收集的人的样本中我们先后检测了OX40/OX40L、PD-1、4-1BB的表达情况。为了研究OX40/OX40L在人群中的表达特点,我们应用流式细胞术检测PBMCs中膜形式的OX40和OX40L（membrane-bound OX40,m OX40;membrane-bound OX40L,m OX40L）的表达;应用酶联免疫吸附试验检测血浆中可溶性形式的OX40和OX40L（soluble OX40,s OX40;soluble OX40L,s OX40L）水平;应用免疫组化的方法对肝组织中OX40和OX40L的表达量进行检测。之后为了研究PD-1和4-1BB在CHB患者中表达特点,我们应用前期检测OX40/OX40L的人群样本外加从我院病理科另申请到的6名儿童的肝组织样本,对PD-1和4-1BB在CHB患者中的表达情况进行了检测。我们应用磁珠分选的方法将PBMCs中的CD4+和CD8+T细胞分选出来,应用q RT-PCR的方法检测了各个T细胞亚群PD-1和4-1BB mRNA的水平;应用酶联免疫吸附试验法检测血浆中可溶性的PD-1和4-1BB（soluble PD-1,s PD-1;soluble 4-1BB,s4-1BB）的水平;应用免疫组化的方法检测了肝组织中关于PD-1和4-1BB的表达情况。最后我们将以上检测结果与CHB患者的疾病特点及临床指标进行相关性分析从而探究他们在慢性乙肝感染中的临床意义,及与年龄的关系。基于前期临床样本的结果,我们应用尾静脉注射腺相关病毒（adeno-associated virus,AAV）的方法构建了rAAV/1.3HBV小鼠模型,首次将OX40激动性的单抗应用于该模型以观察其产生的作用。为了明确激活免疫检查点OX40对HBV复制的作用,我们应用全自动电化学发光分析仪检测血清内乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBs Ag）和乙肝e抗原（hepatitis B e antigen,HBe Ag）的水平,用q RT-PCR法检测HBV DNA定量,用免疫组化法检测小鼠肝组织内HBs Ag和乙肝核心抗原（hepatitis B core antigen,HBc Ag）的表达水平。为了明确激活OX40靶点对HBV复制的作用的同时产生的肝脏炎症变化,我们应用微孔板法检测小鼠血清中ALT、AST的水平,应用HE染色的方法观察小鼠肝脏炎症病理变化。为了观察这个过程中伴随的免疫变化,我们分离了小鼠肝脏内浸润的淋巴细胞,应用流式细胞术对其中T细胞亚群的比例进行了检测,同时我们应用流式微球检测法（cytometric bead array,CBA）对该过程中小鼠血清中Th1、Th2、Th17相关的细胞因子进行了评估。期间我们还对小鼠脾脏的长度和重量进行了评估与检测。为了探究上述过程的机制,我们在rAAV8/1.3HBV小鼠模型的基础上将CD4+和CD8+T细胞进行分别剔除,构建了CD4+和CD8+T细胞缺陷的rAAV8/1.3HBV小鼠模型,连同安慰剂组小鼠同时给予OX40激动剂。应用上述检测方法分别对模型中病毒学变化和血清转氨酶变化进行了检测。同时为了进一步从mRNA水平研究激活OX40靶点对HBV复制的作用过程中基因表达的变化,我们分离了小鼠肝内的淋巴细胞对其进行mRNA转录组测序（mRNA sequencing,mRNA-seq）。测序所得的差异表达的mRNAs（differentially expressed mRNAs,DEmRNAs）分别纳入火山图和聚类热图,并分别应用Go功能富集及KEGG、Reactome通路富集的方法对这些DEmRNAs所富集的功能和通路进行初步探索。研究结果:关于OX40/OX40L在人的样本中的表达结果显示在外周血PBMCs中表达OX40+T细胞的百分比在CHB患者中是减少的,其中在高病毒载量组和肝炎发作组中这种减少的趋势尤其明显,且OX40+T细胞的百分比与血清病毒学指标呈负相关。而OX40L+B细胞和单核细胞的百分比在CHB患者的PBMCs中是增多的,同样的这种增多的趋势在高病毒载量组和肝炎发作的组中也比较明显,且他们主要与肝脏炎症指标呈正相关。同时我们还发现慢性乙肝患者外周血中s OX40/OX40L表达明显升高,同样的这种增多的趋势在高病毒载量组和肝炎发作组比较明显,且s OX40/OX40L的水平与病毒复制及肝脏炎症指标均呈正相关。另外ETV治疗前后血浆中s OX40水平没有明显变化。同时我们发现肝组织中OX40/OX40L的表达趋势与血浆中s OX40/OX40L表达趋势相似,即在CHB患者中是表达升高的,且在肝炎发作的患者中升高的趋势更明显。最后我们发现在健康人外周血中总T细胞中OX40+细胞的百分比,CD4+T细胞中的OX40+细胞的百分比,CD14+单核细胞中OX40L+细胞的百分比及血浆中s OX40的水平与年龄呈正相关,具有年龄依赖性。其次关于PD-1和4-1BB在人群中表达的相关研究结果显示在CHB患者中无论是PBMCs中CD4+T细胞还是CD8+T细胞中PD-1 mRNA的水平与健康组相比均是升高的,这与CHB患者肝脏组织中PD-1的表达趋势是一致的。在CHB患者血浆中s PD-1也是升高的,且这种升高的趋势在高病毒载量组和肝炎发作组也比较明显,ETV治疗前后s PD-1水平没有明显变化。另外血浆中s PD-1的水平不仅与HBV的病毒学指标呈正相关还与肝脏炎症指标呈正相关。4-1BB在CHB患者中的表达特点大致与PD-1相似,简单来讲血浆中的s4-1BB的水平在CHB患者中也是异常升高的,且在高病毒载量组和肝炎发作组升高趋势比较明显,ETV治疗前后s4-1BB水平没有明显变化。血浆中s4-1BB水平主要与血清病毒学指标呈正相关。肝组织中4-1BB的表达趋势与血浆中s4-1BB的趋势相似,即与健康对照组相比,CHB患者的肝脏组织中4-1BB的表达水平更高。而在总PBMCs、CD4+T细胞以及CD8+T细胞中4-1BB mRNA的水平在CHB患者中均有升高的趋势但无统计学差异。最后我们观察到在健康人群中无论是PD-1还是4-1BB的表达在不同年龄组均无明显差异。通过对上述免疫检查点的表达特点及临床意义的分析,我们选择将OX40靶点激动剂应用于已经构建成功的rAAV8/1.3HBV小鼠模型中。我们发现小鼠血清中HBs Ag和肝内HBV DNA水平均有所下降,且血清中HBs Ag的水平在第8天达到最低值。同时我们观察到小鼠肝组织内HBs Ag和HBc Ag表达与安慰剂组相比也有减少的趋势。但激活OX40靶点似乎对血清HBV DNA及HBe Ag水平没有影响。在HBV小鼠模型中激活OX40靶点HBV被抑制的同时还伴随着肝脏炎症的产生,表现为血清中ALT和AST不同程度的升高,肝脏组织内炎症细胞的浸润。除此之外,小鼠肝脏内T细胞亚群比例及血清中免疫细胞因子也发生了变化,表现为CD8+T细胞比例的升高及Th1、Th2及Th17相关的细胞因子升高,且相关细胞因子的水平均表现为先升高再下降的趋势,与病毒清除的过程一致。另外我们发现使用OX40激动剂能够引起小鼠脾脏的增大。同时我们还发现在该模型中应用OX40激动剂的效应呈剂量依赖性,主要表现在血清HBs Ag、肝内HBV DNA的下降水平,CD8+T细胞比例升高的水平以及脾脏增大的程度上。在应用OX40激动剂抑制HBV过程相关机制的探索中,我们发现CD4+/CD8+T细胞缺陷和免疫正常的rAAV8/1.3HBV小鼠同时给予OX40激动剂后,在给药第8天和第12天CD4+T和CD8+T细胞缺陷的小鼠血清中HBs Ag水平与免疫正常组HBV小鼠相比均是升高的,其中以CD8+T细胞缺陷的小鼠升高趋势更明显。与免疫正常组的小鼠相比,CD4+T细胞缺陷小鼠肝内HBV DNA水平没有明显变化,而CD8+T细胞缺陷小鼠则有轻度升高趋势。对于小鼠血清ALT水平,免疫正常的和CD4+T细胞缺陷的HBV小鼠给予OX40激动剂后转氨酶均有所升高,而CD8+T细胞缺陷的HBV小鼠则没有明显升高。关于应用OX40激动剂和安慰剂的HBV小鼠肝内淋巴细胞基于mRNA水平的转录组学测序结果显示,经过OX40激动剂处理后小鼠肝内淋巴细胞表达上调的mRNAs有3008个,下调的有2269个,并可聚类成簇。经Go功能富集分析后,我们发现在生物进程方面这些DEmRNAs主要富集到了白细胞的分化,染色质及组蛋白的修饰调节等过程;在细胞成分方面他们主要富集到了核内的染色质、异染色质及中心体等细胞组成成分上;而在分子功能方面他们主要富集在转录、翻译及小分子GTP酶的结合、Ras GPT酶结合等功能上。经KEGG通路富集分析我们发现这些GEmRNAs主要富集在HBV、人类嗜T淋巴细胞白血病病毒（human T-cell leukemia virus,HTLV）、EB病毒感染相关通路、丝裂原活化的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）、趋化因子及NF-kapa B等信号通路。而经Reactome分析这些GEmRNAs主要富集在中性粒细胞脱颗粒,细胞因子,白细胞介素,转录调控等相关信号通路。研究结论:免疫检查点OX40/OX40L、PD-1及4-1BB在人的样本中的表达特点向我们提示这几个免疫检查点可能均与慢性HBV感染相关。但其中只有OX40的表达与HBV病毒学指标呈负相关,考虑其与病毒清除密切相关,且只有OX40/OX40L表达呈年龄依赖性。因此我们将OX40激动剂首次应用于rAAV8/1.3HBV小鼠模型,发现激活OX40靶点对HBV复制具有抑制作用,是一个具有前景的治疗CHB的免疫检查点,但激活OX40靶点不能完全清除HBV因此未来可能还需要联合其它治疗方式。对于激活OX40靶点抑制HBV复制的机制显示该过程相对依赖CD4+T细胞似乎更依赖于CD8+T细胞,CD4+T细胞的重要性不可否认,但未来对于HBV的免疫治疗我们也许应该将更多的关注点放在CD8+T细胞上。
