一、β-榄香烯诱导肝癌细胞凋亡效应及机制（论文文献综述）
王锦程[1]（2021）在《榄香烯改善经肝动脉灌注化疗栓塞术后患者介入栓塞综合征的疗效评估及机制探讨》文中指出目的:观察原发性肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）经肝动脉灌注化疗栓塞术（Transcatheter arterial chemoembolization,TACE）术后发热、恶心呕吐、肝区疼痛等症状的发生情况,研究榄香烯（Elemene,E）对TACE术后介入栓塞综合征（Postembolization syndrome,PES）的改善作用及相关机制。方法:本研究分为临床疗效评估及体外实验两部分构成。第一部分为临床疗效评估:（1）本研究使用回顾性分析,纳入2017年5月到2020年5月期间于西南医科大学附属医院肝胆外科收治的符合纳入标准的107例HCC患者。分为A、B两组,A组TACE术后使用榄香烯,B组TACE术后未使用榄香烯。其中2018年10月至2020年5月期间的患者67例,分为A组（该时间段榄香烯已在肝胆外科使用）;2017年5月到2018年10月期间收治患者40例,分为B组（该时间段榄香烯未在肝胆外科使用）;（2）分别记录各组患者性别、年龄等一般资料;（3）分别记录各组患者术后发热的发生率;（4）分别记录各组患者术后恶心呕吐的发生率;（5）分别记录各组患者术后肝区疼痛的发生率;（6）分别记录各组患者术后骨髓抑制发生率;（7）分别记录各组患者术后的住院时间。第二部分为体外实验:（1）体外培养HL-7702细胞,使用Cocl2诱导细胞建立缺氧损伤模型,设置空白对照组（A组）,β-榄香烯组（B组）,Cocl2组（C组）以及β-榄香烯+Cocl2组（D组）;（2）使用CCK-8法检测各组细胞活力;（3）通过试剂盒检测各组细胞丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）以及超氧化物歧化酶（SOD）含量;（4）使用DCFH-DA染色法检测各组细胞活性氧（ROS）含量;（5）使用Hoechst染色法检测各组细胞凋亡情况;（6）使用免疫印迹法检测各组中TLR4以及NF-κB P65蛋白表达水平。结果:临床疗效评估结果显示:（1）两组患者的一般特征无显着性差异;（2）榄香烯组有10名患者术后发生发热,发生率为14.93%,非榄香烯组有13名患者术后发生发热,发生率为32.50%。两组之间比较P值为0.032,榄香烯组发热发生率低于非榄香烯组,差异有统计学意义;（3）榄香烯组有10名患者术后发生恶心呕吐,发生率为14.93%,非榄香烯组有14名患者术后发生恶心呕吐,发生率为35.00%。两组之间比较P值为0.016。榄香烯组恶心呕吐发生率低于非榄香烯组,差异有统计学意义;（4）榄香烯组有26名患者术后发生肝区疼痛,发生率为38.81%,非榄香烯组有27名患者术后发生肝区疼痛,发生率为67.50%。两组之间比较P值为0.004,榄香烯组肝区疼痛发生率低于非榄香烯组,差异有统计学意义;（5）榄香烯组有3名患者术后发生骨髓抑制,发生率为4.48%,非榄香烯组有8名患者术后发生骨髓抑制,发生率为20.00%。两组之间比较P值为0.026,榄香烯组骨髓抑制发生率低于非榄香烯组,差异有统计学意义;（6）榄香烯组术后住院时间为4.25±2.22（day）,非榄香烯组术后住院时间为7.55±5.90（day）,两组之间比较P<0.01,差异有统计学意义。体外实验结果显示:（1）β-榄香烯浓度≥20μg/m L时,显着抑制HL-7702细胞（P<0.05）;（2）与空白对照组相比较,Cocl2浓度在300μmol/L及以上时,可明显降低HL-7702细胞活力（P<0.05）,将Cocl2300μmol/L浓度设为后续实验缺氧建模浓度;（3）Cocl2组对比空白对照组,Cocl2组细胞活力降低显着（P<0.05）,β-榄香烯+Cocl2组对比模型组,细胞活力得到提高（P<0.05）;（4）Cocl2组中MDA、LDH含量较空白对照组升高,SOD含量较空白对照组降低（P<0.05）,β-榄香烯+Cocl2组中MDA、LDH含量较Cocl2组降低,SOD含量较Cocl2组升高（P<0.05）;（5）β-榄香烯+Cocl2组中活性氧含量较Cocl2组降低（P<0.05）;（6）β-榄香烯+Cocl2组中细胞凋亡率较Cocl2组降低（P<0.05）;（7）β-榄香烯+Cocl2组中细胞形态损毁较Cocl2组降低;（8）β-榄香烯+Cocl2组中TLR4/NF-κB P65炎性通路蛋白的表达水平较Cocl2组降低（P<0.05）。结论:对于原发性肝癌患者,经肝动脉灌注化疗栓塞术后使用榄香烯能有效降低介入栓塞综合征的发生率,降低骨髓抑制发生率,缩短病人住院时间。其机制可能与抑制TLR4/NF-κB炎性信号通路激活、减轻氧化应激反应有关。
史亚博,陈婷婷[2]（2020）在《榄香烯在线粒体相关途径下抗肿瘤研究进展》文中指出线粒体作为生物体细胞代谢和信号转导途径的中心环节,在近年抗肿瘤药物研发及临床治疗领域备受关注。榄香烯是从草药温郁金、温莪术中提取的抗肿瘤活性成分,其作用机理及临床研究已近三十年,为更全面地了解其抗肿瘤机制,以线粒体途径视角,从榄香烯在线粒体途径下抗肿瘤效应为出发点,对近年来榄香烯相关研究进展进行总结,为进一步深度挖掘和应用榄香烯提供参考及新的研究思路。
王乔宇,赵志刚[3]（2020）在《榄香烯抗肿瘤作用机制研究进展》文中研究指明榄香烯是从传统中草药姜科植物温郁金中提取的萜烯类化合物。榄香烯乳注射液主要成份为β-、γ-、δ-榄香烯混合液,作为我国自主开发研制的抗肿瘤植物化学药于1995年被国家批准为2类抗肿瘤新药并成功上市。20多年的临床广泛应用使得人们在榄香烯的抗肿瘤研究方面积累了宝贵的经验。有关榄香烯基础研究方面的循证医学证据层出不穷,研究结果证实榄香烯具有抗瘤谱广、临床疗效确切、毒副作用小等特点。同时榄香烯不同于其他传统的细胞毒性化疗药物,在发挥直接抗肿瘤作用的基础上,还能通过多种机制起到逆转肿瘤细胞耐药、抑制转移、提高机体免疫力,与放化疗联用具有减毒增效等作用。对榄香烯乳注射液抗肿瘤作用机制进行综述。
朱亚玲[4]（2020）在《榄香烯注射液联合TACE对于原发性肝癌患者的疗效分析》文中进行了进一步梳理目的:探讨榄香烯注射液联合TACE对于原发性肝癌患者的生活质量、中医证候、肝肾功能、免疫功能、不良反应及肿瘤缓解率的影响。方法:选择中国人民解放军中部战区总医院2018年12月1日-2019年12月31日于我科住院的80例18岁至75岁原发性中晚期肝癌的患者,按随机原则分为实验组和对照组,术前常规检查生化指标及胸部CT。两组均采用改良Seldinger技术在右腹股沟区穿刺点局麻后,行右股动脉穿刺,将微导管超选导入靶血管,行血管内化疗栓塞,试验药品与给药:对照组:顺铂30mg50mg+5-Fu 8001000mg,再用碘化油6ml、适量明胶海绵颗粒栓塞。实验组:在对照组的基础上加用200mg榄香烯注射液灌注+术后400mg榄香烯注射液静滴1周。一次介入治疗为一个疗程,术前及术后一周检测生化指标,包括血常规、肝肾功能、肝癌肿瘤标志物AFP及CEA等,同时观察患者的生活质量、中医证候、不良反应等,每一疗程结束后3月复查一次,评价缓解情况等。所有数据采用SPSS21.0处理。结果:（1）生活质量治疗后,实验组较对照组卡氏评分明显提高（P<0.05）。（2）中医症状改善情况比较与对照组比较,实验组患者纳呆、神疲乏力症状改善显着（P<0.05）,恶心呕吐情况改善不明显（P>0.05）。（3）毒性反应治疗期间,实验组患者白细胞减少、血小板减少、肝功能损害的发生率低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）,两组血红蛋白减少、肾功能损害的发生率无明显差异（P>0.05）。（4）免疫功能:治疗后实验组CD3+T、CD4+T的比例均高于对照组（P<0.05）,而两组CD8+T比例无明显差异（P>0.05）。（5）肿瘤标志物:治疗后两组AFP、CEA无明显差异（P>0.05）。（6）不良反应:实验组发热、肝区疼痛、乏力等副作用的发生率低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。（7）肿瘤缓解率:实验组肿瘤缓解率较对照组高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:（1）榄香烯注射液联合TACE可以提高患者的生活质量,改善中医证候;（2）榄香烯注射液联合TACE可减缓骨髓抑制、肝功能损害的发生率,但肾功能损害方面无明显差异;（3）榄香烯注射液联合TACE可以减轻患者的疼痛、发热、乏力等介入的不良反应;（4）榄香烯注射液联合TACE可提高患者的免疫功能;（5）榄香烯注射液联合TACE可以提高肿瘤的缓解率。
杨斐[5]（2020）在《榄香烯联合一代EGFR-TKIs治疗晚期肺腺癌的协同增效研究》文中研究说明目的:近年来肺癌的发病率和死亡率显着增加,EGFR-TKIs治疗EGFR敏感突变的非小细胞肺癌具有较好的疗效。但最终由于EGFR-TKIs的耐药导致治疗失败。本研究拟通过真实世界研究方法,分析传统中药提取物榄香烯在第一代EGFR-TKIs联用中治疗晚期肺腺癌的协同增效作用,为晚期肺腺癌患者提供更多的治疗方法。方法:根据本研究入排标准,本研究纳入了2016年1月至2019年12月的113例晚期肺腺癌（IIIB-IV期）患者。所有患者根据真实世界研究肺癌治疗原则或者治疗规范,根据分子靶点检测结果采取相应的抗肿瘤治疗。患者根据治疗方法分为三组,分别为榄香烯联合EGFR-TKIs组、单用EGFR-TKIs组和常规化放疗组。患者根据临床规范治疗方案可能是一线、二线或以上治疗。收集患者人口学特征、治疗期间的近期疗效评估、生存分析、生活质量评分、不良反应等数据;采用Kaplan–Meier法分析三组的无进展生存期（PFS）。卡方检验或Fisher精确检验用于组间疗效及不良反应比较。使用单因素和多因素生存分析比较临床特征与生存时间的相关性。结果:纳入的合格病例中,榄香烯+EGFR-TKIs组34例,EGFR-TKIs组47例,化放疗组32例。榄香烯+EGFR-TKIs治疗组的ORR为41.2%,高于EGFR-TKIs组的29.8%（P=0.288）和化放疗组的28.1%（P=0.266）,差异均无统计学意义。榄香烯+EGFR-TKIs治疗组的DCR为94.1%,高于EGFR-TKIs组的78.7%,差异无统计学意义（P=0.054）。榄香烯+EGFR-TKIs治疗组的DCR高于化放疗组的59.4%,差异具有显着性（P=0.0008）。榄香烯+EGFR-TKIs组、单用EGFR-TKIs组和化放疗组的m PFS分别为14.0月,10.0月（P=0.037）和7.5月（P=0.002）;其中榄香烯+EGFR-TKIs组亚组中,患者年龄（P=0.279）、性别（P=0.432）、分期差异（P=0.197）对PFS无明显影响,KPS评分差异对PFS有明显影响（P=0.027）,KPS评分≥80分的患者预后较好。单因素和多因素分析提示KPS评分、吸烟史与晚期肺腺癌患者的PFS相关,KPS评分≥80分、无吸烟史的患者预后较好。吸烟患者中,榄香烯+EGFR-TKIs组的PFS较EGFR-TKIs组（P=0.029）和化放疗组（P=0.027）均显着延长。榄香烯+EGFR-TKIs组与EGFR-TKIs组相比,生活质量明显改善（P=0.047）;榄香烯+EGFR-TKIs组与化放疗组比较,生活质量明显改善（P=0.008）。安全性方面:三组患者均未出现Ⅳ度不良反应。EGFR-TKIs组的皮疹发生率显着高于榄香烯+EGFR-TKIs组（55.3%vs23.5%,P=0.034）。化放疗组的恶心呕吐发生率显着高于榄香烯+EGFR-TKIs组（56.3%vs8.8%,P=0.0005）和EGFR-TKIs组（56.3%vs12.8%,P=0.0004）。化放疗组的骨髓抑制发生率显着高于榄香烯+EGFR-TKIs组（53.1%vs14.7%,P=0.008）和EGFR-TKIs组（53.1%vs14.9%,P=0.002）。结论:1.榄香烯联合EGFR-TKIs治疗晚期肺腺癌患者的无进展生存期显着延长。2.榄香烯联合EGFR-TKIs治疗晚期肺腺癌可获得较高的疾病控制率。3.在晚期肺腺癌患者中,KPS评分和吸烟是独立的预后影响因素。4.榄香烯明显降低EGFR-TKIs的皮疹发生率,同时能明显提高患者的生存质量。5.以上结果均提示,对于EGFR突变的晚期肺腺癌患者,榄香烯联合EGFR-TKIs治疗具有潜在的协同增效作用,其作用机制及进一步的临床研究有待于进一步大规模的临床随机对照研究加以证实。
李艺[6]（2020）在《β-榄香烯对人乳腺癌MCF-7细胞株体内外生长的影响及机制研究》文中提出乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤,全世界每年有超过一百万的新发病例。该疾病在肺癌,肝癌,胃癌和结肠直肠癌之后排在第五位,且发病率随着年龄的增长而增加。根据肿瘤大小,肿瘤类型,肿瘤等级,淋巴结状态或激素受体状态,进行相应的治疗策略,如手术、靶向治疗、激素治疗、化学疗法、放射疗法或两者结合。实际上,这些治疗方法都会对健康组织造成不良损害。此外,许多因素也可能导致治疗失败,例如手术后残留的癌细胞,对化学疗法的抵抗力,针对治疗的生理障碍,如血脑屏障和阻碍获得治疗的细胞屏障。因此,需要副作用小且有效低毒的天然化学治疗剂。β-榄香烯是从莪术中提取的一种倍半萜类活性化合物,它已被国家食品药品监督管理局批准用于抗癌治疗,包括脑癌,前列腺癌,卵巢癌和肺癌。β-榄香烯具有广泛的抗肿瘤活性,它可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制新生血管形成,抑制肿瘤侵袭和转移。β-榄香烯是一种天然植物来源的成分,因其安全性和较少的不良反应,使其成为癌症治疗的有效药物。尽管β-榄香烯可以诱导各种肿瘤细胞凋亡,但关于β-榄香烯抑制乳腺癌细胞MCF-7生长的体内外研究很少,其机制尚不明确。本课题探究β-榄香烯对乳腺癌的治疗效果,并进一步探索其涉及的分子机制。目的:探究β-榄香烯在体内外抑制乳腺癌细胞MCF-7生长及相关分子机制。方法:1体内实验:雌性SPF级BALB/c裸鼠（35-42天）,体重16-18g,构建人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型后,随机分为模型组、50mg/kgβ-榄香烯组（低剂量组）、100mg/kgβ-榄香烯组（高剂量组）和25mg/kg5-FU组（阳性对照组）,每组六只。β-榄香烯给药组和阳性对照5-FU组隔天每只腹腔注射给药一次,模型组给予相同体积的0.9%Na Cl溶液。每2天称量各组裸鼠重量,并在实验过程中每3天使用游标卡尺测量各组裸鼠的肿瘤大小,21天后麻醉处死裸鼠,分离瘤体并称重,于4%多聚甲醛溶液中固定。计算各组瘤块体积和移植性肿瘤抑制率,HE染色用于观察各组肿瘤细胞的形态差异。TUNEL染色用于评估β-榄香烯对肿瘤细胞凋亡的影响,细胞增殖相关的核抗原（Ki-67）染色用于评估人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的增殖,免疫组化法检测LOX和Cyclin D1蛋白表达水平,免疫荧光法检测p-mTOR蛋白表达水平。2体外实验:选取人乳腺癌细胞MCF-7,设置实验组和对照组,用不同浓度的β-榄香烯处理实验组MCF-7细胞。