徐清浪[4]（2021）在《慢性HBV感染患者外周血T淋巴细胞亚群变化特征及临床意义》文中研究指明目的:通过分析外周血T淋巴细胞亚群在慢性HBV感染患者不同临床阶段的水平特征与各临床指标之间的关系,同时对免疫耐受期、e抗原阳性患者进行随访,评估T淋巴细胞亚群对免疫状态、打破免疫耐受及发生e抗原转换的诊断效能,探讨T淋巴细胞亚群在慢性HBV感染患者中的分布特征及其临床意义。方法:入组2018年12月～2020年12月在南昌大学第一附属医院感染科就诊及住院慢性HBV感染患者共231例,收集基本资料及各临床指标值,分别根据免疫状态、HBV-DNA载量、HBs Ag定量水平进行分组,观察T淋巴细胞亚群与各临床指标间的关系及评估免疫状态的诊断效能;同时对55例免疫耐受期慢性HBV感染患者及132例HBe Ag（+）阳性患者进行随访,观察T淋巴细胞亚群对打破免疫耐受、发生e抗原血清学转换的诊断效能及抗病毒前后慢性HBV感染患者外周血T淋巴细胞亚群变化。结果:1、HBV感染后免疫耐受组与非免疫耐受组CD3+、CD4+、CD8+细胞绝对值及CD4/CD8比值均低于健康体检组,差异有统计学意义（P<0.05）。免疫耐受组CD3+、CD4+细胞绝对值、CD4+细胞比例及CD4/CD8比值均低于非免疫耐受组,差异有统计学意义（P<0.05）。2、慢性HBV感染患者外周血CD3+、CD4+细胞绝对值及比例、CD4/CD8比例随着HBV载量升高呈逐渐下降趋势,CD8+细胞绝对值及比例逐渐明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。3、慢性HBV感染患者HBs Ag定量高载量组CD3+、CD4+细胞绝对值均低于低、中HBs Ag载量组,差异有统计学意义（P<0.05）。低载量组CD4/CD8比值大于中载量组,差异有统计学意义（P<0.05）。4、HBV-DNA与CD3+细胞绝对值及比例、CD4+细胞比例、CD4/CD8比值存在负相关关系,相关系数分别为-0.407、-0.438、-0.516、-0.703,与CD8+细胞比例存在正相关关系,相关系数为0.511。HBs Ag与CD3+细胞绝对值、CD4+细胞绝对值存在负相关关系,相关系数分别为-0.431、-0.429。ALT与CD8+细胞绝对值及比例存在负相关关系,相关系数分别为-0.418、-0.439。TBi L与CD3+细胞绝对值及比例、CD4+细胞绝对值及比例、CD8+细胞绝对值及比例存在负相关关系,相关系数分别为-0.443、-0.531、-0.572、-0.515、-0.453、-0.412。WBC计数与CD3+细胞绝对值、CD4+细胞绝对值、CD8+细胞绝对值存在正相关关系,相关系数分别为0.486、0.438、0.409。5、抗病毒治疗后,慢性HBV感染患者CD3+细胞绝对值与比例、CD4+细胞绝对值与比例、CD8+细胞绝对值较抗病毒前明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）。6、CD4+细胞绝对值、CD4+细胞比例、CD4/CD8比值对评估免疫状态的检验效能曲线下面积分别为0.774、0.827、0.721。7、CD3+、CD4+、CD8+细胞数量与CD4/CD8比值对打破免疫耐受状态的检验效能曲线下面积分别为0.831、0.892、0.802、0.837。8、CD3+、CD4+、CD8+细胞数量对发生e抗原转换的检效能曲线下面积分别为0.858、0.872、0.735。结论:1、HBV感染后,普遍存在细胞免疫功能下降及免疫紊乱现象,这一现象在免疫耐受期患者当中表现得更为明显,且随着慢乙肝疾病重症化,机体细胞免疫功能可能出现下降甚至衰竭现象。2、HBV-DNA载量、HBs Ag定量水平与外周血T淋巴细胞亚群之间存在密切关系,HBV-DNA、HBs Ag载量越高,对患者细胞免疫功能的抑制作用越强,而抗病毒治疗可显着改善HBV-DNA对患者细胞免疫功能的抑制作用。3、CD4+细胞绝对值数量、比例及CD4/CD8比值对HBV感染患者免疫状态有较好的评估效应,CD3+、CD4+、CD8+细胞数量与CD4/CD8比值对预测免疫耐受期患者打破免疫耐受状态有一定的参考价值,临床上可动态检测外周血T淋巴细胞辅助评估患者免疫状态及打破免疫耐受可能性。4、检测CD3+、CD4+、CD8+细胞数量对预测发生e抗原血清学转换有一定的参考意义。
王琰[5]（2021）在《恩替卡韦应答不佳慢乙肝患者转换为富马酸丙酚替诺福韦临床疗效与安全性分析》文中认为目的:明确恩替卡韦（Entecavir,ETV）应答不佳（使用ETV初次抗病毒治疗48周,HBV DNA较基线下降1log10 IU/ml,但仍可以检测出HBV DNA）患者转换为富马酸丙酚替诺福韦（Tenofovir alafenamide,TAF）治疗48周的临床疗效及安全性,使应答不佳患者尽早达到完全病毒学应答（Complete virological response,CVR）,最大程度的长期抑制乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）活动,延缓或减少慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B,CHB）并发症的发生。方法:回顾性分析2017年1月至2019年12月期间在吉林大学第二医院使用ETV初次抗病毒治疗48周,HBV DNA较基线下降1log10IU/ml,但仍能检测出HBV DNA的68例ETV应答不佳CHB患者的临床资料。1.全部患者在ETV初治48周时按照不同治疗方案分为两组,即转换TAF治疗组（TAF组,32例）,25mg,随食物口服,1次/日;继续ETV治疗组（ETV组,36例）,0.5mg,餐前或餐后至少2小时口服,1次/日,均持续48周。以ETV初治48周作为本研究观察的起始时间,初治48周时的检测值作为基线值。纪录两组在基线、治疗4周、12周、24周、48周的HBV DNA,HBs Ag,HBe Ag,肝功（ALT、AST、TBIL、GGT）、肾功（s Cr、e GFR）等生化指标,肝硬度值、病毒学突破及不良反应等。对比分析ETV应答不佳患者转换TAF后的病毒学应答、血清学应答、生化学应答以及药物安全性等情况。2.TAF组按照ETV初治48周时不同病毒载量进行分组,以1000IU/ml为界,将TAF组分为HBV DNA<1000IU/ml TAF组（11例）和HBV DNA≥1000IU/ml TAF组（21例）;同理,将ETV组分为HBV DNA<1000IU/ml ETV组（13例）和HBV DNA≥1000IU/ml ETV组（23例）,组成以下4组进行对比:HBV DNA<1000IU/ml ETV组和HBV DNA≥1000IU/ml ETV组、HBV DNA<1000IU/ml TAF组和HBV DNA≥1000IU/ml TAF组、HBV DNA<1000IU/ml ETV组和HBV DNA<1000IU/ml TAF组以及HBV DNA≥1000IU/ml ETV组和HBV DNA≥1000IU/ml TAF组,分别比较组间继续治疗4周、12周、24周、48周时与基线相比的HBV DNA下降率以及CVR率,明确不同病毒载量的ETV应答不佳患者转换TAF后的抗病毒疗效。3.TAF组按照ETV初治48周时血清学标志物分为HBe Ag阳性TAF组（19例）和HBe Ag阴性TAF组（13例）;同理,将ETV组分为HBe Ag阳性ETV组（20例）和HBe Ag阴性ETV组（16例）,组成以下2组对比组:HBe Ag阳性TAF组和HBe Ag阳性ETV组、HBe Ag阴性TAF组和HBe Ag阴性ETV组,比较组间继续治疗4周、12周、24周、48周时与基线相比的HBV DNA下降率以及CVR率,明确HBe Ag阳性及HBe Ag阴性的ETV应答不佳患者转换TAF后的抗病毒疗效。本研究采用SPSS25.0对全部数据进行相关统计学分析。结果:1.全部患者HBV DNA水平以及CVR率变化特点:TAF组在4周、12周、24周及48周时HBV DNA低于ETV组,且差异有意义（P<0.05）,HBV DNA在基线时相比无统计学差异（P>0.05）。TAF组各时间点的CVR率为15.6%、43.8%、71.9%及87.5%,ETV组为5.6%、8.3%、22.2%以及41.7%,两组的CVR率在12周、24周及48周时差异有统计学意义（P<0.05）。2.