采用MTS法、克隆形成实验和羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）染色法检测细胞增殖,在流式细胞仪（Beckman Coulter）上检测乳腺癌细胞周期,Hoechst 33258染色法检测MCF-7细胞凋亡形态及荧光强度,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化,Annexin V/PI双染色法检测β-榄香烯对乳腺癌细胞凋亡率变化,Western blot法检测Cleaved Caspase-9、Caspase-9、Cleaved Caspase-7、Caspase-7、Cleaved Caspase-3、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Cyclin D1、Cyclin D3、CDK2、CDK4、CDK6、p18、p21、p27、LOX、mTOR和p-mTOR蛋白在乳腺癌细胞MCF-7中表达水平。结果:1β-榄香烯对乳腺癌移植瘤生长的影响1.1β-榄香烯对MCF-7裸鼠移植瘤体积、重量及抑瘤率的影响模型组裸鼠体重先增加后降低,给药组体重一直在增加。给药组与模型组间体重无显着差别,说明β-榄香烯对裸鼠体重影响不大;给药组的肿瘤体积均小于模型组,且差异具有统计学意义（p<0.05）。肿瘤质量抑制率结果显示,与模型组比较,β-榄香烯（50mg/kg）对MCF-7裸鼠移植瘤的质量抑制率为76.17%,β-榄香烯（100mg/kg）抑制率为83.17%,阳性对照组抑制率为71.58%。1.2β-榄香烯对人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤增殖的影响HE染色结果显示,与模型组相比,β-榄香烯（50,100mg/kg）肿瘤组织坏死灶显着增加,胞浆淡染,其中β-榄香烯（100mg/kg）效果最为显着,阳性对照组与β-榄香烯（50mg/kg）次之。Ki-67结果显示,与模型组相比,阳性对照组和β-榄香烯（50,100mg/kg）组肿瘤组织中阳性细胞数量减少,Ki-67表达明显降低。1.3β-榄香烯对人乳腺癌细胞移植瘤凋亡的作用TUNEL染色结果显示,与模型组相比,β-榄香烯（50,100mg/kg）可以显着增加绿色荧光细胞数量,细胞荧光强度越来越强,并且乳腺癌细胞显现出凋亡形态,这些结果表明β-榄香烯可以诱导MCF-7异种移植瘤的细胞凋亡。1.4β-榄香烯对MCF-7细胞LOX、Cyclin D1和p-mTOR蛋白表达的影响免疫组织化学分析显示,与模型组相比,β-榄香烯（50,100mg/kg）显着降低LOX和Cyclin D1蛋白的表达。免疫荧光法显示,β-榄香烯降低了肿瘤细胞中p-mTOR蛋白的水平。这些结果表明β-榄香烯能抑制LOX和Cyclin D1蛋白的表达,抑制mTOR蛋白磷酸化。2β-榄香烯对人乳腺癌细胞MCF-7的作用2.1β-榄香烯对MCF-7细胞增殖的影响人乳腺癌细胞MCF-7经过不同浓度β-榄香烯（50,100,200,300,400μmol/L）处理,并于24、48、72h后应用于MTS试验。结果显示,β-榄香烯对MCF-7细胞活力的抑制作用呈剂量和时间依赖性。β-榄香烯浓度为400μmol/L,时间为72h时,抑制作用最显着。克隆形成实验结果显示,随着β-榄香烯（100,200,300μmol/L）浓度的增加,β-榄香烯显着抑制人乳腺癌细胞MCF-7克隆形成（p<0.05）。CFDA-SE染色法显示,与空白对照相比,随着β-榄香烯（100,200,300μmol/L）浓度增加,细胞荧光强度也逐渐增强。2.2β-榄香烯促进MCF-7细胞凋亡相对于空白对照组,随着β-榄香烯浓度（100,200,300μmol/L）的增加,一些MCF-7细胞的细胞核变得破碎,核染色质浓缩,β-榄香烯促进了MCF-7细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,降低了细胞线粒体膜电位,β-榄香烯（100,200,300μmol/L）增加凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-7、Cleaved Caspase-9和Bax的表达水平,降低凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9和Bcl-2的表达水平,促进了Caspase-3、Caspase-7和Caspase-9蛋白发生剪切,这些结果表明,β-榄香烯能够诱导人乳腺癌细胞发生凋亡。2.3β-榄香烯对人乳腺癌细胞MCF-7周期的影响相对于空白对照组,随着β-榄香烯浓度（100,200,300μmol/L）的增加,β-榄香烯以浓度依赖的方式显着增加了MCF-7细胞在G2/M期的比例,表明β-榄香烯使乳腺癌细胞MCF-7细胞周期阻滞于G2/M期。与空白对照组比较,β-榄香烯（100,200,300μmol/L）降低了周期相关蛋白CDK6、Cyclin D1、Cyclin D3、p18、p21和p27的表达水平,而CDK4蛋白表达升高。但CDK2蛋白的水平没有显着变化,这些结果表明β-榄香烯能将乳腺癌细胞MCF-7周期阻滞在G2/M期。2.4β-榄香烯对MCF-7细胞LOX、p-mTOR和mTOR蛋白表达的影响相对于空白对照组,随着β-榄香烯（100,200,300μmol/L）浓度的增加,p-mTOR和LOX蛋白的表达水平下降,mTOR总蛋白无显着变化,这些结果表明β-榄香烯能下调LOX蛋白水平,抑制mTOR蛋白的磷酸化表达。结论:β-榄香烯可以显着抑制裸鼠体内乳腺癌异种移植瘤的生长,其抗肿瘤作用可能与β-榄香烯抑制增殖和诱导凋亡相关。β-榄香烯抑制体外人乳腺癌细胞MCF-7增殖,诱导乳腺癌细胞凋亡和周期阻滞的发生,体内体外实验均表明β-榄香烯对乳腺癌的治疗作用与降低LOX和Cyclin D1蛋白水平以及抑制乳腺癌细胞mTOR磷酸化有关。
傅品悦[7]（2019）在《莪术醇对肝窦内皮细胞分泌机制的研究》文中认为目的:前期研究发现莪术醇对肝窦内皮细胞的超微结构和功能产生影响,能造成基底膜的形成,失窗孔化,致肝脏微循环障碍,但是这些细胞因子和细胞产物的改变对肝窦内皮细胞结构及功能影响的程度及其作用方式尚不明确。本研究选择肝窦内皮细胞的信号通路的相关蛋白作为检测指标来观察细胞模型孵育过程中分泌行为,揭示肝纤维化病变与肝窦内皮细胞信号通路的相关蛋白数量改变之间的关系,以探讨肝窦内皮细胞分泌机制。方法:先使用瘦素造模,建立肝纤维化肝窦内皮细胞模型,将细胞实验分组:取培养至对数生长期肝窦内皮细胞,分别进行分组:空白对照组;瘦素激活模型对照组（培养液中加入Leptin终浓度为l00μg/L进行肝窦内皮细胞的活化）;莪术醇组（先以Leptin将细胞激活后,加入莪术醇终浓度为50mg/L）水仙碱干预对照组（Leptin激活细胞后,给药终浓度6.25μg/mL）丹参酚酸B干预对照组（Leptin激活细胞后,给药终浓度为10-6mmol/L）。从整体细胞模型研究莪术醇对肝窦内皮细胞的分泌功能以及对分泌的TLR4通路核心表达因子的影响。采用观察肝窦内皮细胞超微结构,判断和比较各族肝纤维化的程度、差异以及药物作用的动态效果;实时荧光PCR检测各组分泌的TLR4信号通路（TLR4、MyD88、NF-κBp65）的信使RNA的表达水平;免疫蛋白印迹检测分泌的TLR4信号通路（TLR4、MyD88、NF-κBp65）蛋白表达水平;以及p-ERK、p-JNK、和p-P38的表达水平。实验数据采用SPSS22.0统计软件进行分析。结果:1.莪术醇对HSEC超微结构病变影响的研究结果显示,扫描电镜观察到经瘦素诱导激活的HSEC,其窗孔直径变小,窗孔数量大幅减少,甚至消失,出现“失窗孔化”现象。经莪术醇药物干预后,对比与瘦素激活模型组,窗孔变大,窗孔数量明显增多。2.实时荧光定量PCR检测结果:①瘦素模型组的TLR4、MyD88、NF-κBp65表达量明显高于空白对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;②秋水仙碱组的TLR4、MyD88、NF-κBp65表达量明显高于空白对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;③丹参酚酸B组的TLR4、MyD88、NF-κBp65表达量明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;④莪术醇组的TLR4、MyD88、NF-κBp65表达量明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）。3.免疫印迹检测结果:①瘦素模型组的TLR4、MyD88、NF-κBp65以及p-ERK、p-JNK、和p-P38表达量明显高于空白对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;②秋水仙碱组的 TLR4、MyD88、NF-κBp65 以及 p-ERK、p-JNK、和P38表达量明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;③丹参酚酸 B 组的 TLR4、MyD88、NF-κBp65 以及 p-ERK、p-JNK、和 p-P38 表达量明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;④莪术醇组的TLR4、MyD88、NF-κBp65 以及 p-ERK、p-JNK、和 p-P38 表达量明显低于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.莪术醇对肝纤维化的HSEC超微结构和分泌功能的改变效果明显,说明莪术醇对肝脏病理损伤有一定的保护作用。2.莪术醇抑制了 HSEC分泌的TLR4通路核心表达因子的表达水平,对TLR4信号通路具有调控作用,从而改善肝纤维化。3.莪术醇对HSEC分泌的p-P38、p-ERK、p-JNK等靶点也具有调节作用,能抑制MAPK通路核心因子的表达水平,进而从HSEC结构和分泌功能改变及相互关系的新视角阐明莪术醇治疗肝纤维化的分子机制,为莪术醇对肝纤维化的影响研究提供了新思路。
刘露露[8]（2019）在《广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响》文中进行了进一步梳理目的:主要探讨广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法:（1）用蒸馏法先对广西莪术进行挥发油混合物的提取,再以莪术醇标准品作为对照,通过气相色谱质谱法（GC-MS法）来检测和验证广西莪术油中的主要活性成分。（2）72只SPF级健康雄性昆明小鼠随机性地分成正常组（A组）、血瘀证肝纤维化小鼠模型组（B组）、广西莪术油治疗组（C组）（又分高、中、低剂量组,分别标C1、C2、C3组）、秋水仙碱组（D组）和丹酚酸B组（E组）。B组有12只小鼠,剩下的每组10只。A组常规喂水、饲料。另外的每组小鼠于实验第1天按0.05 m L/100 g剂量皮下注射40%浓度的CCl4+花生油溶剂,后面剩下的注射剂量改变为0.03 m L/100 g,每周注射3次;并从第2周开始按0.5 m L/只剂量尾静脉注射去甲肾上腺素（浓度为0.01 mg/m L）;分别在实验的第1和第10天按50 mg/m L剂量尾静脉注射胎牛血清;此外日常给20%酒精饮水和鸡蛋黄、花生粒等高脂低蛋白+饲料喂养。实验中途（第8、10、11周时）随机每组抽取一只小鼠做病理观察,本次造模共用12周。（3）造模成功后,C1-C3组分别按0.75 mg/100 g、0.5 mg/100 g、0.25 mg/100 g广西莪术油高、中、低剂量每天灌胃1次;D组按0.025 mg/100 g剂量每天灌胃1次;E组按0.25 mg/100 g剂量每天灌胃1次;A组和B组按C1组给药剂量予0.9%NaCl每天灌胃1次。以上除了A组,剩下的每组均在灌胃同时,持续给“40%CCl4+酒精饮水+高脂低蛋白饮食”来维持肝纤维化。共连续灌胃5周。（4）取材前给各小鼠称体重并观察和拍照记录其外观形态特征,评估小鼠中医血瘀证症候表现。随后称取各小鼠肝、脾脏重量,计算肝、脾指数;用HE、Masson染色法观察各肝脏肝纤维化病理情况并评分;用免疫组化法（IHC法）和蛋白质免疫印迹法（Western blot法）观察肝组织TGF-β1、Smad 2及Smad 3蛋白质的表达情况;用实时荧光定量PCR法（RT-PCR法）观察肝组织TGF-β1、Smad 2及Smad 3的mRNA表达情况。结果:（1）气相色谱质谱法（GC-MS）结果:通过计算机软件MassHunter化学工作站共检测出广西莪术油活性成分133种,经过仔细对比共筛选出匹配度大于80%的成分40种。色谱图显示,广西莪术油样品色谱图中不同出峰时间代表不同活性成分。莪术醇标准品出峰时间为28.731 min,并在蒸馏法提取的广西莪术油样品色谱图中发现了与莪术醇标准品出峰时间一致的坡峰,表明广西莪术油中含有莪术醇。（2）血瘀证中医症候外观表现为精神萎靡,反应迟钝,活动困难,毛发粗糙,舌面暗紫,舌下络脉突出显露并超舌底3/4。与A组相比,B组血瘀证中医症候评分显着增高（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别与B组比较,血瘀证中医症候评分均有不同程度降低（P<0.05或P<0.01）,尤其C1降低最为显着（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（3）造模和治疗前后,和A组对比,B组体重增加程度明显较低（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别与B组对比,体重增加程度均有不同程度的上升（P<0.05或P<0.01）,尤其C1组增加的最为显着（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（4）各组小鼠肝脏大体形态表现:A组肝脏大小较其他组更适中,呈血红色,表面嫩滑,没有颗粒感和结节,柔软且弹性好,边缘完整锐利,无油腻感;B组肝脏较正常组明显增大,颜色发暗无光泽,表面粗糙并布满小结节,颗粒感强,坚硬且无弹性,触之易碎,边缘加厚变钝,少量橘皮样变化,较油腻;C1组肝脏外观形态比较接近正常组,颜色较B组鲜红,表面无或有少量颗粒,弹性尚可;C2组肝脏大小、颜色、质地均与C1组比较相似但表面比C1组光泽度差一些,有少量结节,边缘较韧;C3组肝脏外观形态介于C2组和B组之间,肝体膨胀或缩小,表面欠光滑或有结节,触之较硬,稍有油腻感;D组和E组肝脏与C1组最为相近,有时接近C2组。（5）每组小鼠的肝指数和脾指数结果:和A组作对比,B组小鼠的肝指数和脾指数均显着增高（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别和B组作对比,每组小鼠的肝指数和脾指数均有不同程度下降（P<0.05或P<0.01）;其中C1组降低最为明显（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（6）各组小鼠肝组织病理（HE染色和Masson染色）结果:A组肝细胞和肝血窦均围绕中央静脉呈放射状整齐排列,肝小叶结构清晰,汇管区较圆无变大畸形,没有细胞炎性变化、坏死和异常的纤维增生;B组肝细胞和肝血窦排列混乱,肝小叶被异常增生的纤维组织破坏变成假小叶。汇管区有不同程度的变大、畸形改变;C1组病理改变比较接近A组,但偶尔仍可见少量肝细胞坏死和纤维增生;C2组肝细胞结构、大小和坏死情况与C1组比较相似,纤维组织增生更明显,部分汇管区变大、畸形;C3组肝脏病理形态介于C2组和B组之间,肝细胞坏死、变性及纤维增生改变均比较明显和增多;D组和E组肝脏病理变化与C1组最为相近,有时接近C2组。