不同病毒载量基线的ETV应答不佳患者抗病毒过程中HBV DNA较基线下降率以及CVR率变化特点:HBV DNA<1000IU/ml ETV组和HBV DNA≥1000IU/ml ETV组:HBV DNA<1000IU/ml ETV组在4周、12周、24周以及48周时HBV DNA下降率更高,两组除48周外其余时间点均有统计学差异（P<0.05）;HBV DNA<1000IU/ml ETV组各时间的CVR率为15.4%、23.1%、46.2%以及76.9%,HBV DNA≥1000IU/ml ETV组的CVR率分别为0.0%、0.0%、8.7%以及21.7%,两组之间的CVR率在12周、24周及48周时存在统计学差别（P<0.05）。HBV DNA<1000IU/ml TAF组和HBV DNA≥1000IU/ml TAF组:HBV DNA<1000IU/ml TAF组在4周、12周时HBV DNA下降率更高,而HBV DNA≥1000IU/ml TAF组在24周、48周时更高,但两组下降率的差异仅在4周和48周比存在统计学意义（P<0.05）;HBV DNA<1000IU/ml TAF组各时间CVR率分别为45.5%、81.2%、100%以及100%,HBV DNA≥1000IU/ml TAF组分别为0.0%、23.8%、57.1%以及81.0%,两个组CVR率除48周外均有统计学差异（P<0.05）。HBV DNA<1000IU/ml TAF组和HBV DNA<1000IU/ml ETV组:两组中HBV DNA<1000IU/ml TAF组在各时间点HBV DNA下降率更高,但仅在4周、12周、24周有统计学差异（P<0.05）;同时HBV DNA<1000IU/ml TAF组CVR率也更高,但差异在4周和48周时无统计学意义（P>0.05）。HBV DNA≥1000IU/ml TAF组和HBV DNA≥1000IU/ml ETV组:两组中HBV DNA≥1000IU/ml TAF组在各时间点HBV DNA下降率更高,统计学差异明显（P<0.05）;且HBV DNA≥1000IU/ml TAF组CVR率也更高,两组在12周、24周以及48周时发生的CVR率有统计学差异（P<0.05）。3.HBe Ag阴性ETV应答不佳患者抗病毒过程中HBV DNA较基线下降率以及CVR率变化特点:HBe Ag阴性TAF组和HBe Ag阴性ETV组比较4周、12周、24周以及48周的HBV DNA下降率时发现前者在各时间点HBV DNA下降率更高,且均差异显着（P<0.05）;HBe Ag阴性TAF组各时间点CVR率为23.1%、69.2%、84.6%以及92.3%,HBe Ag阴性ETV组为12.5%、18.8%、25.0%以及56.3%,两组在12周、24周及48周时发生的CVR率有统计学差异（P<0.05）。4.HBe Ag阳性ETV应答不佳患者抗病毒过程中HBV DNA较基线下降率以及CVR率变化特点:HBe Ag阳性TAF组和HBe Ag阳性ETV组比较4周、12周、24周以及48周HBV DNA下降率时发现前者在各时间点下降率更高,且存在统计学差异（P<0.05）;HBe Ag阳性TAF组各时间点CVR率分别为10.5%、26.3%、63.2%以及84.2%,HBe Ag阳性ETV组为0.0%、0.0%、20.0%以及30.0%,各时间点的CVR率从12周开始差异有意义（P<0.05）。5.治疗过程中HBs Ag、HBe Ag变化情况:TAF组和ETV组HBs Ag水平逐渐下降,各组内在基线、24周、48周时两两比较均有统计学差异（P<0.05）,两个组之间对比各个时间点的HBs Ag差异不明显（P>0.05）。两组均未发生HBs Ag血清学转换,48周时HBe Ag阴转率分别为21.1%和10.0%,均未发生HBe Ag血清学转换。6.治疗过程中肝硬度值变化情况:TAF和ETV组在基线、4周、12周、24周及48周的肝硬度值逐渐下降,但TAF组肝硬度值更低,各时间与同组基线相比差异明显（P<0.05）,但两组间比较除在48周时有统计学差异（P<0.05）外,余比较无统计学差异（P>0.05）。7.治疗过程中肝功能（ALT、AST、TBIL、GGT）变化及异常ALT复常情况:在基线、4周、12周、24周及48周时,TAF组和ETV组各时间点的ALT、AST、TBIL均低于同组基线水平,与同组基线相比差异显着（P<0.05）,各时间点的GGT与基线相比无统计学差异（P>0.05）。而两组间各时间点的ALT、AST、TBIL、GGT相比差异无统计学意义（P>0.05）。TAF组ALT转复率分别为23.5%、70.6%、76.5%、82.4%,ETV组ALT转复率分别为13.3%、26.7%、33.3%、60.0%,在12周、24周时两组间对比差异明显（P<0.05）。8.TAF组和ETV组均未出现病毒学突破,仅ETV组出现恶心、疲劳2例,但未停止用药,未经其他药物等治疗干预自行缓解,两组均未出现s Cr、e GFR异常。结论:1.ETV应答不佳CHB患者转换TAF后的HBV DNA下降幅度以及CVR率均明显优于继续使用ETV治疗,TAF可以更快速的抑制病毒复制,同时安全性较高;2.ETV初治48周时不论HBV DNA<1000IU/ml还是≥1000IU/ml,转换TAF后HBV DNA下降优于继续ETV治疗;3.无论HBe Ag阳性或HBe Ag阴性的ETV应答不佳CHB患者,转换TAF治疗控制病毒效果均优于继续ETV治疗;4.TAF和ETV均可以有效降低HBs Ag定量、改善肝功能,提高ALT转复率;5.在改善肝硬度值方面,转换TAF治疗效果优于继续使用ETV。
李嫒[6]（2021）在《肝功能正常的慢性HBV感染患者的抗病毒治疗疗效研究》文中研究指明目的:1.探究非活动性HBsAg携带状态患者抗病毒治疗疗效,为非活动性HBsAg携带者抗病毒治疗的可行性提供临床依据。2.探究慢性乙肝病毒携带状态患者（免疫耐受期）抗病毒治疗疗效,从而探讨慢性乙肝病毒携带状态患者（免疫耐受期）抗病毒治疗的可行性。3.探索影响肝功能正常的慢性HBV感染患者抗病毒治疗疗效的可能因素,为预测抗病毒治疗疗效提供依据。方法:1.纳入2019年12月-2020年7月南昌大学第一附属医院感染科门诊就诊的慢性HBV感染者144例,根据HBeAg状态将患者分为两个研究部分,分别为HBeAg阴性慢性HBV感染患者90例,HBeAg阳性慢性HBV感染患者54例,每个研究部分中再根据肝功能是否异常将患者分为研究组和对照组,给予ETV或TDF抗病毒治疗,对比观察每个研究部分中研究组和对照组的抗病毒疗效,并观察不良反应发生率。采用SPSS 25.0统计学软件进行统计学分析,使用独立样本T检验、Mann-Whitney U检验和卡方检验进行比较组间比较。2.纳入第一部分、第二部分的研究组,即2019年12月-2020年7月南昌大学第一附属医院感染科门诊就诊的肝功能正常的慢性HBV感染者96例,根据HBeAg状态将患者分为非活动性HBsAg携带者组69例,慢性乙肝病毒携带者组27例,分析基线HBsAg、HBV pgRNA与两组患者抗病毒治疗36周后病毒学应答之间的相关性。结果:1、在90例HBeAg阴性慢性HBV感染患者抗病毒治疗随访过程中,非活动性HBsAg携带者组（研究组）和慢性乙型肝炎组（对照组）的病毒学应答率在各观察时点分别为:第12周98.6%和95.2%,第24周100%和100%,第36周100%和100%,第48周100%和100%,各观察时点两组病毒学应答率差异均无统计学意义（P>0.05）。两组患者在1年随访时间内均无HBsAg血清学转化、病毒学突破的发生。两组患者均未观察到不良事件及药物不良反应。2、54例HBeAg阳性慢性HBV感染患者抗病毒治疗随访时间内,随访时间内,慢性乙肝病毒携带组（研究组）和慢性乙型肝炎组（对照组）于各观察点的HBV DNA（lg IU/ml）均数分别为:第12周4.03和3.13,第24周3.70和2.35,第36周3.11和1.77,各观察点两组比较间均有统计学意义（P<0.05）。随访36周时,研究组血清HBV DNA较基线下降4lg IU/ml。研究组和对照组各观察点病毒学应答率分别为:第12周7.4%和44.4%,第24周11.1%和55.6%,第36周25.9%和74.1%,两组间比较均有统计学意义（P<0.05）。两组抗病毒36周过程中,研究组未发生血清HBeAg转换,对照组血清HBeAg转换率为3.70%。两组患者均未观察到不良事件及药物副反应。3、在96例肝功能正常的慢性HBV感染患者中,两组基线血清HBsAg及HBV pgRNA差异均有统计学意义（P=0.00<0.05）,非活动性HBsAg携带组HBV pgRNA及HBsAg基线水平显着低于慢性乙肝病毒携带组。基线pgRNA与病毒学应答（36周）（rs=-0.654）间存在显着相关性,基线HBsAg间具有显着相关性（rs=-0.676）。结论:1、非活动HBsAg携带状态患者抗病毒治疗也可以获得良好的病毒学疗效。2、慢性乙肝病毒携带状态患者（免疫耐受期）短期内抗病毒治疗疗效欠佳,但抗病毒治疗可使该类患者血清HBV DNA水平降低,但是否可以降低肝硬化、肝癌发生风险需要进一步探讨。3、HBsAg或pgRNA基线水平越低,肝功能正常的慢性HBV感染者越易发生病毒学应答。