（7）各组小鼠肝组织胶原沉着面积百分比和病理评分结果:与A组比较,B组肝组织胶原沉着面积百分比和病理评分均显着升高（P﹤0.01）;C1-C3、D、E组分别与B组比较,均有明显不同程度的降低（P<0.05或P<0.01）,其中C1组降低程度最为显着（P﹤0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（8）免疫组化（IHC）结果:TGF-β1、Smad 2和Smad 3的IHC切片在显微镜下的阳性细胞呈黄色或棕黄色,且主要集中在汇管区、纤维间隔区及门脉区。其中TGF-β1、Smad 3阳性表达发生在细胞浆,而Smad 2阳性表达发生在细胞核。同时和A组对比,B组肝组织TGF-β1、Smad 2和Smad 3阳性率评分和蛋白表达半定量分析均明显上升（P﹤0.01）;C1-C3组、D组、E组分别和B组对比,各目的蛋白的阳性率评分和蛋白表达半定量分析均有明显的不同程度下降（P﹤0.05或P﹤0.01）,其中C1组下降最为明显（P﹤0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（9）Western blot结果:和A组做对比,B组肝脏组织的TGF-β1、Smad 2和Smad 3蛋白质的相对表达量显着增高（P<0.01）;而C1-C3组、D组与E组分别和B组做对比,各目的蛋白的相对表达量均有不同程度降低（P<0.05或P<0.01）;其中C1组降低最为明显（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。（10）RT-PCR结果:和A组做对比,B组肝脏组织TGF-β1、Smad 2和Smad 3的mRNA相对表达程度有明显升高（P<0.01）;C1-C3组、D组和E组分别与B组做对比,各目的基因的相对表达程度均有不同程度下降（P<0.05或P<0.01）;其中C1组下降最为明显（P<0.01）。且广西莪术油治疗组与阳性药物对照组（D和E组）结果相近。结论:（1）广西莪术油成分复杂多样,包括莪术醇、莪术二酮、吉马酮、榄香烯和β-榄香烯等,其抗肝纤维化作用是多种活性成分相互配合,相互约束,相互作用的结果;（2）广西莪术油可有效减轻血瘀证肝纤维化小鼠中医症候表现,增加体重,减轻肝膨胀及减轻肝、脾指数,在一定程度上可改善肝内的纤维化程度;（3）广西莪术油可以经过TGF-β1/Smads信号通路的调控作用,使血瘀证肝纤维化小鼠的肝组织内TGF-β1、Smad 2和Smad 3蛋白质以及基因（mRNA）的表达降低,进而减轻血瘀证肝纤维化小鼠肝组织的纤维化程度。
林连顺[9]（2019）在《榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态的影响及其机制的探讨》文中提出目的:观察榄香烯对人气道成纤维细胞（Human airway fibroblast,HAFB）诱导的人肺微血管内皮细胞（Human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMEC）增殖状态和凋亡影响,并通过检测HPMEC中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病2（B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2）、B细胞淋巴瘤/白血病2相关的X蛋白（B cell lymphoma/leukemia-2-Associateds X,Bax）的蛋白表达水平探讨其可能的分子机制,为局部应用榄香烯治疗良性气道狭窄提供新的基础实验依据。方法:（1）体外培养HAFB和HPMEC。HAFB随机分为5组:A1:对照组,DMEM干预;A2:30ug/ml榄香烯干预;A3:60ug/ml榄香烯干预;A4:90ug/ml榄香烯干预;A5:120ug/ml榄香烯干预。24h后移去旧培养基,加入DMEM继续培养24h后取出HAFB培养上清液保存备用。HPMEC随机分为6组:B1:对照组,DMEM干预;B2:常规培养的HAFB上清液干预;B3:30ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B4:60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B5:90ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预;B6:120ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预。（2）倒置显微镜下观察不同培养基培养24h、48h、72h后HPMEC的生长情况和形态变化,MTT法检测HPMEC的增殖活性,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测不同培养基处理24h后HPMEC的细胞凋亡率。（3）体外培养HPMEC,随机分为3组:G1:对照组,DMEM干预;G2:常规培养的HAFB上清液干预;G3:60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预。处理24h后提取HPMEC的总蛋白,Western blot法检测HPMEC中Caspase3、Bcl-2、Bax的表达水平。结果:（1）与对照组相比,常规培养的HAFB上清液对HPMEC增殖状态的影响没有统计学差异（P>0.05）,且不具有时间依赖性（P>0.05）。与对照组相比,榄香烯处理的HAFB上清液能抑制HPMEC增殖（P<0.05）。且榄香烯处理的HAFB上清液对HPMEC增殖活性的调节具有剂量依赖性（P<0.05）而没有时间依赖性（P>0.05）。（2）与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞形态没有明显改变。与对照组相比,不同浓度的榄香烯处理的HAFB上清液使HPMEC细胞形态发生改变,且随着榄香烯浓度的升高,HPMEC细胞排列变得不规则,细胞间隙逐渐变大。（3）与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞早期凋亡率有所上升（P<0.05）。与对照组相比,榄香烯处理的HAFB上清液干预HPMEC后,HPMEC细胞早期凋亡率明显升高（P<0.01）,且榄香烯浓度越高,早期凋亡率越高（P<0.01）。（4）与对照组相比,常规培养的HAFB上清液干预HPMEC后Caspase3的表达水平没有统计学差异（P>0.05）、Bcl-2表达下调（P<0.05）、Bax表达下调（P<0.01）。与对照组相比,60ug/ml榄香烯处理的HAFB上清液干预HPMEC后Caspase3表达上调（P<0.01）、Bax表达上调（P<0.01）、Bcl-2表达下调（P<0.01）。结论:经榄香烯处理过的HAFB上清液可通过诱导HPMEC细胞凋亡,从而抑制HPMEC细胞增殖;其分子机制可能与Bax、Caspase-3表达水平的上调和Bcl-2表达水平的下调有关。