吴耀波[7]（2021）在《应用血清HBV RNA预测核苷（酸）类似物抗病毒治疗应答》文中研究指明一、研究背景核苷（酸）类似物（nucleos（t）ide analogues,NAs）已广泛用于治疗慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者。部分患者在治疗过程中会取得血清学应答包括发生乙肝e抗原（hepatitis B e antigen,HBeAg）转阴或血清学转换、乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）转阴或血清学转换。取得这些血清学应答的患者可以有条件的选择停药,但停药后仍有复发的风险。既往研究发现了一批预测血清学应答和停药复发的生物标志物,但预测效果仍不满意,需要继续探索新的指标。二、研究目的1.探索HBV RNA预测恩替卡韦（entecavir,ETV）治疗过程中HBeAg转阴的价值。2.探索HBV RNA预测NAs停药复发的价值。3.探索 HBV RNA 联合乙肝核心相关抗原（hepatitis B core-related antigen,HBcrAg）是否能提高预测停药复发的效能。三、研究方法1.病历来源（1）治疗队列纳入78例HBeAg阳性初治患者,ETV治疗随访2年。（2）真实世界单中心前瞻性停药研究纳入135例满足亚太肝病学会NAs停药标准的患者,停药随访6年。（3）评价队列来源于一项多中心前瞻性停药研究,纳入127例满足亚太肝病学会NAs停药标准的患者,停药前主要使用替比夫定治疗;验证队列来源于真实世界单中心前瞻性停药队列中的59例患者,停药前使用ETV或替诺福韦酯治疗。两个队列的停药随访时间均为4年。2.诊断标准2012年版亚太肝病学会乙肝指南的NAs停药标准:（1）HBeAg阳性患者发生HBeAg血清学转换和HBV DNA阴性后维持应答1年以上;（2）HBeAg阴性患者每半年检测HBV DNA,连续3次检测阴性且总的治疗疗程2年以上。单纯血清HBeAg消失,称为HBeAg转阴,如伴有乙肝e抗体,则为HBeAg血清学转换。临床复发:HBV DNA水平升高超过2,000 IU/mL和谷丙转氨酶升高超过2倍正常值上限;四、研究结果ETV治疗6个月时HBV DNA和HBV RNA水平能够预测治疗2年时的HBeAg转阴,HBV DNA、DT-RNA和S-RNA的曲线下面积分别为0.721、0.848 和 0.838。在真实世界单中心前瞻性停药研究中,停药6年累积临床复发率为48.3%,停药时HBV RNA水平是预测临床复发的独立危险因素（风险比1.34;p<0.001）,按照停药时HBV RNA水平分组,<1,000 copies/ml组的第6年临床复发累积发生率较低（24%）,第6年HBsAg转阴累积发生率较高（30.9%）。验证队列和评价队列均证明停药时HBV RNA和HBcrAg水平是临床复发的独立预测因素,两个指标联合使用将提高预测效能。根据停药时HBVRNA和HBcrAg进行分组,当HBV RNA阴性且HBcrAg<4 log10 U/mL,停药4年累积临床复发率在两个队列中均为0%,而HBV RNA阳性且HBcrAg ≥4 log10 U/mL,对应发生率在两个队列中分别为46.8%和69.4%。当两个队列合并分析时,停药时HBV RNA阴性且HBcrAg<4 log10 U/mL的患者累积HBsAg转阴率可达16.1%。五、研究结论HBV RNA能预测ETV治疗过程中HBeAg转阴。HBV RNA能预测NAs停药后临床复发,联合HBcrAg将提高预测效能,可指导临床降低停药后复发率。
李茂仕[8]（2021）在《血清HBV RNA在慢性HBV感染者病情评估和耐药监测中的应用》文中认为背景及目的:慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球性的公共卫生问题,肝细胞内的共价闭合环状DNA（ccc DNA）是HBV难以彻底清除进而引起不同临床结局的根本原因,但因检测需依赖肝活检而难以临床普及;虽然外周血中无法直接检测ccc DNA,但可通过其他血清指标来反映ccc DNA的变化。目前,核苷（酸）类似物（NAs）是主要的抗HBV治疗手段,但并不能直接清除ccc DNA,绝大部分的慢性HBV感染者均需长期用药。尽管高耐药屏障NAs使用后发生耐药的几率较前大为减少,但因HBV突变的必然性和复杂性,耐药株的出现实际上是NAs长期治疗不可避免的临床问题。不同于乙型肝炎表面抗原（HBs Ag）和HBV DNA,HBV RNA仅由ccc DNA转录产生且不受NAs治疗的影响,可较为真实反映肝内ccc DNA的表达情况。然而,HBV RNA检测尚无公认的标准化检测方法,其在慢性HBV感染者病情评估以及在NAs治疗耐药监测中的临床价值尚缺乏针对性研究。我们首先使用微滴数字PCR（dd PCR）技术建立了定量检测血清HBV RNA的方法,并使用商业化的实时荧光定量PCR方法进行对比评估以确保检测结果的准确性。然后我们观察了未治的慢性HBV感染者不同临床表型的血清HBV RNA水平,并追踪分析了恩替卡韦初治但在随访过程中发生了基因型耐药（GR）和部分病毒学应答（PVR）患者血清HBV RNA的动力学特征以及耐药突变情况,以期为血清HBV RNA应用于慢性HBV感染者病情评估以及监测耐药突变提供新的依据。方法:1.获取治疗和未治疗的慢性HBV感染者的血清各32例,平行使用dd PCR和商品化的q PCR方法检测血清HBV RNA水平,使用直线回归分析和Bland-Altman分析两种方法的相关性和一致性;以1例高浓度的HBV RNA样本进行梯度稀释,两种检测方法平行进行测定,每个梯度重复5次以明确两种方法的重复性,敏感性。2.根据常见临床指标将149例未治的慢性HBV感染者分为HBe Ag阳性伴ALT正常（EPNA）、HBe Ag阳性伴ALT升高（EPEA）、HBe Ag阴性伴ALT正常（ENNA）、HBe Ag阳性伴ALT升高（ENEA）等4种临床表型。使用q PCR法检测血清HBV RNA水平并在血清HBV DNA或/和HBV RNA阴性的患者中实施肝活检。使用单因素logistics回归分析探讨HBe Ag阴性患者中与ALT升高相关的危险因素。3.以31例HBe Ag阴性、HBV DNA阳性、ALT正常或者轻度异常（<2倍正常参考值上限,ULN）的未治慢性HBV感染者为研究对象,检测其血清HBV RNA水平,肝活检Scheuer评分系统对肝脏炎症评分（G）≥2判定为显着性肝炎,以受试者工作曲线（ROC）探讨血清HBV RNA水平在鉴别显着性肝炎中的价值。4.在我院肝炎数据库中筛选出5例ETV初治的慢性乙型肝炎（CHB）患者,其中包含了在持续抗病毒治疗过程中被检出GR的患者3例以及未检出耐药的PVR患者2例。耐药突变的信息是采用一代测序针对血清HBV DNA检测得到。调取生物样本库中该患者从初治到随访终点之间的血清样本,以dd PCR方法检测血清HBV RNA水平,观察其与HBs Ag、HBV DNA动态变化的特征,并使用三代测序技术（TGS）对部分随访点的血清HBV RNA的反转录区进行耐药突变的长期监测。结果1.两种血清HBV RNA检测方法在未治疗组和治疗组中的直线回归系数（R2）分别为0.912和0.874,95%一致性界限分别为（-1.430,1.506）和（-1.533,1.648）。梯度稀释实验显示dd PCR法和商品化的q PCR法在血清HBV RNA≥2.0 log10 copies/m L时检出率均为100%,CV值分别介于2.29%～10.8%和3.11%～7.33%;但在血清HBV RNA<2.0 log10 copies/m L时,随着梯度稀释倍数的增加,检出率逐渐下降,最低检测下限（LLo D）分别约为61 copies/m L和15 copies/m L。dd PCR法和商品化的q PCR法在HBV RNA可测结果和稀释倍数之间存在显着性线性相关,R2分别为0.895和0.938,P<0.0001。2.EPNA、EPEA、ENNA和ENEA四种临床表型的可测血清HBV RNA水平(log10copies/m L)分别为6.02±1.48、6.54±1.27、2.51±0.78和3.54±1.25。HBV RNA低水平(<2.0 log10 copies/m L)中以ENNA表型为主（76.9%）,高水平(>6.0 log10 copies/m L)中以HBe Ag阳性表型（EPNA和EPEA）为主（98.1%）。在EPNA、EPEA和ENEA中,血清HBV RNA与血清HBV DNA显着正相关,相关系数（r）分别为0.868(P=9.480×10-9)、0.687(P=2.621×10-8)、0.769(P=6.686×10-9),但在ENNA表型中,两者没有显着性相关关系（r=0.324,P=0.075）。在EPNA、EPEA表型中,血清HBV RNA与HBs Ag呈现显着正相关,相关系数分别为0.777(P=2.999×10-6)和0.637(P=4.993×10-7),但在HBe Ag阴性表型中则无此显着相关性。