王佳凤[10]（2019）在《莪术有效成分抑制HaCaT细胞增殖及基于NF-κB信号通路的作用机制研究》文中进行了进一步梳理莪术,据《中国药典2015版》记载,其性味辛、苦、温,归肝、脾经,能行气破血,消积止痛,用于症瘕痞块,瘀血经闭,胸痹心痛,食积胀痛。中医理论可通过清热凉血,活血化瘀的方剂治疗银屑病,与莪术功效相符。在银屑病的治疗中,多采用莪术发挥消炎活血的作用。课题组前期工作表明,莪术醇提物对银屑病动物模型有治疗改善作用,但莪术治疗银屑病的物质基础及作用机制仍不明确。HaCaT细胞繁殖能力强,免疫学特性与表皮角质形成细胞高度类似,是研究银屑病的最佳选择。本论文拟采用HaCaT细胞,研究莪术主要有效成分的作用效果及对NF-κB炎症信号通路的影响,为莪术治疗银屑病提供理论依据,并为莪术的进一步开发应用奠定基础。实验方法:一、用不同浓度的TNF-α、IFN-γ或TNF-α/IFN-γ联用,处理细胞6h、12h、24h、48h,采用CCK-8法检测细胞活力,根据细胞活力选择合适的细胞处理条件,复制细胞增殖模型,得到与银屑病患处相似的细胞生理特点。二、在细胞模型的基础上,用莪术醇、莪术烯醇、吉马酮、异莪术烯醇、莪术呋喃二烯酮、莪术二酮、β-榄香烯、姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素十种成分不同浓度分别处理HaCaT细胞24h、48h,计算不同成分的IC50值;选择作用效果较好的成分,分为高中低三个浓度组处理细胞模型,应用流式细胞术分析不同成分对细胞周期和凋亡的影响。三、用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定不同处理条件下细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-33四种炎症因子的分泌量,用蛋白质印迹法即Western Blot检测细胞中NF-κB p65、p-p65、IκB-α、Bcl-2/Bax蛋白的表达,用实时荧光定量PCR（RTPCR）考察信号通路中信号转导受体TRADD、TRAF2的mRNA的表达量,分析有效成分作对NF-κB信号通路的影响。实验结果:一、处理6h或12h:TNF-α、IFN-γ或TNF-α/IFN-γ联用各浓度组无明显促增殖作用（P>0.05）。处理24h:TNF-α组50ng/ml和100ng/ml两个浓度组有显着促进增殖的作用（P<0.01或P<0.05）,IFN-γ组细胞较空白组OD值有增高趋势（P>0.05）,TNF-α/IFN-γ联用组6.25ng/ml组有明显的促进增殖的作用（P<0.05）。处理48h:TNF-α呈浓度依赖性促进细胞增殖（P<0.01）,IFN-γ6.25ng/ml处理组可促进细胞增殖（P<0.01）,TNF-α/IFN-γ联用组无法有效促进细胞增殖。二、增殖抑制实验中,各成分处理48h IC50优于24h,其中,莪术烯醇、莪术二酮、吉马酮、β-榄香烯、姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素可显着抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖（P<0.01或P<0.05）,作用稳定;周期实验中,莪术烯醇、莪术二酮、吉马酮、姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素组G1期细胞增多,吉马酮高浓度组G2期增多;凋亡实验中,各成分均可以不同程度促进细胞凋亡。三、莪术烯醇、莪术二酮、吉马酮、β-榄香烯100μg/ml,姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素10μg/ml,可显着抑制TNF-α诱导的IL-1β、IL-6、IL-8、IL-33四种白介素因子的过表达（P<0.01或P<0.05）,可不同程度抑制NF-κB信号通路IκB-α、p-p65蛋白和信号转导受体TRADD mRNA和TRAF2 mRNA的表达。实验结论:莪术有效成分莪术烯醇、莪术二酮、吉马酮、β-榄香烯、姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素可显着抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。有效成分可抑制TNF-α诱导的炎症因子过表达,抑制相关转导蛋白的表达,说明莪术有效成分可抑制TNF-α诱导的NF-κB信号通路激活。
二、β-榄香烯诱导肝癌细胞凋亡效应及机制（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、β-榄香烯诱导肝癌细胞凋亡效应及机制（论文提纲范文）
（1）榄香烯改善经肝动脉灌注化疗栓塞术后患者介入栓塞综合征的疗效评估及机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 榄香烯改善经肝动脉灌注化疗栓塞术后介入栓塞综合征的临床疗效观察 |
| 对象与方法 |
| 结果 |
| 第二部分 榄香烯改善经肝动脉灌注化疗栓塞术后介入栓塞综合征的机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 原发性肝癌经肝动脉灌注化疗栓塞术治疗相关并发症的发生及防治措施 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（2）榄香烯在线粒体相关途径下抗肿瘤研究进展（论文提纲范文）
| 1 榄香烯作用于线粒体相关途径的抗肿瘤作用研究现状 |
| 1.1 榄香烯于线粒体途径下诱导肿瘤细胞凋亡 |
| 1.1.1 形态学相关及相关离子变化 |
| 1.1.2 相关遗传物质及代谢产物 |
| 1.1.3 相关信号通路及活性因子 |
| 1.2 榄香烯对肿瘤细胞生长、增殖的抑制作用 |
| 1.2.1 形态学及相关酶学改变 |
| 1.2.2 相关通路、代谢产物及活性因子影响 |
| 1.3 细胞敏感性及耐药性作用 |
| 1.3.1 相关增敏作用 |
| 1.3.2 相关耐药抑制及逆转作用 |
| 1.4 肿瘤细胞侵袭、转移过程相关 |
| 1.5 其他 |
| 2 基于线粒体分子及细胞生物学作用对榄香烯抗肿瘤机制进行整合及联系 |
| 2.1 线粒体相关形态学及微结构的改变 |
| 2.2 线粒体相关蛋白表达及活性因子的改变 |
| 2.3 对榄香烯抗肿瘤线粒体相关物质及途径进行整合 |
| 2.4 榄香烯线粒体相关途径抗肿瘤效应的复杂性 |
| 3 线粒体途径下榄香烯抗肿瘤相关研究展望 |
（3）榄香烯抗肿瘤作用机制研究进展（论文提纲范文）
| 1 直接抗肿瘤作用 |
| 1.1 诱导肿瘤细胞凋亡 |
| 1.1.1 阻滞细胞周期 |
| 1.1.2 调控相关基因表达水平 |
| 1.1.3 抑制端粒酶活性 |
| 1.1.4 促使细胞内Ca2+稳态失衡 |
| 1.2 抗血管生成 |
| 2 诱导肿瘤细胞分化 |
| 3 抑制肿瘤细胞侵袭和迁移 |
| 4 调节机体免疫功能 |
| 5 提高耐药肿瘤细胞对化疗的敏感性 |
| 6 结语 |
（4）榄香烯注射液联合TACE对于原发性肝癌患者的疗效分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 1 资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 肝癌诊断标准 |
| 1.3 临床分期标准 |
| 1.4 纳入标准 |
| 1.5 排除标准 |
| 1.6 剔除标准 |
| 2 方法 |
| 2.1 治疗方法 |
| 2.2 临床观察指标 |
| 2.3 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 两组患者一般情况 |
| 3.2 生活质量改善情况 |
| 3.3 中医症状改善情况比较 |
| 3.4 毒性反应比较 |
| 3.5 免疫指标比较 |
| 3.6 肿瘤标志物比较 |
| 3.7 不良反应发生率比较 |
| 3.8 肿瘤缓解率比较 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1--综述 |
| 参考文献 |
| 附录2--普外肿瘤科肿瘤患者卡氏(KPS)评定表 |
| 附录3--第8版肝癌TNM分期 |
| 附录4--中医症状分级量表 |
| 附录5--攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（5）榄香烯联合一代EGFR-TKIs治疗晚期肺腺癌的协同增效研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 1 引言 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 伦理审查 |
| 2.2 病例资料 |