血清HBV DNA和HBV RNA水平均是与HBe Ag阴性患者ALT升高相关的独立危险因素,比值比（OR）分别为2.650（1.640～4.282）,P=6.823×10-5和2.570（1.541～4.286）,P=2.971×10-4。血清HBs Ag水平则处于接近于显着性的状态（P=0.053）。7例血清HBV DNA阴性,但RNA阳性的患者肝组织活检均显示为中度或重度肝脏炎症（G≥2）。3.血清HBV RNA水平具有鉴别HBe Ag阴性、DNA阳性、ALT正常或者轻度异常（<2×ULN）患者显着性肝炎的能力,受试者工作曲线下面积（AUC）为0.737（0.549,0.925）,P=0.029,而HBV DNA则不具有这种能力（P=0.248）。根据最大优登指数得出HBV RNA用于鉴别肝脏显着性炎症的最佳截断值为2.81 log10 copies/m L,此时敏感度73.7%,特异度66.7%,准确度71.0%。4.患者GR1、GR2和GR3分别在其抗病毒治疗第208、186及142周时检测出了耐药突变,在这时间点之前,3例患者血清HBV RNA持续>4.0 log10 copies/m L。2例PVR患者在我们观测的抗病毒治疗期间HBV RNA持续>6.0 log10 copies/m L。患者GR1和GR2在换用或者加用TDF之后,血清HBV RNA水平分别在此之后的26、22周时下降了1.63 log10和2.58 log10,HBV DNA水平则分别从4.40 log10和3.44 log10均降至LLo D,而HBs Ag则几乎没有变化(分别上升0.03log10和下降0.02log10)。3例GR患者和2例PVR患者的血清HBV RNA的RT区耐药位点突变结果与HBV DNA的耐药位点检测结果是一致的。利用三代测序技术对HBV RNA RT区长期监测发现,患者GR1和GR3在耐药发生之前没有观测到常见耐药位点的突变,而GR2患者则从初治开始就具备rt L180M+M204I突变。结论:1.我们使用dd PCR建立的方法和q PCR方法均是可靠的血清HBV RNA定量检测方法,低浓度血清样本的检出是困难的,但可以增加重复检测次数来改善;2.血清HBV RNA在不同临床表型中的水平存在差异,提示血清HBV RNA可以用于未治慢性HBV感染者病情的评估。血清HBV RNA与血清HBV DNA均是未治HBe Ag阴性患者ALT升高的独立危险因素,因此在血清HBV DNA阴性患者中检测HBV RNA是必要的,血清HBV RNA可补充HBV DNA用于反映肝脏炎症;3.在未经治疗的正常或者轻度ALT异常（ALT<2×ULN）的HBe Ag阴性患者中,血清HBV RNA可以用来判定肝脏炎症程度但HBV DNA不具备这样的能力,因此这部分患者可通过血清HBV RNA水平作为启动抗病毒治疗的依据;4.血清HBV RNA水平以及利用HBV RNA测序分析适合用于长期监测慢性乙型肝炎患者NAs抗病毒疗效和基因耐药突变的发生。总之,血清HBV RNA作为一个病毒学指标,可在血清HBV DNA阴性或者ALT<2×ULN的未治HBe Ag阴性患者中用于肝脏炎症的评估;血清HBV RNA也适合用于持续NAs治疗患者抗病毒疗效的评估以及耐药突变的长期监测,进而帮助临床医师为患者制定个体化管理和治疗策略提供参考依据。
张玉容[9]（2021）在《慢性乙型肝炎患者低病毒血症状况研究》文中进行了进一步梳理目的通过横断面调查,了解就诊我院经非高敏HBV DNA检测（检测下限1000IU/m L）阴性的慢性乙型肝炎患者中,采用高敏HBV DNA检测（检测下限10IU/m L）实际上仍存在低病毒血症（HBV DNA:10-999IU/m L）的人群比例,分析低病毒血症（LLV）组与完全病毒学应答（CVR）组（HBV DNA<10IU/m L）在临床特征及实验室指标等方面的差异性,探讨影响低病毒血症的相关因素。方法以2020年8月-2021年2月就诊福建省立医院行非高敏HBV DNA检测（检测下限1000IU/m L）阴性的慢性乙型肝炎患者为研究对象。收集其性别、年龄、BMI、饮酒史、脂肪肝、糖尿病病史等基本信息,是否肝硬化、既往或目前NAs类药物用药情况及抗病毒治疗时长等临床信息,以及HBe Ag、ALT、AST、ALB、TBi L、GGT、ALP、AFP等血清生化学指标。采用雅培Real Time HBV检测试剂盒（检测下限10IU/m L）行高敏HBV DNA定量检测。应用瞬时弹性成像技术（Fibroscan设备）行肝脏硬度测定（LSMs）。根据高敏HBV DNA定量检测结果分为LLV组和CVR组两组,以及HBV DNA<10IU/m L、10-99IU/m L、100-999IU/m L三组。分析组间上述基本特征、临床特征、血清生化学指标以及肝脏硬度值的统计学意义,采用Logistic回归分析低病毒血症的影响因素。结果1.共纳入86例慢性乙型肝炎患者,男性61例（70.9%）,女性25例（29.1%）,平均年龄（45.7±12.5）岁,其中35例（40.7%）存在低病毒血症。即使在接受一线NAs的初治患者中,仍有30.6%（19/62）HBV DNA低水平复制。2.LLV组和CVR组在性别、年龄、BMI、饮酒、脂肪肝、糖尿病等方面差异均无统计学意义（P>0.05）。3.LLV组HBe Ag阳性率高于CVR组（42.9%比11.8%,P<0.05）,两组间肝硬化差异无统计学意义（P=0.059）。接受非一线NAs治疗的5例患者均存在低病毒血症。在接受一线NAs治疗的62例患者中,LLV组和CVR组是否经治（既往接受非一线NAs治疗）差异有统计学意义（P<0.05）。4.LLV组ALT水平为（32.09±15.70）U/L,CVR组为（24.54±14.73）U/L,两组之间差异有统计学意义（P<0.05）,但当对HBV DNA载量分层后,仅HBV DNA<10IU/m L和100-999IU/m L组间ALT水平差异有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线分析显示,ALT<23U/L是判断HBV DNA<10IU/m L的最敏感值。LLV组与CVR组间AST、ALB、TBi L、GGT、ALP、AFP等指标差异均无统计学意义（P>0.05）。5.无论是在肝硬化患者还是非肝硬化患者中,LLV组和CVR组间LSMs差异均无统计学意义（P>0.05）。6.单因素分析显示,HBe Ag阳性、既往或目前使用非一线NAs类抗病毒药、抗病毒治疗时长与低病毒血症有关,年龄、肝硬化关联较小。而在校正后的多因素分析中,HBe Ag阳性（OR 9.00,P=0.001）和既往或目前使用非一线NAs类抗病毒药（OR 7.38,P=0.001）与低病毒血症明显相关,抗病毒治疗时长>3年（OR0.21,P=0.048）呈边缘相关。结论无论接受一线或非一线NAs抗病毒治疗,仍有30.6%-40.7%慢性乙型肝炎患者存在低病毒血症。持续低病毒血症可导致肝脏轻度炎症,ALT<23U/L是判断HBV DNA<10IU/m L最敏感值,但不能仅依靠ALT水平判断HBV DNA载量。HBe Ag阳性和非一线NAs类药物用药史是低病毒血症的独立危险因素。延长抗病毒治疗时长>3年可观察到实现完全病毒学应答。
黄志琴[10]（2021）在《乙肝感染孕产妇e抗原与病毒水平及抗病毒治疗对妊娠结局的影响》文中研究说明目的研究乙肝感染孕产妇不同乙肝e抗原（Hepatitis B virus e Antigen,HBe Ag）状态和不同乙肝病毒脱氧核糖核酸（Hepatitis B virus deoxyribonucleic acid,HBV DNA）水平以及孕期是否抗病毒治疗对妊娠结局的影响,探讨HBe Ag状态与HBV DNA水平相关性,为临床实施综合性预防乙肝母婴传播干预策略提供依据。方法收集2019年01月至2020年12月在广东省妇幼保健院产检并住院分娩的乙肝感染孕产妇共2735例,根据入选和排除标准,共有1609例乙肝感染孕产妇及其新生儿纳入本研究。依据孕产妇乙肝两对半中血清HBe Ag状态,分为HBe Ag阴性组（n=1199）和HBe Ag阳性组（n=410）。在410例HBe Ag阳性孕妇中,依据HBV DNA水平,将HBV DNA<2×105IU/ml分为低病载组（n=64）,HBV DNA≥2×105IU/ml分为高病载组（n=346）;依据孕期是否服用富马酸替诺福韦二吡呋酯（Tenofovir disoproxil fumarate,TDF）抗病毒治疗,分为治疗组（n=292）和对照组（n=118）。收集并记录孕产妇基本临床资料、妊娠期相关检验结果、妊娠期并发症和新生儿结局等相关病例资料。运用SPSS 26.0软件和Empower Stats软件对不同分组的各项指标进行统计分析,比较分析对妊娠结局的影响。结果1.乙肝感染孕产妇不同HBe Ag状态对妊娠结局的影响比较HBe Ag阳性组与阴性组孕产妇的基本临床资料,两组孕产妇比较年龄、体重指数（Body mass index,BMI）、孕次、产次、分娩方式、剖宫产史和孕期抗病毒治疗等均具有统计学差异（P<0.05）。单因素分析发现,HBe Ag阳性组孕产妇妊娠期肝内胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP）发生率高于HBe Ag阴性组（5.37%vs.3.09%,P<0.05）。多因素分析仍提示HBe Ag阳性是ICP的危险因素（OR=1.89,95%CI1.07～3.35）。HBe Ag阳性组新生儿出生体重均值小于阴性组（3.13±0.43 vs.3.20±0.45,P<0.05）,两组比较其他新生儿结局均无统计学差异（P>0.05）。HBe Ag阳性组孕产妇谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase,ALT）异常率高于阴性组（14.39%vs.5.92%）,谷草转氨酶（Aspartate aminotransferase,AST）异常率高于HBe Ag阴性组（9.02%vs.2.92%）,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。HBe Ag阳性组乙肝感染孕产妇孕中期检测HBV DNA载量均值高于阴性组(7.01±1.76log10IU/ml vs.2.53±0.98log10IU/ml),HBe Ag阳性组在HBV DNA高载量（≥2×105IU/ml）水平占比高于阴性组（84.39%vs.2.75%）,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。2.HBe Ag阳性乙肝感染孕产妇不同HBV DNA水平对妊娠结局的影响比较低病载组和高病载组孕产妇的基本临床资料无统计学差异（P>0.05）。低病载组孕产妇妊娠期高血压疾病（Hypertensive disorders of pregnancy,HDP）发生率高于高病载组（9.38%vs.3.18%,P<0.05）。高病载组孕妇中抗病毒治疗比例高于低病载组（77.46%vs.37.50%）,调整孕妇抗病毒治疗等相关变量后分析,显示HBV DNA载量与HBe Ag阳性孕产妇的妊娠结局无统计学关联。比较低病载组与高病载组的新生儿结局均无统计学差异（P>0.05）。高病载组孕产妇检测ALT异常率、AST异常率均高于低病载组,两组比较有统计学差异（P<0.05）。3.HBe Ag阳性乙肝感染孕产妇抗病毒治疗对妊娠结局的影响比较治疗组和对照组孕产妇的基本临床资料无统计学差异（P>0.05）。治疗组的HDP发生率低于对照组（2.74%vs.7.63%,P<0.05）,多因素分析中仍提示抗病毒治疗是HDP的保护因素,抗病毒治疗与HDP风险降低具有统计学关联（OR=0.28,95%CI0.08～0.93）。治疗组与对照组比较,并未增加其他妊娠期并发症和新生儿不良结局风险。比较两组分娩前检测HBV DNA载量,治疗组HBV DNA水平低于对照组,且治疗组的HBV DNA下降水平大于对照组,两组比较具有统计学差异（P<0.05）。对治疗组检验指标进行组内配对t检验,比较治疗前后肝肾功能,孕产妇治疗后ALT、TBA水平较治疗前下降,且治疗后ALT异常率、AST异常率均低于治疗前,治疗后血清肌酐（creatinine,Cr）、尿素（Urea）、尿酸（uric acid,UA）水平均较治疗前上升,治疗后UA异常率高于治疗前,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论1.HBe Ag阳性会增加乙肝感染孕妇ICP发生风险,HBe Ag阳性对孕期ICP的发生有一定预测作用。2.HBe Ag可在一定程度上反映HBV DNA复制水平,尤其是高病毒载量水平,在检测技术有限的基层医院,可通过HBe Ag检测来初步判断HBV复制情况和母婴传播风险,协助评估孕期抗病毒治疗指征。3.孕期TDF抗病毒治疗可降低乙肝感染孕产妇发生HDP的风险,母婴安全性良好,此外,孕期服用TDF抗病毒治疗不仅可显着降低HBV DNA载量,还可改善孕期肝功能。
二、HBV DNA检测方法研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、HBV DNA检测方法研究进展（论文提纲范文）
（1）慢性乙肝抗病毒治疗过程中低病毒血症对病毒学与肝脏获益的影响（论文提纲范文）
| 1 低病毒血症发生的影响因素 |
| 2 LLV与临床结局 |
| 2.1 与乙肝抗病毒治疗患者的耐药发生相关 |
| 2.2 与肝纤维化进展相关 |
| 2.3 与肝癌发生相关 |
| 2.4 降低肝癌生存率相关 |
| 3 治疗 |
| 4 讨论与总结 |
（2）核苷(酸)类似物经治的慢性乙型肝炎患者低病毒血症的研究现状（论文提纲范文）
| 1 LLV的定义 |
| 2 NAs治疗下的LLV发生率 |
| 3 LLV对CHB患者预后的影响:不利于肝纤维化逆转，肝硬化患者HCC发病风险显着增加 |
| 4 LLV发生的可能机制 |
| 4.1 NAs竞争性抑制作用的局限性 |
| 4.2 不活跃的肝细胞增殖使ccc DNA不能被有效稀释 |
| 5 与LLV诊断相关的检验方法学 |
| 6 LLV临床管理策略 |
| 7 总结 |
（3）激活免疫检查点OX40对HBV复制的影响及相关机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 慢性HBV感染的自然史 |
| 1.2 慢性HBV感染的免疫应答 |
| 1.2.1 慢性HBV感染中固有免疫反应 |
| 1.2.2 慢性HBV感染中适应性免疫反应 |
| 1.3 慢性乙型肝炎免疫治疗进展 |
| 1.3.1 靶向固有免疫的治疗策略 |
| 1.3.2 靶向适应性免疫的治疗策略 |
| 1.3.3 其它免疫治疗策略 |
| 1.4 免疫检查点OX40/OX40L、PD-1、4-1BB研究现状 |
| 1.4.1 OX40/OX40L相关研究进展 |
| 1.4.2 PD-1 相关研究进展 |
| 1.4.3 4-1BB相关研究进展 |
| 第2章 OX40/OX40L及其可溶性分子在慢性乙肝患者中的表达及临床意义 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 人的样本来源 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 外周血采集及血浆分离与保存 |
| 2.2.2 外周血单个核细胞提取 |
| 2.2.3 流式细胞术检测PBMCs中OX40/OX40L的表达 |
| 2.2.4 免疫组化检测肝组织内OX40/OX40L的表达 |
| 2.2.5 酶联免疫吸附试验检测血浆中sOX40/OX40L水平 |
| 2.2.6 统计处理方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 研究对象人口学资料及临床特征 |
| 2.3.2 慢性乙肝患者中OX40/OX40L及其可溶性分子的表达 |
| 2.3.3 慢性乙肝患者中OX40/OX40L及其可溶性分子的水平与临床的相关性研究 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 PD-1、4-1BB分子及其可溶性形式在慢性乙肝患者中的表达及临床意义 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 人的样本来源 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 复苏外周血单个核细胞和准备血浆 |
| 3.2.2 磁珠分选人外周血T细胞亚群 |
| 3.2.3 PBMCs中总RNA的提取 |
| 3.2.4 qRT-PCR检测PBMCs中PD-1和4-1BB mRNA水平 |
| 3.2.5 酶联免疫吸附试验检测血浆sPD-1和s4-1BB |
| 3.2.6 免疫组化检测肝脏内PD-1和4-1BB的表达 |
| 3.2.7 统计处理方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 研究对象人口学资料及临床特征 |
| 3.3.2 慢性乙肝患者中PD-1及其可溶性形式在慢性乙肝患者中的表达与临床相关性研究 |
| 3.3.3 慢性乙肝患者中4-1BB及其可溶性形式在慢性乙肝患者中的表达与临床相关性研究 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第4章 rAAV8/1.3HBV小鼠模型的构建及在HBV小鼠模型中激活免疫检查点OX40对HBV复制的影响的相关研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验动物和r AAV8/1.3HBV病毒 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 建立经尾静脉注射腺相关病毒的HBV模型 |
| 4.2.2 检测小鼠血清内HBsAg、HBe Ag水平 |
| 4.2.3 小鼠肝脏灌流分离肝内浸润淋巴细胞 |
| 4.2.4 小鼠肝脏组织全基因组DNA提取 |
| 4.2.5 qRT-PCR法检测小鼠HBV DNA定量 |
| 4.2.6 流式细胞术检测小鼠肝内T细胞亚群比例 |