| 2.3 纳入标准 |
| 2.4 排除标准 |
| 2.5 治疗方法 |
| 2.6 疗效分析指标 |
| 2.7 不良反应评价标准 |
| 2.8 统计学处理 |
| 3 研究步骤技术路线图 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 榄香烯在抗肿瘤研究中的进展 |
| 综述参考文献 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（6）β-榄香烯对人乳腺癌MCF-7细胞株体内外生长的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表(Abbreviation) |
| 1 前言 |
| 第一章 β-榄香烯对人乳腺癌MCF-7细胞体内研究 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验用细胞株 |
| 2.1.2 实验动物 |
| 2.1.3 实验主要试剂与药物 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 乳腺癌裸鼠模型建立与分组 |
| 2.2.3 肿瘤质量抑制率测定 |
| 2.2.4 HE染色 |
| 2.2.5 TUNEL染色 |
| 2.2.6 免疫组化染色检测Ki-67,LOX和CyclinD1蛋白的表达 |
| 2.2.7 免疫荧光检测p-mTOR蛋白的表达 |
| 2.2.8 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 裸鼠移植瘤生长情况 |
| 3.2 裸鼠肿瘤的生长曲线及瘤体重量 |
| 3.3 β-榄香烯对MCF-7移植瘤裸鼠增殖能力的影响 |
| 3.4 TUNEL染色法检测细胞凋亡 |
| 3.5 β-榄香烯通过mTOR/LOX途径在体内抑制乳腺癌细胞的生长 |
| 第二章 β-榄香烯对人乳腺癌MCF-7细胞体外研究 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验用细胞株 |
| 2.1.2 实验药物 |
| 2.1.3 实验主要试剂 |
| 2.1.4 .实验仪器 |
| 2.1.5 主要试剂配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 MTS比色法检测人乳腺癌细胞MCF-7的活力 |
| 2.2.3 CFDA-SE染色法检测人乳腺癌细胞MCF-7的增殖 |
| 2.2.4 克隆形成实验 |
| 2.2.5 细胞周期检测 |
| 2.2.6 Hoechst33258染色法检测细胞核形态变化 |
| 2.2.7 AnnexinⅤ-FITC结合流式细胞仪检测细胞凋亡率 |
| 2.2.8 MCF-7线粒体膜电位检测 |
| 2.2.9 人乳腺癌细胞MCF-7蛋白的提取 |
| 2.2.10 蛋白定量 |
| 2.2.11 蛋白印记(Western Blot)方法 |
| 2.2.12 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 β-榄香烯对乳腺癌细胞增殖能力的影响 |
| 3.1.1 β-榄香烯对人乳腺癌细胞MCF-7形态和活力的影响 |
| 3.1.2 β-榄香烯对MCF-7细胞克隆形成能力的影响 |
| 3.1.3 CFDA-SE染色法检测β-榄香烯对MCF-7细胞增殖的抑制作用 |
| 3.1.4 β-榄香烯通过mTOR/LOX通路诱导MCF-7细胞周期阻滞在G2/M期 |
| 3.2 β-榄香烯对乳腺癌细胞凋亡的影响 |
| 3.2.1 β-榄香烯对MCF-7细胞核的影响 |
| 3.2.2 β-榄香烯诱导乳腺癌细胞凋亡 |
| 3.2.3 β-榄香烯对MCF-7细胞线粒体膜电位的影响 |
| 3.2.4 β-榄香烯对MCF-7细胞凋亡相关蛋白CleavedCaspase-9、Cleaved Caspase-7、Cleaved Caspase-3、Caspase-9、Caspase-7、Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 β-榄香烯抑制MCF-7细胞的活力和增殖 |
| 4.2 β-榄香烯对乳腺癌细胞凋亡和细胞周期的影响 |
| 4.3 β-榄香烯抑制乳腺癌的发生发展可能的作用机制 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 β-榄香烯的分子靶点及其在癌症治疗中的潜在作用 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（7）莪术醇对肝窦内皮细胞分泌机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.莪术醇对HESC的超微结构的影响 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验步骤 |
| 1.3 实验结果 |
| 小结 |
| 2.基于TLR4 通路研究莪术醇对HSEC分泌功能的影响 |
| 2.1 Western-Blot法检测相关因子 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验步骤 |
| 2.1.3 实验结果 |
| 2.2 荧光定量PCR |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验步骤 |
| 2.2.3 实验结果 |
| 小结 |
| 3.莪术醇对肝窦内皮细胞分泌的ERK、JNK、和P38 的表达的影响 |
| 3.1 Western-Blot法检测相关因子 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验步骤 |
| 3.1.3 实验结果 |
| 小结 |
| 4 讨论 |
| 5 展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介及攻读学位期间获得的科研成果 |
（8）广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 蒸馏法提取广西莪术油及其活性成分的GC-MS研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验药材和试剂 |
| 1.1.1 实验药材 |
| 1.1.2 实验试剂 |
| 1.2 仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 蒸馏法提取广西莪术油 |
| 2.2 气相色谱质谱法(GC-MS) |
| 2.2.1 制备广西莪术油样品溶液 |
| 2.2.2 制备莪术醇标准品溶液 |
| 2.2.3 气相色谱质谱条件 |
| 2.2.4 结果分析 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 广西莪术油功效及提取研究进展 |
| 4.2 广西莪术油各主要成分的特点及治疗肝病的作用 |
| 第二部分 广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠一般情况、肝脾指数和病理的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药品和试剂 |
| 1.3 仪器及设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验药物的制备 |
| 2.1.1 制备40%四氯化碳油剂 |
| 2.1.2 制备去甲肾上腺素溶液 |
| 2.1.3 制备胎牛血清溶液 |
| 2.1.4 制备广西莪术油溶液 |
| 2.1.5 制备丹参酚酸B溶液 |