| 4.2.7 CBA法检测小鼠血清内细胞因子 |
| 4.2.8 检测小鼠血清ALT,AST水平 |
| 4.2.9 处理小鼠肝脏组织和制备切片 |
| 4.2.10 小鼠肝脏组织HE染色 |
| 4.2.11 免疫组化检测小鼠肝组织内HBsAg和HBcAg |
| 4.2.12 数据统计处理 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 rAAV8/1.3 HBV小鼠模型的构建 |
| 4.3.2 激活免疫检查点OX40抑制HBV复制同时伴随着肝脏炎症的产生 |
| 4.3.3 激活免疫检查点OX40抑制HBV复制的同时伴随着T细胞亚群比例及免疫细胞因子的变化 |
| 4.3.4 激活免疫检查点OX40抑制HBV复制具有药物剂量依赖性 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第5章 激活免疫检查点OX40抑制HBV复制相关机制的初步研究 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 实验动物 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 主要仪器 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 小鼠体内CD4~+和CD8~+T细胞的剔除 |
| 5.2.2 流式细胞术检测小鼠外周血的T细胞 |
| 5.2.3 小鼠血清HBsAg和肝脏组织内HBV DNA的检测 |
| 5.2.4 小鼠血清ALT水平检测 |
| 5.2.5 小鼠肝脏灌流分离肝内浸润淋巴细胞 |
| 5.2.6 小鼠肝脏内淋巴细胞mRNA的提取及文库构建测序 |
| 5.2.7 数据统计处理 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 CD4~+T和CD8~+T 细胞缺陷的rAAV8/1.3HBV小鼠模型的构建 |
| 5.3.2 激活OX40靶点抑制HBV复制的过程相对于CD4~+ T细胞似乎更依赖于CD8~+ T细胞的作用 |
| 5.3.3 激活OX40靶点抑制HBV复制的过程中基于mRNA测序的小鼠肝内浸润淋巴细胞的转录组学研究 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及科研成果 |
| 致谢 |
（4）慢性HBV感染患者外周血T淋巴细胞亚群变化特征及临床意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 前言 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 研究对象、纳入及排除标准 |
| 2.1.1 纳入标准 |
| 2.1.2 排除标准 |
| 2.1.3 免疫状态分期 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 观察指标 |
| 2.2.2 标本收集 |
| 2.2.3 T淋巴细胞亚群检测方法 |
| 2.2.4 乙肝五项定量检测方法 |
| 2.2.5 生化指标检测方法 |
| 2.2.6 HBV-DNA检测方法 |
| 2.3 统计学分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 研究对象的基本临床资料 |
| 3.1.1 不同免疫状态下HBV感染患者外周血T淋巴细胞亚群水平特征 |
| 3.1.2 T淋巴细胞亚群对免疫状态的评估效能 |
| 3.2 HBV-DNA载量对外周血T淋巴细胞亚群水平影响 |
| 3.3 不同HBsAg定量水平下HBV感染患者外周血T淋巴细胞亚群分布特点 |
| 3.4 T淋巴细胞亚群与各临床指标之间的相关性分析 |
| 3.5 T淋巴细胞亚群对打破免疫耐受的评估效能 |
| 3.6 T淋巴细胞亚群对发生e抗原血清学转换的评估效能 |
| 3.7 抗病毒治疗对HBV感染患者T淋巴细胞亚群的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 展望与不足 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 CD8+T淋巴细胞与HBV感染关系的研究进展 |
| 参考文献 |
（5）恩替卡韦应答不佳慢乙肝患者转换为富马酸丙酚替诺福韦临床疗效与安全性分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 综述 |
| 2.1 HBV的概述 |
| 2.1.1 HBV的结构及基因分型 |
| 2.1.2 HBV的生命周期 |
| 2.1.3 HBV的发病机制 |
| 2.1.4 抗HBV治疗 |
| 2.2 ETV概述 |
| 2.2.1 ETV抗病毒治疗 |
| 2.2.2 ETV耐药 |
| 2.2.3 ETV应答不佳 |
| 2.3 ETV耐药或应答不佳挽救治疗 |
| 2.3.1 转换或联合TDF |
| 2.3.2 转换或联合TAF |
| 2.3.3 联合干扰素 |
| 2.4 总结 |
| 第3章 临床资料与方法 |
| 3.1 研究对象 |
| 3.2 研究分组 |
| 3.3 抗病毒治疗方法 |
| 3.4 观察指标 |
| 3.5 观察疗效评价 |
| 3.6 统计学分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 研究对象一般资料 |
| 4.2 ETV应答不佳CHB患者转换为TAF过程中HBVDNA变化情况 |
| 4.2.1 全部患者治疗前后HBV DNA水平变化情况 |
| 4.2.2 基线HBV DNA不同的患者继续ETV治疗过程中HBV DNA下降率对比 |
| 4.2.3 基线HBV DNA不同的患者转换TAF治疗过程中HBV DNA下降率对比 |
| 4.2.5 基线HBV DNA≥1000IU/ml的患者治疗过程中HBV DNA下降率对比 |
| 4.2.6 HBeAg阴性的患者治疗过程中HBV DNA下降率对比 |
| 4.2.7 HBeAg阳性的患者治疗过程中HBV DNA下降率对比 |
| 4.3 ETV应答不佳CHB患者转换为TAF治疗病毒学应答情况 |
| 4.3.1 全部患者治疗过程中病毒学应答情况 |
| 4.3.2 基线HBV DNA不同的患者继续ETV治疗过程中病毒学应答对比 |
| 4.3.3 基线HBVDNA不同的患者转换TAF治疗过程中病毒学应答对比 |
| 4.3.5 基线HBVDNA≥1000IU/ml的患者治疗过程病毒学应答对比 |
| 4.3.6 HBeAg阴性患者治疗过程中病毒学应答对比 |
| 4.3.7 HBeAg阳性患者治疗过程中病毒学应答对比 |
| 4.4 ETV应答不佳CHB患者HBsAg、HBeAg水平变化情况 |
| 4.5 ETV应答不佳CHB患者肝硬度值变化情况 |
| 4.6 ETV应答不佳CHB患者肝功能变化及异常ALT复常情况 |
| 4.6.1 肝功能变化情况 |
| 4.6.2 ALT转复率情况 |
| 4.7 ETV应答不佳CHB患者病毒学突破以及不良反应 |
| 第5章 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（6）肝功能正常的慢性HBV感染患者的抗病毒治疗疗效研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 非活动性HBsAg携带状态患者抗病毒治疗疗效观察 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准和排除标准 |
| 1.3 治疗方法 |
| 1.4 观察指标 |
| 1.5 疗效评估 |
| 1.6 检测方法 |
| 1.7 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般资料与基线特征 |
| 2.2 病毒学应答率 |
| 2.3 血清学转换率、病毒学突破率 |
| 2.4 不良事件及药物副反应发生率 |
| 第二部分 慢性乙肝病毒携带状态患者(免疫耐受期)的抗病毒治疗疗效观察 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准和排除标准 |
| 1.3 治疗方法 |
| 1.4 观察指标 |
| 1.5 疗效评估 |
| 1.6 检测方法 |
| 1.7 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般资料与基线特征 |
| 2.2 HBV DNA与病毒学应答率 |
| 2.3 血清学应答率、病毒学突破率 |
| 2.4 不良事件及药物相关副反应发生率 |
| 第三部分 探索影响肝功能正常的慢性HBV感染者抗病毒疗效的可能因素 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准和排除标准 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 相关定义 |
| 1.5 检测方法 |
| 1.6 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 讨论 |
| 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 展望与不足 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 肝功能正常、HBV DNA阳性的慢性HBV感染患者的研究进展 |
| 参考文献 |
（7）应用血清HBV RNA预测核苷（酸）类似物抗病毒治疗应答（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 研究背景 |
| 1.1 HBVRNA概述 |
| 1.1.1 HBV RNA病毒学概述 |
| 1.1.2 HBV RNA在临床中的应用 |
| 1.2 抗HBV治疗概述 |
| 1.2.1 已纳入临床治疗指南的抗HBV药物 |
| 1.2.2 目前处于研发阶段的抗HBV新药 |
| 1.3 抗HBV停药概述 |
| 1.4 本研究目的与意义 |
| 第二章 血清HBV RNA预测恩替卡韦治疗过程中的HBeAg血清学转阴 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 研究的定义和主要观察终点 |
| 2.2.3 临床和实验室检测 |
| 2.2.4 血清HBV RNA提取 |
| 2.2.5 HBV RNA标准品制备 |
| 2.2.6 HBV RNA定量检测方法测定血清HBV RNA浓度 |
| 2.2.7 统计分析 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.3.1 患者临床特征 |
| 2.3.2 按HBeA血清学转阴分组比较HBV DNA、DT-RNA和S-RNA水平 |
| 2.3.3 DT-RNA、S-RNA和HBV DNA水平预测ETV治疗2年HBeAg血清学转阴 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 血清HBV RNA在预测核苷类药物停药复发中的作用 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 研究方法 |
| 3.2.1 停药队列的纳入排除标准 |
| 3.2.2 患者的随访管理 |
| 3.2.3 研究的终点 |
| 3.2.4 生化和实验室方法 |
| 3.2.5 血清HBV RNA提取 |
| 3.2.6 HBV RNA标准品制备 |
| 3.2.7 HBV RNA定量检测方法测定血清HBV RNA浓度 |
| 3.2.8 统计分析 |
| 3.3 研究结果 |
| 3.3.1 患者临床特征 |
| 3.3.2 停药6年的累积临床复发率、病毒学复发率和HBsAg转阴率 |
| 3.3.3 临床复发的相关因素 |
| 3.3.4 停药HBV RNA的动态变化及分组的累积发生率比较 |
| 3.3.5 血清HBV RNA与其他因素的相关性 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 血清HBV RNA联合HBcrAg提升预测核苷类药物停药复发的效能 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.2 研究方法 |
| 4.2.1 停药队列的纳入排除标准 |
| 4.2.2 研究的终点 |
| 4.2.3 生化和实验室方法 |
| 4.2.4 血清HBcrAg检测 |
| 4.2.5 血清HBV RNA提取 |
| 4.2.6 HBV RNA标准品制备 |
| 4.2.7 HBVRNA定量检测方法测定血清HBV RNA浓度 |
| 4.2.8 统计分析 |
| 4.3 研究结果 |
| 4.3.1 患者临床特征 |
| 4.3.2 评价队列中HBV RNA和HBcrAg预测临床复发的效能 |
| 4.3.3 评价队列中临床复发的预测因素 |
| 4.3.4 联合HBV RNA和HBcrAg预测评价队列的临床复发 |
| 4.3.5 联合HBV RNA和HBcrAg预测验证队列的临床复发 |
| 4.3.6 治疗结束时HBcrAg和HBV RNA水平与HBsAg转阴的相关性 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 全文总结 |
| 5.1 主要研究成果 |
| 5.2 主要结论 |
| 5.3 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 研究生期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（8）血清HBV RNA在慢性HBV感染者病情评估和耐药监测中的应用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 微滴数字PCR用于血清HBVRNA定量方法的建立及与实时荧光定量PCR方法的对比评价 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 血清HBV RNA在未治慢性HBV感染者中的分布特点及其临床意义 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 恩替卡韦耐药及部分病毒学应答患者血清HBV RNA动力学特征以及用于长期监测耐药突变的初步研究 |
| 4.1 研究对象和方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 全文总结与研究展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 慢性乙型肝炎血清学标志物研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
（9）慢性乙型肝炎患者低病毒血症状况研究（论文提纲范文）
| 附录 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 1 低病毒血症人群比例 |
| 2 LLV组和CVR组各方面特征统计学意义 |
| 2.1 LLV组和CVR组基本特征比较 |
| 2.2 LLV组和CVR组临床特征比较 |
| 2.3 LLV组和CVR组指标特征比较 |
| 2.4 LLV组和CVR组肝脏硬度值比较 |
| 3 低病毒血症的影响因素 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 低病毒载量的慢性乙型肝炎 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
（10）乙肝感染孕产妇e抗原与病毒水平及抗病毒治疗对妊娠结局的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.结论 |
| 5.不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 乙型肝炎病毒母婴传播机制及阻断技术的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
四、HBV DNA检测方法研究进展（论文参考文献）
- [1]慢性乙肝抗病毒治疗过程中低病毒血症对病毒学与肝脏获益的影响[J]. 邹铭南,蔡大川,任红. 川北医学院学报, 2021(09)
- [2]核苷(酸)类似物经治的慢性乙型肝炎患者低病毒血症的研究现状[J]. 鲁凤民,封波,郑素军,蒋素贞,杨瑞锋,福军亮,纪冬,党双锁,鲁晓擘,陈红松,陈新月,任红,高志良,南月敏,徐小元,俊奇,张文宏,庄辉. 临床肝胆病杂志, 2021(06)
- [3]激活免疫检查点OX40对HBV复制的影响及相关机制研究[D]. 湛梦茹. 吉林大学, 2021(01)
- [4]慢性HBV感染患者外周血T淋巴细胞亚群变化特征及临床意义[D]. 徐清浪. 南昌大学, 2021(01)
- [5]恩替卡韦应答不佳慢乙肝患者转换为富马酸丙酚替诺福韦临床疗效与安全性分析[D]. 王琰. 吉林大学, 2021(01)
- [6]肝功能正常的慢性HBV感染患者的抗病毒治疗疗效研究[D]. 李嫒. 南昌大学, 2021(01)
- [7]应用血清HBV RNA预测核苷（酸）类似物抗病毒治疗应答[D]. 吴耀波. 南方医科大学, 2021
- [8]血清HBV RNA在慢性HBV感染者病情评估和耐药监测中的应用[D]. 李茂仕. 中国人民解放军陆军军医大学, 2021(01)
- [9]慢性乙型肝炎患者低病毒血症状况研究[D]. 张玉容. 福建医科大学, 2021(02)
- [10]乙肝感染孕产妇e抗原与病毒水平及抗病毒治疗对妊娠结局的影响[D]. 黄志琴. 广州医科大学, 2021(02)