| 2.1.6 制备秋水仙碱溶液 |
| 2.2 实验分组及给药方法 |
| 2.2.1 实验分组 |
| 2.2.2 给药方法 |
| 2.2.2.1 血瘀证肝纤维化小鼠模型的制备 |
| 2.2.2.2 各组药物治疗血瘀证肝纤维化小鼠 |
| 2.3 实验取材及标本的制备 |
| 2.4 测定指标 |
| 2.4.1 小鼠外观形态变化观察 |
| 2.4.2 小鼠肝脏外观观察和肝、脾指数 |
| 2.4.3 肝组织切片和HE染色方法 |
| 2.4.3.1 肝组织切片 |
| 2.4.3.2 HE染色方法 |
| 2.4.4 肝组织Masson染色方法 |
| 2.5 观察小鼠肝脏病理情况 |
| 2.6 实验数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 小鼠一般情况 |
| 3.2 各组小鼠血瘀证外观表情况及评分结果 |
| 3.3 各组小鼠体重增长情况 |
| 3.4 肝组织大体形态比较 |
| 3.5 小鼠肝、脾指数结果 |
| 3.6 各组小鼠肝组织HE染色结果 |
| 3.7 各组小鼠肝组织Masson染色结果和肝纤维化程度结果 |
| 3.7.1 各组小鼠肝组织Masson染色结果 |
| 3.7.2 各组小鼠胶原沉着面积百分比 |
| 3.7.3 各组小鼠肝组织纤维化病理情况评分结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物和药物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 血瘀证肝纤维化小鼠模型的制备 |
| 2.2 实验取材和标本的制备 |
| 2.3 测定指标 |
| 2.3.1 肝组织免疫组织化学染色(IHC)方法 |
| 2.3.2 肝组织蛋白质免疫印迹(Western blot)方法 |
| 2.3.3 肝组织RT-PCR方法 |
| 2.4 数据统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1、Smad2、Smad3 蛋白表达影响 |
| 3.1.1 肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3 的免疫组化结果 |
| 3.1.2 蛋白质免疫印迹( Western blot )结果 |
| 3.2 RT-PCR结果 |
| 4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录一 |
| 附录二 |
| 缩略词表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介及攻读学位期间获得的科研成果 |
（9）榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态的影响及其机制的探讨（论文提纲范文）
| 附录 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态的影响 |
| 材料与方法 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 材料及仪器 |
| 1.3 检测细胞增殖状态的实验方法 |
| 1.4 检测细胞凋亡的实验方法 |
| 第一部分 技术路线图 |
| 结果 |
| 1.1 不同上清液干预后HPMEC的生长曲线图 |
| 1.2 不同上清液干预后HPMEC的细胞形态变化 |
| 1.3 不同上清液干预后HPMEC早期凋亡率 |
| 讨论 |
| 第二部分 榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态影响的可能机制 |
| 材料与方法 |
| 2.1 材料及仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 第二部分技术路线图 |
| 结果 |
| 2.1 Western blot法测定HPMEC中Caspase3 相对表达量 |
| 2.2 Western blot法测定HPMEC中Bcl-2 相对表达量 |
| 2.3 Western blot法测定HPMEC中Bax相对表达量 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:榄香烯的临床应用现状与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）莪术有效成分抑制HaCaT细胞增殖及基于NF-κB信号通路的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究工作的背景与意义 |
| 1.2 国内外研究进展 |
| 1.3 本文的主要贡献与创新 |
| 1.4 本论文的结构安排 |
| 第二章 HaCaT细胞培养及其增殖模型的复制 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 数据处理及分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 莪术有效成分对细胞模型增殖、周期和凋亡的影响 |
| 3.1 细胞增殖抑制实验 |
| 3.2 各有效成分对TNF-α诱导的HaCaT的周期的影响 |
| 3.3 各有效成分对TNF-α诱导的HaCaT的凋亡的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 基于NF-κB信号通路研究莪术有效成分作用机制 |
| 4.1 有效成分对TNF-α诱导的HaCaT细胞分泌IL-1β、IL-6、IL-8、IL33的影响 |
| 4.2 有效成分对TNF-α诱导的HaCaT细胞表达NF-κB p65/pi-p65、IκB-α、Bcl-2/bax蛋白表达的影响 |
| 4.3 有效成分对TNF-α诱导的HaCaT细胞中TRADD,TRAF2基因表达的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 全文总结与展望 |
| 5.1 全文总结 |
| 5.2 研究展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 |
四、β-榄香烯诱导肝癌细胞凋亡效应及机制（论文参考文献）
- [1]榄香烯改善经肝动脉灌注化疗栓塞术后患者介入栓塞综合征的疗效评估及机制探讨[D]. 王锦程. 西南医科大学, 2021(01)
- [2]榄香烯在线粒体相关途径下抗肿瘤研究进展[J]. 史亚博,陈婷婷. 现代中医药, 2020(05)
- [3]榄香烯抗肿瘤作用机制研究进展[J]. 王乔宇,赵志刚. 药学进展, 2020(07)
- [4]榄香烯注射液联合TACE对于原发性肝癌患者的疗效分析[D]. 朱亚玲. 湖北中医药大学, 2020(09)
- [5]榄香烯联合一代EGFR-TKIs治疗晚期肺腺癌的协同增效研究[D]. 杨斐. 杭州师范大学, 2020(02)
- [6]β-榄香烯对人乳腺癌MCF-7细胞株体内外生长的影响及机制研究[D]. 李艺. 安徽中医药大学, 2020(03)
- [7]莪术醇对肝窦内皮细胞分泌机制的研究[D]. 傅品悦. 广西中医药大学, 2019(03)
- [8]广西莪术油对血瘀证肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响[D]. 刘露露. 广西中医药大学, 2019(03)
- [9]榄香烯对人气道成纤维细胞诱导的人肺微血管内皮细胞增殖状态的影响及其机制的探讨[D]. 林连顺. 福建医科大学, 2019(07)
- [10]莪术有效成分抑制HaCaT细胞增殖及基于NF-κB信号通路的作用机制研究[D]. 王佳凤. 电子科技大学, 2019(01)